【正文】 sor)。輔阻遏蛋白與色氨酸相結(jié)合形成有活性的阻遏物，與操縱區(qū)結(jié)合并使之關(guān)閉轉(zhuǎn)錄 trp mRNA。 trp操縱子中對(duì)應(yīng)于色氨酸生物合成的還有另一個(gè)系統(tǒng)進(jìn)行細(xì)調(diào)控，指示已經(jīng)啟動(dòng)的轉(zhuǎn)錄是否繼續(xù)下去。 2．弱化子與前導(dǎo)肽 ? 在 trp mRNA 539。因?yàn)檗D(zhuǎn)錄終止發(fā)生在這一區(qū)域，并且這種終止是被調(diào)節(jié)的，這個(gè)區(qū)域就被稱為弱化子。該多肽有一個(gè)特征，其第 10位和 11位有相鄰的兩個(gè)色氨酸密碼子。 ? 當(dāng)培養(yǎng)基中色氨酸的濃度很低時(shí)，負(fù)載有色氨酸的tRNATrp也就少，這樣翻譯通過(guò)兩個(gè)相鄰色氨酸密碼子的速度就會(huì)很慢，當(dāng) 4區(qū)被轉(zhuǎn)錄完成時(shí)，核糖體才進(jìn)行到 1區(qū)（或停留在兩個(gè)相鄰的 trp密碼子處），這時(shí)的前導(dǎo)區(qū)結(jié)構(gòu)是 23配對(duì)，不形成 34配對(duì)的終止結(jié)構(gòu)，所以轉(zhuǎn)錄可繼續(xù)進(jìn)行，直到將 trp操縱子中的結(jié)構(gòu)基因全部轉(zhuǎn)錄。 3． trp操縱子弱化機(jī)制的實(shí)驗(yàn)依據(jù) ? trpS5是溫度敏感型突變株，它所編碼的TrptRNAtrp合成酶只在 30℃ 時(shí)有活性， 42℃時(shí)無(wú)酶活性。 42℃ 時(shí)，突變體中 Trp操縱子的表達(dá)不受色氨酸濃度的調(diào)控。 TrpΔED53中 L不缺失（弱化子存在），trpΔLD102中 L缺失（弱化子不存在），缺失前導(dǎo)區(qū)后的表達(dá)比有前導(dǎo)區(qū)的表達(dá)要高得多，充分說(shuō)明 trp操縱子的表達(dá)調(diào)控除阻遏作用外，還受到前導(dǎo)區(qū)的影響，失去了這個(gè)因素就失去了一個(gè)調(diào)控機(jī)制。 ? 細(xì)菌中為什么要有弱化子系統(tǒng)呢？ 一種可能是阻遏物從有活性向無(wú)活性的轉(zhuǎn)變速度極低，需要有一個(gè)能更快地做出瓜的系統(tǒng)，以保持培養(yǎng)基中適當(dāng)?shù)纳彼崴健Ｍ庠瓷彼釢舛群艿偷男盘?hào)雖然足以引起 trp操縱子的去阻遏作用，但是這個(gè)信號(hào)還不足以很快引發(fā)內(nèi)源色氨酸的合成。 ? 那么為什么還要有阻遏體系呢？目前認(rèn)為阻遏物的作用是當(dāng)有大量外源色氨酸存在時(shí)，阻止非必需的先導(dǎo) mRNA的合成，它使這個(gè)合成系統(tǒng)更加經(jīng)濟(jì) 三、 其他操縱子的調(diào)控機(jī)制 1． 半乳糖操縱子 ? 大腸桿菌半乳糖操縱子 (galactose operon)包括 3個(gè)結(jié)構(gòu)基因： 異構(gòu)酶 (UDPgalactose4epimerase,galE)， 半乳糖 磷酸尿嘧啶核苷轉(zhuǎn)移酶 (galactose transferase, galT)， 半乳糖激酶 (galactose kinase, galk)。GalR與 galE、 T、 K及操縱區(qū) O等離得很遠(yuǎn)，而 galR產(chǎn)物對(duì) galO的作用與 lacIlacO的作用相同。 ? 因?yàn)榘肴樘堑睦眯时绕咸烟堑?，人們猜想葡萄糖存在時(shí)半乳糖操縱子不被誘導(dǎo)，但實(shí)際上有葡萄糖存在時(shí)， gal操縱子仍可被誘導(dǎo)。 ? 分析 gal操縱子 PO區(qū)的 DNA序列發(fā)現(xiàn)，該操縱子確實(shí)存在兩個(gè)相距僅 5bp的啟動(dòng)子，可以分別起始 mRNA的合成。 ? 從 S1起始的轉(zhuǎn)錄只有在培養(yǎng)基中無(wú)葡萄糖時(shí)，才能順利進(jìn)行， RNA聚合酶與 S1的結(jié)合需要半乳糖、 CAP和較高濃度的 cAMP。當(dāng)有 cAMPCAP時(shí)，轉(zhuǎn)錄從 S1開(kāi)始，當(dāng)無(wú) cAMPCAP時(shí)，轉(zhuǎn)錄從 S2開(kāi)始。在沒(méi)有外源半乳糖的情況下， UDPgal是通過(guò)半乳糖差向異構(gòu)酶的作用由UDP葡萄糖合成的，該酶是 galE基因的產(chǎn)物。現(xiàn)在設(shè)想只有 S1一個(gè)啟動(dòng)子，那么由于這個(gè)啟動(dòng)子的活性依賴于 cAMPCRP，當(dāng)培養(yǎng)基中有葡萄糖存在時(shí)就有能合成異構(gòu)酶。無(wú)論從必要性或經(jīng)濟(jì)性考慮，都需要一個(gè)不依賴于cAMPCAP的啟動(dòng)子（ S1）對(duì)高水平合成進(jìn)行調(diào)節(jié)。在大腸桿菌中阿拉伯糖的降解需要 3個(gè)基因： araB、 araA和 araD，分別編碼 3個(gè)酶：araB基因編碼核酮糖激酶 (ribulokinase)， araA編碼L阿拉伯糖異構(gòu)酶 (Larabinose isomerase)， araD編碼 L核酮糖 5磷酸 4差向異構(gòu)酶 (Lribulose5phosphate4epimerase)。AraBAD和 araC基因的轉(zhuǎn)錄是分別在兩條鏈上以相反的方向進(jìn)行的。 ? AraC蛋白作為 PBAD活性正、負(fù)調(diào)節(jié)因子的雙重功能是通過(guò)該蛋白的兩種異構(gòu)體來(lái)實(shí)現(xiàn)的。在沒(méi)有阿拉伯糖時(shí)， Pr形式占優(yōu)勢(shì)；一旦有阿拉伯糖存在，它就能夠與 AraC蛋白結(jié)合，使平衡趨向于 Pi形式。 ? 因?yàn)榕囵B(yǎng)基中含有葡萄糖，所以 cAMPCAP沒(méi)有與操縱區(qū)位點(diǎn)相結(jié)合， AraC蛋白處于 Pr形式并與 A位點(diǎn)結(jié)合， RNA聚合酶很少再與 Pc結(jié)合， araC基因雖然仍有轉(zhuǎn)錄，但受到抑制，只有少量 AraC蛋白形成，整個(gè)系統(tǒng)幾乎處于靜止?fàn)顟B(tài)。無(wú)葡萄糖，阿拉伯糖時(shí)，大量 araC基因產(chǎn)物以 Pi形式存在，并分別與操縱區(qū) B、A位點(diǎn)相結(jié)合，在 cAMPCAP的共同作用下， araC和 araBAD基因大量表達(dá)，操縱子充分激活。由一個(gè)多重調(diào)節(jié)的操縱子控制，有兩個(gè)啟動(dòng)子，兩個(gè)操縱區(qū)及兩個(gè)正調(diào)節(jié)蛋白。 4種酶分別由 hutG、 hutH、 hutI及 hutU基因編碼，阻遏物則由hutC基因編碼。這兩個(gè)轉(zhuǎn)錄單位各自都有一個(gè)啟動(dòng)子和一個(gè)操縱區(qū)，其轉(zhuǎn)錄過(guò)程都是從左向右進(jìn)行的， hutC阻遏物能與每個(gè)操縱區(qū)相結(jié)合。 Hut操縱子的每一個(gè)啟動(dòng)子上都有 cAMPCAP結(jié)合位點(diǎn)，當(dāng)碳供應(yīng)匱乏時(shí)，能合成 cAMP，出現(xiàn) cAMPCAP復(fù)合物，并與操縱區(qū)上的相應(yīng)位點(diǎn)結(jié)合，誘發(fā)基因轉(zhuǎn)錄。 4. 多啟動(dòng)子調(diào)控的操縱子 I． rRNA操縱子 大腸桿菌 rRNA操縱子（ rrnE）上有兩個(gè)啟動(dòng)子， P1和P2。當(dāng)營(yíng)養(yǎng)匱乏時(shí)， P1的作用被抑制，但P2仍有功能。 RpsA有 4個(gè)啟動(dòng)子， P P2是強(qiáng)啟動(dòng)子，平時(shí)主要依靠它們來(lái)啟動(dòng)基因的表達(dá)，合成 SI蛋白。 III. Dna Q蛋白操縱子 Dna Q蛋白是 DNA聚合酶全酶的亞基之一，其主要功能是校正 DNA復(fù)制中可能出現(xiàn)的錯(cuò)誤。 四、 原核生物種的轉(zhuǎn)錄后調(diào)控 1．稀有密碼子對(duì)翻譯的影響 ? 已知 dnaG和 rpoD（編碼 RNA聚合酶亞基）及 rpsU（ 30S核糖體上的 S21б蛋白）屬于大腸桿菌基因組上的同一個(gè)操縱子，而這 3個(gè)基因產(chǎn)物在數(shù)量上卻大不相同，每個(gè)細(xì)胞內(nèi)僅有 dnaG產(chǎn)物 50拷貝，而rpoD為 2800拷貝， rpsU則高達(dá) 40 000拷貝之多。 ? 研究 dnaG序列發(fā)現(xiàn)其中含有不少稀有密碼子，也就是說(shuō)這些密碼子在其他基因中利用頻率很低，而在 dnaG中卻很高。高頻率使用這些密碼子的基因翻譯過(guò)程極容易受阻，影響了蛋白質(zhì)合成的總量。 ? Trp操縱子由 5個(gè)基因（ trpE、 D、 C、 B、 A）組成，在正常情況下，操縱子中 5個(gè)基因產(chǎn)物是等量的，但 trpE突變后，其鄰近的 trpD產(chǎn)量比下游的 trpBA產(chǎn)量要低得多。 ? 研究 trpE和 trpD以及 trpB和 trpA兩對(duì)基因中核苷酸序列與翻譯耦聯(lián)的關(guān)系，發(fā)現(xiàn) trpE基因的終止密碼子和 trpD基因的起始密碼子共用一個(gè)核苷酸。 3. RNA高級(jí)結(jié)構(gòu)對(duì)翻譯的影響 ? 以 RNA噬菌體 f2的 RNA作為模板，在大腸桿菌無(wú)細(xì)胞系統(tǒng)中進(jìn)行蛋白質(zhì)合成時(shí)，大部分合成外殼蛋白， RNA聚合酶只占外殼蛋白的 1/3。 ? 研究發(fā)現(xiàn) f2外殼蛋白基因的琥珀突變也影響了 RNA聚合酶合成的起始?，F(xiàn)在一般認(rèn)為，聚合酶的翻譯起始區(qū)被 RNA的高級(jí)結(jié)構(gòu)所掩蓋，外殼蛋白的起始翻譯破壞了 RNA的立體構(gòu)象，使核糖體有可能與翻譯起始區(qū)結(jié)合，導(dǎo)致聚合酶的起譯。 4. 魔斑核苷酸水平對(duì)翻譯的影響 ? 科學(xué)上，把培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)缺乏，蛋白質(zhì)合成停止后， RNA合成也趨于停止這種現(xiàn)象稱為嚴(yán)緊控制（ rel+）；反之則稱為松散控制（ rel）。 GTP+ATP→pppGpp+AMP→ppGpp ppGpp的主要作用可能是影響 RNA聚合酶與啟動(dòng)子結(jié)合的專(zhuān)一性，從而成為細(xì)胞內(nèi)嚴(yán)緊控制的關(guān)鍵。 我勸一個(gè)草率結(jié)婚的朋友離婚。那么，現(xiàn)在草率離婚是一錯(cuò)再錯(cuò)。 同樣的故事正在互聯(lián)網(wǎng)搜索巨頭谷歌身上發(fā)生，但是谷歌選擇了草率“離婚”。飲鴆止渴的策略一時(shí)取得了成果。T和 Sprint Nextel三大運(yùn)營(yíng)商經(jīng)銷(xiāo)后，谷歌 Android手機(jī)在美國(guó)市場(chǎng)上的銷(xiāo)售量已經(jīng)超過(guò) iPhone。 表面繁華的背后，是 Android生態(tài)系統(tǒng)的一團(tuán)糟，谷歌正在為自己的粗放型開(kāi)放策略買(mǎi)單?！按蠖?Android手機(jī)程序都是垃圾，亂七八糟的”，一位手機(jī)發(fā)燒友迅速投奔了 iphone的陣營(yíng)：“同樣的植物人大戰(zhàn)僵尸游戲，在谷歌手機(jī)和 iphone手機(jī)上的體驗(yàn)簡(jiǎn)直沒(méi)法比” 混亂，還是混亂。這一切的根源，我的判斷是開(kāi)放策略初期過(guò)于寬松，導(dǎo)致失去控制權(quán)。 一錯(cuò)再錯(cuò) 為此，谷歌開(kāi)始采取對(duì)策。這意味著，谷歌將放棄其初始開(kāi)放策略，開(kāi)始封閉管理。既然是過(guò)度開(kāi)放導(dǎo)致的錯(cuò)誤，那么收緊開(kāi)放尺度是很自然的邏輯，無(wú)懈可擊。打個(gè)比喻。這么判斷的原因很簡(jiǎn)單，谷歌把 Android開(kāi)放出去的那一天， Android已經(jīng)不屬于谷歌。 合作伙伴對(duì)谷歌封閉政策的反應(yīng)加強(qiáng)了我的判斷結(jié)論。創(chuàng)楊通信負(fù)責(zé)人給出的出售理由是，“因?yàn)椴辉敢飧十?dāng)炮灰而選擇放棄。這對(duì)于企業(yè)來(lái)說(shuō)，幾乎意味著不可避免的價(jià)格戰(zhàn)。于是大量退出幾乎是一種必然。如果說(shuō)谷歌為了自己競(jìng)爭(zhēng)的私利利用了開(kāi)放，贏得了名聲。 如果只顧自己收網(wǎng)，谷歌會(huì)被面臨鋪天蓋地的道德譴責(zé)。 木桶效應(yīng)就是指一個(gè)水桶無(wú)論有多高，它盛水的高度取決于其中最低的那塊木板。尤其是很多用戶在購(gòu)買(mǎi)手機(jī)的時(shí)候， 都會(huì)專(zhuān)注于某一個(gè)參數(shù)，比如要求處理器主頻要高達(dá) 1GHz，但一部手機(jī)的整機(jī)表現(xiàn)是由多個(gè)因素組成，所以在購(gòu)買(mǎi)手機(jī)的時(shí)候一定要從整體的角度上來(lái)看一部手 機(jī)的性 除了處理器主頻以外，其實(shí)還有很多影響整機(jī)表現(xiàn)的元素，比如運(yùn)行內(nèi)存 (RAM)、機(jī)身內(nèi)存 ( ROM)、操作系統(tǒng)、廠商對(duì)系統(tǒng)的優(yōu)化都會(huì)有所影 響。而如果忽略這幾項(xiàng)的話，可能買(mǎi)到一個(gè)主頻很高，但整機(jī)性能卻仍然不令人滿意的機(jī)型。綜上 所述，大家在選購(gòu)手機(jī)的時(shí)候一定要綜合考慮一款手機(jī)的硬件規(guī)格。更高分辨率能獲得更為逼真細(xì)膩的顯示效果，所以對(duì)于屏幕的分辨率絕大多數(shù)人都會(huì)偏向于分辨率更高的機(jī)型。其實(shí)這里說(shuō)的高分辨率“不好”更多是指采用非主流的高分辨率機(jī)型。 大名鼎鼎的 HTC Diamond就是一款頗具代表意義的機(jī)型， Di amond上市的手機(jī)市場(chǎng)還處于 QVGA時(shí)代、只有少數(shù)旗艦機(jī)皇采用 WVGA這樣級(jí)別的屏幕，由于 HTC Diamond卻采用了 VGA這一過(guò)渡型的分辨率，而也正是因?yàn)檫@一點(diǎn)， Di amond很多軟件都未有支持或無(wú)法完美運(yùn)行，可謂是一個(gè)不小的遺憾。錢(qián)存下來(lái)等養(yǎng)老，結(jié)果孩子長(zhǎng)大了，要出國(guó)留學(xué)，要?jiǎng)?chuàng)業(yè)做生意，要花錢(qián)娶老婆，自己的退休金都被拗走了。小孩子從小就告訴他，養(yǎng)你到高中，大學(xué)以后就要自立更生，要留學(xué)，創(chuàng)業(yè)，娶老婆，自己想辦法，自己要留多一點(diǎn)錢(qián)，不要為了小孩子而活我們都老得 太快卻 聰明得太遲，我的學(xué)長(zhǎng)去年喪妻。學(xué)長(zhǎng)說(shuō)他太太最希望他能送鮮花給他，但是他覺(jué)得太浪費(fèi)，總推說(shuō)等到下次再買(mǎi)，結(jié)果卻是在她死后，用鮮花布置她的靈堂。 ? 人生太短，聰明太晚 (3) ? 「等到我大學(xué)畢業(yè)以后，我就會(huì)如何如何」我們對(duì)自己說(shuō) ? 「等到我買(mǎi)房子以后！」 ? 「等我最小的孩子結(jié)婚之后！」 ? 「等我把這筆生意談成之后！」 ? 「等到我死了以后」 ? 人人都很愿意犧牲當(dāng)下，去換取未知的等待；犧牲今生今世的辛苦錢(qián)，去購(gòu)買(mǎi)后世的安逸 ? 在臺(tái)灣只要往有山的道路上走一走，就隨處都可看到「農(nóng)舍」變「精舍」，山坡地變靈塔，無(wú)非也是為了等到死后，能圖個(gè)保障，不必再受苦。明天我就開(kāi)始運(yùn)動(dòng)，明天我就會(huì)對(duì)他好一點(diǎn)，下星期我們就找時(shí)間出去走走；退休后， 我們就 要好好享受一下。身為一個(gè)醫(yī)生，我所見(jiàn)過(guò)的死人，比一般人要來(lái)得多。剎那間生命 的巨輪 傾覆離軌，突然闖進(jìn)一片黑暗之中。 ? 一個(gè)人永遠(yuǎn)也無(wú)法預(yù)料未來(lái)，所以不要延緩想過(guò)的生活，不要吝于表達(dá)心中的話， 因?yàn)樯辉谝凰查g。 ? 別讓自己徒留「為時(shí)已晚」的空余恨。 ? 人生太短，聰明太晚 (6) ? 人生短暫飄忽，包得有一首小詩(shī)這樣寫(xiě)： ? 高天與原地，悠悠人生路； ? 行行向何方，轉(zhuǎn)眼即長(zhǎng)暮。 ? 有許多事，在你還不懂得珍惜之前已成舊事；有許多人，在你還來(lái)不及用心之前 已成舊人。 ? 人生太短，聰明太晚 (7) ? 一句瑞典格言說(shuō)：「我們老得太快，卻聰明得太遲。 ? 人生并未售來(lái)回票，失去的便永遠(yuǎn)不再得到。 ? 生命中大部分的美好事物都是短暫易逝的， ? 享受它們、品嘗它們， ? 善待你周?chē)拿恳粋€(gè)人， ? 別把時(shí)間浪費(fèi)在等待所有難題的「完滿結(jié)局」上。 ? 勸大家一句話：把握當(dāng)下，莫等待。 學(xué)習(xí)可以成為一種生活方式，幫助你發(fā)揮最大的潛能。 學(xué)習(xí)新的技能可能讓人感到有一點(diǎn)恐懼，但每當(dāng)我們?cè)趥€(gè)人學(xué)習(xí)上停滯不前時(shí)，我們都需要去學(xué)習(xí)新的東西。 【 大學(xué)課件 】 出品 版權(quán)歸原作者所有 ! 參加一些培訓(xùn)，進(jìn)修，夜校－任何新