微生物實(shí)驗(yàn)室sop-在線瀏覽
2025-05-22 23:24本頁(yè)面
【正文】 部門(mén)主管 質(zhì)量負(fù)責(zé)人姓名 ****** ****** ****** 日期 **年**月**日 Ⅳ 革蘭染色的標(biāo)準(zhǔn)操作程序?qū)嶒?yàn)室名稱 項(xiàng)目 編號(hào)制定日期******革蘭染色********年**月**日【目的】確保染色結(jié)果清晰可靠?！驹噭緼液：結(jié)晶紫 2g 95%乙醇 20mlΒ液：草酸銨 蒸餾水 80ml使用前24小時(shí)將A液Β液混合后，過(guò)慮后裝入試劑瓶?jī)?nèi)備用。，清水沖去染液。%乙醇脫色液，不時(shí)搖動(dòng)約1030分鐘，至紫色已脫落為至，水沖洗。，油鏡鏡檢?！痉椒ā浚ㄒ唬?堿性復(fù)紅染色法【試劑】萋納石炭酸復(fù)紅溶液堿性復(fù)紅乙醇飽和溶液 10ml5%石炭酸溶液 90ml脫色劑濃鹽酸 3ml95%乙醇 97ml復(fù)染液（呂弗勒美藍(lán)液）美藍(lán)乙醇飽和溶液 30ml10%氫氧化鉀 蒸餾水 100ml【染色步驟】 涂片經(jīng)自然干燥或火焰固定后，加石炭酸復(fù)紅溶液，徐徐加熱至有蒸汽出現(xiàn)，切不可沸騰。 加脫色劑，不時(shí)搖動(dòng)坡片至無(wú)紅色脫落為至，水洗。 干后鏡檢。注：奴卡菌、放線菌標(biāo)本染色時(shí)，脫色劑改用2%硫酸水溶液。 3%鹽酸酒精?！痉椒ā客科潭ê蠹拥?液3090分鐘。用第3液脫色12分鐘，水洗。【結(jié)果】抗酸菌在暗背景中呈現(xiàn)金黃色熒光?！驹揝OP變動(dòng)程序】本標(biāo)準(zhǔn)操作程序的改動(dòng)，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：專業(yè)主管、科主任。%碘酊涂于欲作靜脈穿刺處，讓其干后再用70%酒精擦拭。，立即注入血液培養(yǎng)瓶，馬上充分混勻后，再送入檢驗(yàn)?！驹揝OP變動(dòng)程序】本標(biāo)準(zhǔn)操作程序的改動(dòng)，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：專業(yè)主管、科主任?！静僮鞒绦颉浚ㄒ唬?標(biāo)本采集嚴(yán)格無(wú)菌技術(shù)取血液10ml（兒童血液15ml）、 ml注入血培養(yǎng)瓶后立即送實(shí)驗(yàn)室，注入?yún)捬跗繒r(shí)要注意勿將注射器內(nèi)的空氣注入瓶?jī)?nèi)，培養(yǎng)瓶在送試驗(yàn)室前，不可放冰箱暫存。，350C孵育后，在血平板或巧克力平板上盲傳一次。，在觀察的7天中，最少應(yīng)做2次盲目傳種。（三） 分離鑒定，直接涂片做革蘭染色，所見(jiàn)結(jié)果應(yīng)及時(shí)報(bào)告臨床醫(yī)師。，做標(biāo)準(zhǔn)化藥敏實(shí)驗(yàn)正式報(bào)告給臨床。，應(yīng)立即完成鑒定就及標(biāo)準(zhǔn)化藥敏實(shí)驗(yàn)，并發(fā)出報(bào)告，報(bào)告形式為“ XXX細(xì)菌生長(zhǎng)”，藥敏實(shí)驗(yàn)報(bào)告形式為“XXX敏感”等。操作人員 部門(mén)主管 質(zhì)量負(fù)責(zé)人姓名 ****** ****** ******日期 ***年**月**日 保證質(zhì)量評(píng)價(jià)的準(zhǔn)確可靠?！静牧稀浚ㄒ唬?培養(yǎng)基MuellerHinton瓊脂平板，只適合腸桿菌科、銅綠假單胞菌、不動(dòng)桿菌、葡萄球菌、腸球菌、霍亂弧菌；HTM瓊脂，只適合嗜血桿菌；GC瓊脂＋1％特定的生長(zhǎng)因子，只適合淋病奈瑟菌；MuellerHinton瓊脂＋5％羊血，只適合鏈球菌。（三） 質(zhì)控菌株KΒ法質(zhì)量控制用菌株常規(guī)用：金黃色葡萄球菌ATCC2592大腸埃希菌ATCC2592銅綠假單胞菌ATCC27853?！痉椒ā浚禾暨x瓊脂平板上，形態(tài)相同的菌落移種于MH液體培養(yǎng)基中，置350C溫箱中孵育4小時(shí)，校正濁度，或用接中環(huán)挑取菌落，置浮于生理鹽水中振蕩混勻后與標(biāo)準(zhǔn)化濁管比濁，調(diào)整濁度與比濁管相同。：待平板上的水分被瓊脂完全吸收后（約15分鐘），用無(wú)菌鑷子取紙片貼在瓊脂平板表面，并用鑷尖輕壓一下，使其貼平。：把貼好藥敏紙片的平皿放進(jìn)350C孵平板，最好單獨(dú)擺放，不超過(guò)2個(gè)疊在一起，孵育1824小時(shí)后，讀取結(jié)果。二、稀釋試驗(yàn)【目的】（MIC）?！痉椒ā浚ㄒ唬?肉
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