原核生物的轉(zhuǎn)錄及調(diào)控-在線瀏覽
2025-03-02 14:43本頁面
【正文】 原核生物轉(zhuǎn)錄的相關(guān)酶類 一、 RNA聚合酶 ? ； ? RNA pol全酶 由 5種亞基組成，即α2ββ’ωσ， 480kD； ? α2ββ’ ω構(gòu)成核心酶 ， 核心酶與 σ因子構(gòu)成全酶 。 不同原核生物具有 基本相同的核心酶 ，但 σ亞基有所差別 ，決定了原核生物基因的選擇性表達。 ? 肝素 ：與細菌 RNA pol β’亞基結(jié)合，阻礙其與 模板 DNA的結(jié)合 。 +1 10 +10 upstream start point downstream 一、轉(zhuǎn)錄的起始 ? 關(guān)鍵：全酶能以 很高的親和性 結(jié)合在 啟動子 promoter ； ? 啟動子 ： RNA聚合酶識別、結(jié)合并起始轉(zhuǎn)錄的一段 DNA序列。 RNA pol. loosely binding site Pribnow Box： TATAAT（ pribnow Box） 10 site。 RNA transcriptional startpoint （ I site） A/G 35 (R) 10 (B) +1 (I) RNA l Sextama Box與 Pribnow Box間距 17bp， 有利于 RNA pol啟動 l 35 Box or 10 Box mut. 間距 趨近 于 17 bp， up mutation 間距 遠離 于 17 bp， down mutation 17bp的 間距 比 17bp的 序列 對轉(zhuǎn)錄更為重要 35 Box and 10 Box mut. → 轉(zhuǎn)錄效率下降 100倍 → 轉(zhuǎn)錄效率下降 1000倍 上游元件： CAPcAMP binding site （ Activator region， AR） 當(dāng)： ARI + CAPcAMP ● AR I： CAPcAMP 的強結(jié)合位點（ 70 ~ 50） ● AR II： CAPcAMP 的弱結(jié)合位點（ 50 ~ 40） cooperative effect 提高 ARII 的結(jié)合效率 IR 70 ARI 40 ARII IR 50 RNA pol AR II + CAPcAMP 復(fù)合體： 促使 35 box附近 GC島區(qū)的雙螺旋結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性降低， 10 box的解鏈溫度降低，有利于轉(zhuǎn)錄啟動 ARI ARII GC Island 35 10 ● Null AR II → RNA pol. into 10 Box but transcription off ● ARII + CAPcAMP promotion RNA pol. into 35 Box into 10 Box starting transcription RNA pol RNA pol αCTD CAPcAMP ARI ARII ARI ARII Activation transcription Up element + CAPcAMP ＋ RNA Polymerase復(fù)合體 CAPcAMP 與 RNA Polymerase的 αCTD結(jié)合，激活轉(zhuǎn)錄 （二） 原核基因轉(zhuǎn)錄的起始 σ因子的作用： ? 降低 全酶與一般 DNA的 非專一性 結(jié)合力（ 20220倍 ）； ? 增強 全酶與啟動子 R site、 B site的 專一性 結(jié)合力 （ 100倍 ）； ? 導(dǎo)致 RNA鏈的延伸緩慢 Promoter與 σ factor 間的結(jié)合專效性 ● 決定了 strong promoter amp。 RNA pol全酶與 35 box結(jié)合 →封閉型啟動復(fù)合物 ； ? 酶向 10 box移動，并與之牢固結(jié)合，促使 10 box及起始位點處發(fā)生局部解鏈 →開放型啟動復(fù)合物 ； ? DNA解螺旋擴展到 10 box下游 17bp范圍。 ? 第一個被轉(zhuǎn)錄的堿基離 10 box 的保守 T約6~9nts。 三元復(fù)合物的形成和 σ因子的解離 ? RNA合成一開始，就形成 模板 RNA polRNA的
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