微生物生態(tài)學(xué)11基因工程菌的標(biāo)記與跟蹤-在線(xiàn)瀏覽
2025-03-02 23:44本頁(yè)面
【正文】 射光譜是 λmax=508509nm。 ? 1962年， Shimomura和 Johnson等人首先從水螅水母類(lèi)動(dòng)物 Aequorea Victoria中分離、純化出一種熒光物質(zhì)，稱(chēng)為綠色熒光蛋白 (Green Fluorescent Proteins， GFPs)?；蚬こ叹甑臉?biāo)記與跟蹤 GFP基因 綠色熒光蛋白的來(lái)源 ? 熒光現(xiàn)象在許多海洋無(wú)脊椎動(dòng)物中普遍存在著。許多刺胞亞門(mén)的動(dòng)物 （綠色熒光） 和幾乎所有櫛水母類(lèi)的動(dòng)物 （藍(lán)色熒光） 在受到刺激時(shí)都可以發(fā)出熒光。 ? 目前研究得較為深入的是來(lái)自多管水母科(Aequorea)和海紫羅蘭科 (Renilla)的熒光蛋白，即Aequorea GFP和 Renilla GFP (AGFP和 RGFP）。 ? 生色團(tuán)的形成首先是 Gly67的氨基對(duì) Ser65的羰基親核進(jìn)攻而環(huán)化成五元環(huán)，同時(shí)失去一分子水形成咪唑基。 GFP生色團(tuán)形成示意圖 (3和 4表示不同 pH條件下的兩種形式 ,4和 5是同分異構(gòu)體 )成生色團(tuán)。當(dāng)變性條件去除后，49%90%以上的蛋白質(zhì)能夠很快復(fù)性。 ? GFP基因的表達(dá)并沒(méi)有物種、細(xì)胞種類(lèi)、位置的限制，而且 GFP不論在真核細(xì)胞還是原核細(xì)胞中表達(dá)后，在藍(lán)光照射下都能產(chǎn)生強(qiáng)烈熒光。 （ 1） GFP的優(yōu)點(diǎn)： ? 檢測(cè)方便：因?yàn)?GFP熒光反應(yīng)不需要外加底物、
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