【正文】 重的毒氣泄漏事故 ,給當(dāng)?shù)鼐用駧砭薮? 的災(zāi)難。 ?德法荷比二惡英事件 1999年 ， 比利時 、 荷蘭 、 法國 、 德國相繼發(fā)生因二惡英污染導(dǎo)致畜禽類產(chǎn)品及乳制品含高濃度二惡英的事件 。 ?英國瘋牛病 瘋牛病在人類中的表現(xiàn)為新型克雅氏癥 ， 患者腦部會出現(xiàn)海綿狀空洞 ， 導(dǎo)致記憶喪失 ， 身體功能失調(diào) ， 最終神經(jīng)錯亂甚至死亡 。2022年這一預(yù)計數(shù)字降為 5萬人 。 ? 毒理學(xué)主要是借助于動物模型模擬引起人體中毒的各種條件 ， 觀察實(shí)驗(yàn)動物的毒性反應(yīng) ， 再外推到人 。 ? 毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)可采用整體動物、游離的動物臟器、組織、細(xì)胞進(jìn)行。毒理學(xué)還利用限定人體試驗(yàn)和流行病學(xué)調(diào)查直接研究外源化學(xué)物對人體和人群健康的影響。 可嚴(yán)格控制接觸條件 ， 測定多種類型的毒作用 。 在特殊需要情況下 ， 也采用魚類或其他水生生物 、 鳥類 、 昆蟲等 。 ? 哺乳動物體內(nèi)試驗(yàn)是毒理學(xué)的基本研究方法 ， 其結(jié)果原則上可外推到人；但體內(nèi)試驗(yàn)影響因素較多 ， 難以進(jìn)行代謝和機(jī)制研究 。體外試驗(yàn)系統(tǒng)缺乏整體毒物動力學(xué)過程，并且難以研究外源化學(xué)物的慢性毒作用。 (2)細(xì)胞：利用從動物或人的臟器新分離的細(xì)胞 (原代細(xì)胞 ，primary cell)或經(jīng)傳代培養(yǎng)的細(xì)胞如細(xì)胞株 (cell strain)及細(xì)胞系 (cell line)。 ? 體內(nèi)試驗(yàn)和體外試驗(yàn)各有其優(yōu)點(diǎn)和局限性 ， 應(yīng)主要根據(jù)實(shí)驗(yàn)研究的目的要求 ， 采用最適當(dāng)?shù)姆椒?， 并且互相驗(yàn)證 。有時可設(shè)計一些不損害人體健康的受控的實(shí)驗(yàn)，但僅限于低濃度、短時間的接觸，并且毒作用應(yīng)有可逆性。利用流行病學(xué)方法不僅可以研究已知環(huán)境因素 (外源化學(xué)物 )對人群健康的影響 (從因到果 )，而且還可對已知疾病的環(huán)境病因進(jìn)行探索 (從果到因 )。 毒理學(xué)研究方法的優(yōu)缺點(diǎn) 研究方法 流行病學(xué)研究 受控的臨床研究 毒理學(xué)體內(nèi)試驗(yàn) 毒理學(xué)體外試驗(yàn) 優(yōu)點(diǎn) 真實(shí)的暴露條件 在各化學(xué)物之間發(fā)生相互作用 測定在人群的作用 表示全部的人敏感性 規(guī)定的限定暴露條件 在人群中測定反應(yīng) 對某組人群 (如哮喘 )的研究是有力的 能測定效應(yīng)的強(qiáng)度 易于控制暴露條件 能測定多種效應(yīng) 能評價宿主持征的作用(如：性別 、 年齡 、 遺傳特征等和其他調(diào)控因素飲食等 ) 能評價機(jī)制 影響因素少 ， 易于控制 可進(jìn)行某些深入的研究(如：機(jī)制 ， 代謝 ) 人力物力花費(fèi)較少 缺點(diǎn) 耗資 、 耗時多 (多為回顧性 )， 無健康保護(hù) 難以確定暴露 ， 有混雜暴露問題 可檢測的危險性增加必需達(dá)到 2倍以上 測定指標(biāo)較粗 (發(fā)病率，死亡率 ) 耗資多 較低濃度和較短時間的暴露 限于較少量的人群 (一般＜ 50) 限于暫時 、 微小 、 可逆的效應(yīng) 一般不適于研究最敏感的人群 動物暴露與人暴露相關(guān)的不確定性 受控的飼養(yǎng)條件與人的實(shí)際情況不一致 暴露的濃度和時間的模式顯著地不同于人群的暴露 不能全面反映毒作用 ，不能作為毒性評價和危險性評價的最后依據(jù) 難以觀察慢性毒作用 （四）安全毒理學(xué)評價試驗(yàn)的四個階段與試驗(yàn)原則 1. 試驗(yàn)的四個階段 ? 第一階段：急性毒性試驗(yàn)，包括經(jīng)口急性毒性（ LD50）和聯(lián)合急性毒性。 ? 第三階段：亞慢性毒性試驗(yàn)（ 90天喂養(yǎng)試驗(yàn)）、繁殖試驗(yàn)和代謝試驗(yàn)。 ? 試驗(yàn)內(nèi)容：口急性毒性（ LD50）試驗(yàn)、聯(lián)合急性毒性試驗(yàn)。 （ 2）傳統(tǒng)致畸試驗(yàn) ? 了解受試物對胎仔是否具有致畸作用。 試驗(yàn)內(nèi)容： （ 1）細(xì)菌致突變試驗(yàn)：鼠傷寒沙門氏菌 /哺乳動物微粒體酶試驗(yàn)（ Ames試驗(yàn)）為首選項(xiàng)目，必要時可另選和加選其他試驗(yàn)。 第三階段：亞慢性毒性試驗(yàn)（ 90天喂養(yǎng)試驗(yàn)）、繁殖試驗(yàn)和代謝試驗(yàn)。 ? 試驗(yàn)內(nèi)容： ? 90d喂養(yǎng)試驗(yàn) ? 繁殖試驗(yàn)： ? 代謝試驗(yàn)：了解受試物在體內(nèi)的吸收、分布和排泄速度以及蓄積性，尋找可能的靶器官；為選擇慢性毒性試驗(yàn)的合適動物種系提供依據(jù)；了解有無毒性代謝產(chǎn)物的形成。 （五）食品毒理學(xué)試驗(yàn)結(jié)果的判定 1. 急性毒性試驗(yàn) ? 如 LD50劑量小于人的可能攝入量的 10倍，則放棄該受試物用于食品，不再繼續(xù)其他毒理學(xué)試驗(yàn)。凡LD50在人的可能攝入量的 10倍左右時，應(yīng)進(jìn)行重復(fù)試驗(yàn)，或用另一種方法進(jìn)行驗(yàn)證。 鼠傷寒沙門氏菌 /哺乳動物微粒體酶試驗(yàn)（ Ames試驗(yàn)） 小鼠骨髓微核率測定 骨髓細(xì)胞染色體畸變分析 小鼠精子畸形分析 睪丸染色體畸變分析試驗(yàn) 選擇四項(xiàng)試驗(yàn) 結(jié)果判斷原則： ? 其中三項(xiàng)試驗(yàn)為陽性：則表示該受試物很可能具有遺傳毒性作用和致癌作用，一般應(yīng)放棄該受試物應(yīng)用于食品；毋需進(jìn)行其他項(xiàng)目的毒理學(xué)試驗(yàn)。 ? 其中一項(xiàng)試驗(yàn)為陽性，則再選擇 V79/HGPRT基因突變試驗(yàn)、顯性致死試驗(yàn)、果蠅伴性隱性致死試驗(yàn)，程序外 DNA修復(fù)合成（ UDS）試驗(yàn)中的兩項(xiàng)遺傳毒性試驗(yàn)。如四項(xiàng)試驗(yàn)均為陰性，則可進(jìn)入第三階段毒性試驗(yàn)。 4. 90d喂養(yǎng)試驗(yàn)、繁殖試驗(yàn)、傳統(tǒng)致畸試驗(yàn) ? 根據(jù)三項(xiàng)試驗(yàn)中所采用的最敏感指標(biāo)所得的最大無作用劑量進(jìn)行評價，最大無作用劑量小于或等于人的可能攝入量的 100倍者表示毒性較強(qiáng)，應(yīng)放棄該受試物用于食品。大于或等于 300倍者則不必進(jìn)行慢性毒性試驗(yàn)，可進(jìn)行安全性評價。最大無作用劑量大于 50倍而小于 100倍者，經(jīng)安全性評價后，決定該受試物可否用于食品。 ? 新資源食品、復(fù)合配方的飲料等在試驗(yàn)中，若試樣的最大加入量（一般不超過飼料的 5%）或液體試樣最大可能的濃縮物加入量仍不能達(dá)到最大無作用劑量為人的可能攝入量的規(guī)定倍數(shù)時，則可以綜合其他的毒性試驗(yàn)結(jié)果和實(shí)際食用或飲用量進(jìn)行安全性評價。 2. 人體資料 ? 由于存在著動物與人之間的種族差異，在將動物試驗(yàn)結(jié)果推論到人時，應(yīng)盡可能收集人群接觸受試物后反應(yīng)的資料，如職業(yè)性接觸和意外事故接觸等。在確保安全的條件下，可以考慮按照有關(guān)規(guī)定進(jìn)行必要的人體試食試驗(yàn)。安全系數(shù)通常為 100倍，但可根據(jù)受試物的理化性質(zhì)、毒性大小、代謝特點(diǎn)、接觸的人群范圍、食品中的使用量及使用范圍等因素，綜合考慮增大或減小安全系數(shù)。在試驗(yàn)得到陽性結(jié)果，而且結(jié)果的判定涉及到受試物能否應(yīng)用于食品時，需要考慮結(jié)果的重要性和劑量 反應(yīng)關(guān)系。在毒性試驗(yàn)中，原則上應(yīng)盡量使用與人具有相同代謝途徑和模式的動物種系來進(jìn)行試驗(yàn)。 6. 綜合評價 ? 在進(jìn)行最后評價時，必須在受試物可能對人體健康造成的危害以及其可能的有益作用之間進(jìn)行權(quán)衡。因此，隨著時間的推移，很可能結(jié)論也不同。 （一）功能學(xué)評價的基本要求 1. 對受試樣品的要求 ? 化學(xué)性質(zhì)（包括化學(xué)結(jié)構(gòu)、純度、穩(wěn)定性等）有關(guān)資料。 ? 提供受試樣品的安全性毒理學(xué)評價的資料以及衛(wèi)生學(xué)檢驗(yàn)報告，受試樣品必須是已經(jīng)過食品安全性毒理學(xué)評價確認(rèn)為安全的食品。 ? 應(yīng)提供功效成分或特征成分、營養(yǎng)成分的名稱及含量。 二、功能性評價 2. 對實(shí)驗(yàn)動物的要求 ? 根據(jù)各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)的具體要求，合理選擇實(shí)驗(yàn)動物。 ? 動物的性別、年齡依實(shí)驗(yàn)需要進(jìn)行選擇。 ? 動物應(yīng)符合國家對實(shí)驗(yàn)動物的有關(guān)規(guī)定。劑量選擇應(yīng)合理，盡可能找出最低有效劑量。 ? 給受試樣品的時間應(yīng)根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)而定，一般為 30天。 4. 對受試樣品處理