【正文】 方式傳遞。（四）芽胞 (spore) 某些革蘭陽性菌在一定環(huán)境條件下，胞漿脫水濃縮，在菌體內(nèi)部形成一個圓形或卵圓形的小體，稱為芽胞。結(jié)構(gòu)為芽胞核心(核質(zhì)、核糖體、酶類等)及芽胞被膜(6層之多、致密、無通透性)。(3) 含有特殊的化學(xué)組份——吡啶二羧酸鈣鹽(DPA)，并且含水量少，大大提高了芽胞的耐熱性。3．功 能(1) 與消毒滅菌有關(guān)：芽胞的抵抗力極強(qiáng)，在消毒滅菌時(shí)，應(yīng)以殺死芽胞作為滅菌的指標(biāo)(121℃ 20分鐘)。(3) 有助于鑒別細(xì)菌：不同芽胞的大小、形狀、位置因菌而異，可依此鑒別細(xì)菌。細(xì)菌的化學(xué)組成由水、無機(jī)鹽、蛋白質(zhì)、糖類、脂類、核酸等組成，還有一些特有的化學(xué)成分，如肽聚糖、胞壁酸、磷壁酸、吡啶二羧酸等，在真核細(xì)胞中尚未發(fā)現(xiàn)。發(fā)酵（以有機(jī)物為受氫體），呼吸（以無機(jī)物為受氫體）。檢測細(xì)菌對各種底物(基質(zhì))的代謝作用及代謝產(chǎn)物，從而鑒別細(xì)菌的各類反應(yīng)稱為細(xì)菌的生化反應(yīng)。如：大腸埃希菌：分解葡萄糖，產(chǎn)酸產(chǎn)氣；分解乳糖，產(chǎn)酸產(chǎn)氣；傷寒沙門菌：分解葡萄糖, 產(chǎn)酸不產(chǎn)氣；不分解乳糖。常用歐立希試劑（對二甲基氨基苯甲醛）與無色的吲哚結(jié)合形成玫瑰紅色吲哚來指示。大腸埃希菌：分解糖，產(chǎn)丙酮酸，PH≤，試驗(yàn)（+），紅色；產(chǎn)氣桿菌：分解糖，產(chǎn)中性醇，PH，試驗(yàn)（），桔紅色。產(chǎn)氣桿菌：分解糖，能產(chǎn)生乙酰甲基甲醇，VP試驗(yàn)（+）大腸埃希菌：分解糖，不能產(chǎn)生乙酰甲基甲醇，VP試驗(yàn)（）（5）枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)：檢測細(xì)菌利用銨鹽和枸櫞酸鹽為氮源和碳源，能夠生長繁殖的試驗(yàn)。指示劑：酚紅，紅色反應(yīng)。常用鉛鹽、亞鐵鹽與硫化氫產(chǎn)生黑色沉淀來指示。重要的合成代謝產(chǎn)物有（1） 熱原質(zhì) 許多革蘭陰性菌和少數(shù)革蘭陽性菌合成的注入人體或動物體內(nèi)能引起發(fā)熱反應(yīng)的多糖類物質(zhì)，故名熱原質(zhì)。在制備和應(yīng)用生物制品、抗生素、注射用藥液等時(shí)，應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作，防止細(xì)菌污染。有內(nèi)毒素和外毒素兩類，均有強(qiáng)烈的毒性作用，是細(xì)菌致病的重要物質(zhì)基礎(chǔ)。如葡萄球菌能產(chǎn)生血漿凝固酶，鏈球菌可以產(chǎn)生透明質(zhì)酸酶等。（3）色素 某些細(xì)菌在一定條件下能產(chǎn)生不同顏色的物質(zhì)。（4）抗生素 某些微生物在代謝過程中產(chǎn)生的能抑制或殺滅其他微生物和腫瘤細(xì)胞的物質(zhì)，稱為抗生素。（5）維生素 細(xì)菌能合成某些維生素，除供自身需要外，還可分泌到菌體外,如大腸埃希菌可合成B族維生素和維生素K等，被人體利用。與抗菌素不同的是抗菌范圍狹窄，僅對近緣關(guān)系的細(xì)菌才有作用。 五、細(xì)菌的生長繁殖與培養(yǎng)（一）生長繁殖的條件1．營養(yǎng)物質(zhì)水碳 源 各種碳的有機(jī)物或無機(jī)物均可吸收利用，病原菌主要從糖類獲取碳源。無機(jī)鹽 常用元素主要有磷、硫、鉀、鈉、鎂、鈣、鐵等，微量元素有鈷、鋅、錳、銅、鉬等。2．酸堿度 ~，個別細(xì)菌如霍亂弧菌，~，~。(2) 微需氧菌 氧濃度10%對菌有影響，如空腸彎曲菌、幽門螺桿菌。（二）生長方式和速度1．生長方式 一般以二分裂法進(jìn)行無性繁殖，大多數(shù)細(xì)菌繁殖速度極快，一般20~30分鐘分裂一次，但結(jié)核分枝桿菌繁殖較慢，約18—20小時(shí)才分裂一次。細(xì)菌的群體生長可分四期（1）遲緩期 細(xì)菌處于適應(yīng)、準(zhǔn)備狀態(tài)，繁殖極少，一般在培養(yǎng)后 l~4小時(shí)。（3）穩(wěn)定期 本期中細(xì)菌繁殖速度減慢，死亡數(shù)逐步上升，繁殖數(shù)與死亡數(shù)大致平衡。（4）衰退期 細(xì)菌處于衰退型、難以辨認(rèn)。按營養(yǎng)和用途不同，可分 （1）基礎(chǔ)培養(yǎng)基 牛肉浸液十蛋白胨十NaCl十磷酸鹽，調(diào)pH至7．4即成。（2）增菌培養(yǎng)基 基礎(chǔ)培養(yǎng)基添加其他營養(yǎng)物質(zhì)(生長因子、葡萄糖、血液、血清、酵母浸液等)（3）選擇培養(yǎng)基 在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，使之促進(jìn)目的菌生長，抑制其他菌生長，從而使目的菌從混雜的標(biāo)本中分離出來，如SS瓊脂。如EMB瓊脂。按物理性狀分（1）液體培養(yǎng)基 常用于大量純種菌的繁殖，也可用于增菌及生化反應(yīng)。常用于細(xì)菌的分離、純化和純種菌的保存。2．細(xì)菌在培養(yǎng)基中的生長情況（1）在液體培養(yǎng)基中情況① 混濁生長 大多數(shù)細(xì)菌為此種狀況。 ③ 表面生長 專性需氧菌往往生長在液體表面、形成菌膜。（3）在固體培養(yǎng)基中生長情況菌落 將細(xì)菌劃線接種在固體培養(yǎng)基表面，經(jīng)18~24小時(shí)培養(yǎng)后，由單個細(xì)菌生長繁殖形成的一個肉眼可見的細(xì)菌集團(tuán)，稱為菌落。一般分為三型：光滑型菌落(S型) 表面光滑、濕潤，邊緣整齊。粘液型菌落(M型) 表面粘稠，有光澤，似水珠樣。4．應(yīng)用：臨床上培養(yǎng)細(xì)菌主要是做病原學(xué)診斷，通過藥敏試驗(yàn)來選擇用藥；基礎(chǔ)研究方面主要是鑒定細(xì)菌，研究其生物學(xué)性狀、致病性和開發(fā)生物制品。（2）何謂質(zhì)粒？列舉常見的質(zhì)粒及其控制的性狀。（4）何謂芽胞？簡述芽胞的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和醫(yī)學(xué)意義。（6）細(xì)菌群體生長繁殖可分幾個期？每期的重要特點(diǎn)是什么？（7）細(xì)菌有哪些合成代謝產(chǎn)物？（8）何謂菌落？怎樣通過菌落鑒別細(xì)菌？3．論述題（1）試比較G+與G菌細(xì)胞壁在結(jié)構(gòu)、功能上的差異。第二節(jié) 病 毒掌握 病毒的概念、結(jié)構(gòu)和功能，亞病毒種類和朊粒的概念。了解 病毒的大小與形狀、病毒分類原則。病毒與人類關(guān)系非常密切：①人類傳染病75%由病毒引起；②有些病毒傳染性極強(qiáng)，可引起世界大流行；③有些病毒可引起持續(xù)性感染；④有些病毒與腫瘤和自身免疫性疾病的發(fā)生密切相關(guān)；⑤新的病毒還不斷地被發(fā)現(xiàn)。一、病毒的大小與形態(tài)：病毒體：指結(jié)構(gòu)完整、并具有感染性的成熟病毒顆粒。（與其他微生物大小比較，見教課書圖219）測量單位：納米（nm），病毒大小為20~300nm范圍之間。病毒基本形態(tài)有五種。1．核心位于病毒體中心。功能：攜帶遺傳信息，控制生命特征?；瘜W(xué)成分：為蛋白質(zhì)。每個殼粒稱為一個形態(tài)亞單位。② 20面體立體對稱型：核酸濃集于中心，外周由一定數(shù)量的殼粒組成具有20個面（每個面呈等邊三角形）、12個頂、30個棱的立體結(jié)構(gòu)，呈20面體立體對稱。 功 能：① 保護(hù)核心。③ 具有抗原性，是重要的病毒抗原。3．包膜 有些病毒體最外面還有一層膜包繞，稱為包膜。 有包膜病毒：有核心、衣殼和包膜。稱為包膜子?；虼掏?。包膜蛋白多為病毒基因組編碼。（二）病毒的化學(xué)組成與功能1．核酸 位于病毒體的核心，且僅含一種核酸（DNA或RNA）；（1）病毒復(fù)制：以核酸為模板，經(jīng)轉(zhuǎn)錄、翻譯，合成病毒子代核酸、結(jié)構(gòu)蛋白，再裝配成子代病毒體。（3）具有感染性：應(yīng)用化學(xué)方法除去病毒衣殼蛋白后獲得的核酸，可增殖、具有感染性，易感細(xì)胞范圍較廣，稱為感染性核酸；但感染性比病毒體要低?？煞郑航Y(jié)構(gòu)蛋白 構(gòu)成病毒衣殼、包膜和基質(zhì)；非結(jié)構(gòu)蛋白 由病毒基因組編碼，但不參與病毒體構(gòu)成部分的蛋白多肽，可存在病毒體內(nèi)，也可存在感染細(xì)胞中，包括多種酶類（如蛋白水解酶、DNA多聚酶等）和具有特殊功能的蛋白（如抑制宿主細(xì)胞生化合成蛋白）。三、病毒的增殖：特點(diǎn)：① 必須在易感的活細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行。② 以自我復(fù)制方式進(jìn)行。（一）復(fù)制周期：從病毒進(jìn)入細(xì)胞開始，經(jīng)基因組復(fù)制，到許多子代病毒釋放出來的整個過程，稱為病毒的復(fù)制周期。病毒體在各種力的作用下與細(xì)胞接觸。這種特異性的結(jié)合，決定了病毒嗜組織特征。2．穿入 病毒進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，可通過數(shù)種方式穿入細(xì)胞：① 吞飲：無包膜病毒吸附細(xì)胞后，由細(xì)胞膜內(nèi)陷而被吞人細(xì)胞內(nèi)。3．脫殼 進(jìn)入細(xì)胞的病毒體必須脫去蛋白衣殼，使病毒基因組發(fā)揮指令作用。4．生物合成 病毒的基因組利用宿主細(xì)胞提供的條件和物質(zhì)，指令合成大量的子代病毒核酸和病毒蛋白質(zhì)，一般分兩個階段，①早期基因轉(zhuǎn)錄、翻譯，產(chǎn)生必須的復(fù)制酶和非結(jié)構(gòu)蛋白；②開始病毒核酸的復(fù)制，并轉(zhuǎn)錄、翻譯產(chǎn)生病毒結(jié)構(gòu)蛋白。5．裝配與釋放 裝配是指將生物合成的核酸與蛋白質(zhì)，組裝成子代病毒的過程。 病毒核衣殼裝配好后，即以不同的方式從宿主細(xì)胞內(nèi)釋放出去。②出芽釋放：有包膜病毒多以此方式釋放，在出芽過程中，帶上核膜或細(xì)胞膜，以促成病毒結(jié)構(gòu)的完整性（如流感病毒）。（二）異常增殖與干擾現(xiàn)象1．病毒的異常增殖（1）頓挫感染 指病毒進(jìn)入宿主細(xì)胞后，由于宿主細(xì)胞缺乏病毒復(fù)制所需要的酶或能量等必要條件，導(dǎo)致不能復(fù)制出子代病毒，稱為頓挫感染。 （2）缺陷病毒 指病毒基因組不完整或發(fā)生嚴(yán)重改變，不能復(fù)制出完整的有感染性的病毒顆粒。這種有輔助作用的病毒被稱為輔助病毒。多數(shù)病毒之間都會出現(xiàn)干擾現(xiàn)象，甚至滅活病毒也能干擾活病毒。（內(nèi)容見以后章節(jié)）② 病毒間競爭性干擾，如占據(jù)或改變細(xì)胞表面病毒受體而產(chǎn)生干擾；病毒改變宿主細(xì)胞代謝途徑產(chǎn)生干擾；甚至能阻止另一種病毒mRNA轉(zhuǎn)譯而產(chǎn)生干擾等。病毒復(fù)制亦可產(chǎn)生缺陷病毒，若產(chǎn)生的量多，可競爭細(xì)胞表面的病毒受體而發(fā)生自身干擾。四、理化因素對細(xì)菌的影響滅活 病毒受理化因素作用后失去感染性，稱為滅活。物理因素1．溫度 病毒耐冷怕熱。熱對病毒的滅活作用，主要是破壞病毒的衣殼蛋白、糖蛋白刺突，也能破壞某些酶活性，因而阻止了病毒的吸附和生物合成等。2．酸堿度（pH） 大多數(shù)病毒在pH5~9范圍內(nèi)穩(wěn)定，強(qiáng)酸或強(qiáng)堿條件下可被滅活。因此，病毒體對PH的穩(wěn)定性常被用于鑒別病毒。50％中性甘油鹽水常用于保存含病毒的組織塊。主要是導(dǎo)致病毒核酸鏈發(fā)生斷裂，紫外線則使病毒核苷酸結(jié)構(gòu)變化，影響核酸復(fù)制，但有些病毒經(jīng)紫外線滅活后易復(fù)活，故不宜用此法制備滅活病毒疫苗。因脂溶劑對無包膜病毒幾乎無作用，故乙醚滅活實(shí)驗(yàn)可鑒別病毒有無包膜。3．氧化劑 （過氧化氫、高錳酸鉀、漂白粉等）、鹵素（碘及碘化物）、醇類（甲醇、乙醇等）均能使大多數(shù)病毒滅活。4．抗生素與中草藥 抗生素對病毒無抑制或滅活作用。五、病毒的分類病毒的分類見教課書 表24。包括1．類病毒 均為植物病毒。主要依賴宿主細(xì)胞RNA多聚酶Ⅱ進(jìn)行RNA合成。也僅有單鏈RNA組成，可分兩大類：① 可編碼自己的衣殼蛋白。兩者均需伴隨輔助病毒才能增殖。具有傳染性，也稱蛋白侵染顆粒。人類的老年癡呆等可能與其感染有關(guān)。（2）簡述病毒的基本結(jié)構(gòu)。（4）簡述理化因素對病毒的影響。（2）與原核細(xì)胞型微生物相比，病毒的基因組有哪些特點(diǎn)？第三節(jié) 真 菌掌握 真菌概念、真菌的種類熟悉 真菌形態(tài)與結(jié)構(gòu)培養(yǎng)特性真菌是一大類具有細(xì)胞壁，不含葉綠素的真核細(xì)胞型微生物。在自然界分布極為廣泛，與人類關(guān)系非常密切。一、真菌的形態(tài)與結(jié)構(gòu)形態(tài)多樣，比細(xì)菌大得多。2．類酵母型真菌 芽生方式繁殖，可產(chǎn)生假菌絲，培養(yǎng)基內(nèi)可見假菌絲體。有些真菌在體內(nèi)或含有動物蛋白的培養(yǎng)基上，37℃培養(yǎng)時(shí)呈酵母菌，在普通培養(yǎng)基25℃培養(yǎng)時(shí)呈絲狀菌，這種因環(huán)境條件的改變，而發(fā)生兩種形態(tài)互變，稱為真菌的二相性，如球孢子菌等。菌絲產(chǎn)生分支且交織成團(tuán)，稱菌絲體。；1． 按結(jié)構(gòu)分為：有隔菌絲和無隔菌絲；2． 功能分為：營養(yǎng)菌絲、氣生菌絲和生殖菌絲。2．孢子 是真菌的生殖結(jié)構(gòu)。病原性真菌只有無性孢子。根據(jù)形態(tài)可分為分生孢子、葉狀孢子和孢子囊孢子三種。包括芽生孢子、厚膜孢子、關(guān)節(jié)孢子等。包括大分生孢子、小分生孢子。二、真菌的繁殖與培養(yǎng)1．真菌的繁殖方式真菌依靠菌絲和孢子繁殖，無性繁殖是主要繁殖方式。主要有 ① 芽生 酵母菌和類酵母菌以此形式繁殖；② 裂殖 二分裂法進(jìn)行繁殖，不多見，少數(shù)兩相性真菌在體內(nèi)以此方式繁殖。④ 隔殖 在分生孢子梗某一段形成隔膜，隨之原生質(zhì)濃縮形成新孢子。2．真菌的培養(yǎng)營養(yǎng)要求不高，病原性真菌常用沙保培養(yǎng)基，主要成分是蛋白胨、葡萄糖、氯化鈉和瓊脂等。因生長慢，培養(yǎng)時(shí)間長，1~4W才能形成菌落，故在分離真菌時(shí)常在培養(yǎng)基中加入一定量的放線菌酮和氯霉素，用于抑制污染真菌和細(xì)菌。沙保培養(yǎng)基上，一般真菌可形成以下三種類型菌落：① 酵母型菌落 菌落特征類似細(xì)菌，但較大而厚，不透明，圓形，光滑，濕潤呈蠟狀，柔軟致密，多為乳白色，是多數(shù)單細(xì)胞真菌的菌落形式。如白假絲酵母菌。菌落中央與邊緣呈現(xiàn)不同的顏色，這些常作為鑒別真菌的重要依據(jù)。三、變異性與抵抗力培養(yǎng)時(shí)間過長或傳代次數(shù)較多時(shí)，真菌的形態(tài)、菌落特征、孢子數(shù)目及色素、甚至毒力都可能發(fā)生變異。思考題1. 名詞解釋：fungus(真菌) 真菌的二相性 菌絲 孢子2．簡答題：（1）簡述培養(yǎng)真菌常用的培養(yǎng)基及培養(yǎng)后的菌落特征。 （董曉慧）第三章 感 染感染是微生物在宿主體內(nèi)生長繁殖、釋放毒性物質(zhì)與宿主相互作用，引起不同程度的病理過程。來自宿主體外的微生物，通過一定方式從一個個體傳播到另一個體，引起的感染稱傳染。微生物致病力的強(qiáng)弱程度，稱為微生物的毒力。即在一定時(shí)間內(nèi)，通過一定接種途徑，能使一定體重或年令的某種動物半數(shù)死亡或感染需要的最小微生物數(shù)或毒素量。熟悉 細(xì)菌感染的發(fā)生與發(fā)展，傳染源，傳播方式。而病原菌的致病性與其毒力，侵人數(shù)量及侵入機(jī)體的部位等因素有密切關(guān)系。表現(xiàn)在兩個方面：侵襲力 病原菌突破宿主機(jī)體的免疫防御體系，在體內(nèi)定居、生長繁殖和擴(kuò)散的能力，稱為侵襲力。毒素 損傷宿主機(jī)體組織細(xì)胞、器官，并引起生理功能紊亂的大分子成分。（一）侵襲力1．粘附與定植 粘附 細(xì)菌表面具有粘附功能的特殊結(jié)構(gòu)及相關(guān)物質(zhì)，與致病性關(guān)系密切。不同種類的微生物在不同感染條件下，黏附方式和部位可不同。生物膜 以微菌落為基本結(jié)構(gòu)單位的有序性“社區(qū)”結(jié)構(gòu)，可由不同種屬的細(xì)菌共同組成，細(xì)菌的微菌落和生物膜的功能：① 抵抗不利環(huán)境，營造合適的微生境。菌細(xì)胞之間可自動感應(yīng)周圍環(huán)境變化，調(diào)整菌群密度、代謝及生長速率等。更易于抵抗免疫細(xì)胞、免疫分子及藥物的攻擊，克服液態(tài)流的沖擊而持續(xù)生存。④ 與許多慢性難治性細(xì)菌感染及