細(xì)胞工程的理論基礎(chǔ)-在線瀏覽
2025-03-07 19:10本頁(yè)面
【正文】 養(yǎng)液的玻璃或塑料培養(yǎng)器皿中，待組織塊粘著后，沿底面平面移動(dòng)生長(zhǎng)的過(guò)程稱為組織培養(yǎng)。 C：器官培養(yǎng)： 是指采取某些措施使器官的原基、器官的一部分或整個(gè)器官在體外存活、生長(zhǎng)，并保持其原有結(jié)構(gòu)和功能的培養(yǎng)技術(shù)。 科學(xué)研究上： 在病毒學(xué)、免疫學(xué)、遺傳學(xué)、腫瘤學(xué)等方面。 2. 研究條件可以人為控制 可以根據(jù)需要，控制包括 pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。 4. 研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄 采用各種研究技術(shù)、記錄方法： 研究 : 倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流 式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原 位雜交、同位素標(biāo)記 記錄 : 攝影照片、縮時(shí)電影、電視 學(xué)科多 ： 細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等 對(duì)象廣 ： 各種動(dòng)物：低等動(dòng)物 高等動(dòng)物 人類(lèi) 一種動(dòng)物：不同年齡 不同組織 正常或異常（腫瘤 ） 可提供 大量 、 同一時(shí)期 、 重復(fù)性好 的、 生物學(xué)性狀相似 的實(shí)驗(yàn)對(duì)象 四、細(xì)胞培養(yǎng)的缺點(diǎn) 現(xiàn)人工模擬體內(nèi)環(huán)境的技術(shù)已經(jīng)很高 , 但 , 人工所模擬的條件 與 體內(nèi) 實(shí)際情況 仍 不完全相同 . 當(dāng)細(xì)胞被置于 體外培養(yǎng) 后 , 生活在缺乏動(dòng)態(tài)平衡的環(huán)境中 , 久了，必然 發(fā)生變化 . 因此，對(duì)于體外培養(yǎng)的細(xì)胞，應(yīng)該把他們視作一種 既能保持動(dòng)物體內(nèi)原細(xì)胞一定的性狀、結(jié)構(gòu)和功能 又具有某些改變的特定的細(xì)胞群體 ，而不能將之與體內(nèi)的細(xì)胞完全等同。 ?一切培養(yǎng)用品都要有固定的存放點(diǎn)，避免雜亂無(wú)章，其中尤其重要的是：培養(yǎng)用品與非培養(yǎng)用品應(yīng)嚴(yán)格分開(kāi)，已消毒品與未消毒品應(yīng)分別存放。 相對(duì) 孤立 、相對(duì)單一 缺乏體內(nèi)的 系統(tǒng)作用、失去神經(jīng)體液的調(diào)節(jié) 和細(xì)胞相互間的 影響 失去原有組織結(jié)構(gòu)和細(xì)胞形態(tài) 分化減弱或不顯 細(xì)胞趨向 單一化 ； 要正確認(rèn)識(shí) 體外培養(yǎng)細(xì)胞 是一種特定條件下生長(zhǎng)的細(xì)胞群體。 二、培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)分類(lèi) 體外細(xì)胞培養(yǎng)物的生長(zhǎng)類(lèi)型 按生長(zhǎng)方式 :2型 粘附型 細(xì)胞 :附著在某一固相支持物表面才能生長(zhǎng)的細(xì)胞。 絕大多數(shù) 有機(jī)體細(xì)胞 屬粘附型 細(xì)胞，只有少數(shù)細(xì)胞類(lèi)型如某些腫瘤細(xì)胞和白細(xì)胞可在懸浮狀態(tài)下生長(zhǎng)。 培養(yǎng)時(shí) ：這些細(xì)胞被放到體外環(huán)境中以后 ,同樣需要粘附于某一固相表面才能生存和生長(zhǎng)，因而 屬于粘附型細(xì)胞 。包括原代培養(yǎng)期、傳代培養(yǎng)期及衰退期。 特點(diǎn) ： 細(xì)胞呈活躍移動(dòng)，可見(jiàn)細(xì)胞分裂，但不旺盛。 傳代期 特點(diǎn) ：在全生命期中此期的持續(xù)時(shí)間最長(zhǎng)，細(xì)胞增殖旺 盛，并能維持二倍體核型。當(dāng)細(xì)胞增殖達(dá)到一定密度后，則需要分離出一部分細(xì)胞和更新?tīng)I(yíng)養(yǎng)液，否則將影響細(xì)胞的繼續(xù)生存，這一過(guò)程叫傳代。 衰退期 特點(diǎn) ：此期細(xì)胞仍然生存，但增殖很慢或不增殖， 最后衰退凋亡。 （三）單個(gè)細(xì)胞的生長(zhǎng)過(guò)程 五、體外培養(yǎng)細(xì)胞的遺傳學(xué)特征 （一）核型變化 （二）永生化和惡變 （三）細(xì)胞性別 六、體外培養(yǎng)細(xì)胞的生存環(huán)境 （一）無(wú)污染環(huán)境 （二）溫度 （三）氣體環(huán)境和氫離子濃度 七、體外培養(yǎng)細(xì)胞生存所需基本物質(zhì) （一）糖 （二）氨基酸 （三）維生素 （四）促生長(zhǎng)因子 （五）其它物質(zhì) 第三節(jié) 建立細(xì)胞系或細(xì)胞株 一、體外培養(yǎng)細(xì)胞的種類(lèi)和命名 （一）初代培養(yǎng) 初代培養(yǎng)又稱原代培養(yǎng)，即直接從體內(nèi)取出的細(xì)胞、 組織和器官進(jìn)行的第一次的培養(yǎng)物。 （二）細(xì)胞系 初代培養(yǎng)物開(kāi)始第一次傳代培養(yǎng)后的細(xì)胞，即稱之為細(xì)胞系。 (四 )二倍體細(xì)胞 培養(yǎng)細(xì)胞染色體數(shù)目具有與原供體二倍細(xì)胞染色體數(shù) 相同或基本相同 (2n細(xì)胞占 75＞或 80％以上 )的細(xì)胞群， 稱二倍體細(xì)胞培養(yǎng)。 (五 )腫瘤細(xì)胞系或株 是現(xiàn)有細(xì)胞系中最多的一類(lèi)，我國(guó)已建立細(xì)胞系主要為這類(lèi)細(xì)胞。 對(duì)已建成的各種細(xì)胞系或細(xì)胞株習(xí)慣上都給以名稱；細(xì)胞的命名無(wú)嚴(yán)格統(tǒng)一規(guī)定，大多采用有一定意義縮寫(xiě)字或代號(hào)表示。 （六）細(xì)胞系或細(xì)胞株的命名 二、建立細(xì)胞系（或株）的要求 （一）組織來(lái)源 （二）細(xì)胞生物學(xué)檢測(cè) （三）培養(yǎng)條件和方法 三、已建立細(xì)胞系或株的簽定、管理和使用 培 養(yǎng) 簡(jiǎn) 歷： 組織來(lái)源日期、物種、組織起源、性別、年齡、 供體正?；虍惓＝】禒顟B(tài)、細(xì)胞已傳代數(shù)等。 細(xì) 胞 活 力： 融解前后細(xì)胞接種存活率和生長(zhǎng)特性。 細(xì) 胞 形 態(tài)： 類(lèi)型，如為上皮或成纖維細(xì)胞等。 無(wú)污染測(cè)驗(yàn)： 包括細(xì)菌、真菌、支原體、原蟲(chóng)和病毒等。 免 疫 檢 測(cè)： 一兩種血清學(xué)檢測(cè)。 C1z)wamp。s!pYmUjRf OcL9H6E3B+y(u%roWlTiQeNbJ8 G5D1A x*t$qYnVkSgP dMaI7 F3C0z)v amp。spX mUiRfNcK9H5 E2B+x(u$rZoWkThQeMbJ7 G4D1z w*t!qYnVj
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