溫自家抗體的血清學(xué)檢測(cè)-在線瀏覽
2025-02-21 12:11本頁(yè)面
【正文】 w+ 4+ 4+ 對(duì)于極端的個(gè)例，包被了大量的 IgG抗體紅細(xì)胞在定型血清中會(huì)發(fā)生自發(fā)的凝集，使用試劑的稀釋液作為陰性對(duì)照，可以發(fā)現(xiàn)出現(xiàn)弱的自發(fā)凝集產(chǎn)生的陽(yáng)性反應(yīng)，從而干擾定型。同樣，反定型時(shí)血清中的溫自身抗體和反定型紅細(xì)胞在室溫鹽水介質(zhì)也不產(chǎn)生凝集反應(yīng)。只有陰性對(duì)照為陰性時(shí)結(jié)果才可靠 (在訂購(gòu)試劑時(shí)要含有陰性對(duì)照）。 DAT陰性紅細(xì)胞的制備 ?甘氨酸 EDTA法 ?二磷酸氯喹法 甘氨酸 EDTA法去除 IgG抗體（ 1） ? 試劑： ? 10% Na2EDTA ? M 甘氨酸 HCl緩沖液（ pH ): 溶于 100ml生理鹽水，用濃鹽酸調(diào)節(jié) pH到 ? M TrisNaCl: tris 和 NaCl溶于100ml蒸餾水。 ? 在試管中將紅細(xì)胞和 酸化 甘氨酸 EDTA液按照 10：20體積比充分混合，室溫孵育 2~3分鐘。 ? 用抗 IgG檢測(cè)洗滌后的紅細(xì)胞，確認(rèn) DAT陰性，表明包被在紅細(xì)胞上的 IgG抗體已經(jīng)去除。 ? DAT陽(yáng)性的紅細(xì)胞（包被 IgG） ? 對(duì)照細(xì)胞（已知部分血型） ? 抗 IgG血清 氯喹放散法（ 2） ? 方法： ? 混合。同時(shí)做對(duì)照。否則繼續(xù)處理 30分鐘后檢測(cè)。 ? 治療所用藥物 ? 有好幾種藥物可以誘導(dǎo)產(chǎn)生和 WAIHA一樣的血清學(xué)反應(yīng)。 ? 免疫史（輸血史、妊娠史） ? 輸血史對(duì)于判定患者血清中的是否存在同種抗體非常重要。 WAIHA的抗體篩選和鑒定 ? 無(wú)免疫史的 WAIHA檢測(cè)：直接進(jìn)行抗體鑒定，檢測(cè)抗體特異性，如果有特異性，選擇無(wú)對(duì)應(yīng)抗原的血液可以輸用。 ? 放散液和一些試劑紅細(xì)胞出現(xiàn)陰性反應(yīng)表明血清中存在特異性同種抗體。 WAIHA樣本何時(shí)進(jìn)行放散 ? 評(píng)估第一個(gè)樣本 ? 首次放散的目的是來(lái)確認(rèn)溫自身抗體引起的 WAIHA，從而排除藥物依賴性抗體的干擾。 ? 每個(gè)樣本： ? 不需要對(duì) WAIHA患者的每一份都進(jìn)行放散，因?yàn)檠鍖W(xué)反應(yīng)格局不會(huì)因?yàn)橥换颊卟煌瑯颖径p易發(fā)生改變。 ? 如果放散液中有同種抗體，則可能和抗體鑒定譜細(xì)胞產(chǎn)生陽(yáng)性反應(yīng)。 溫自身抗體的特異性 ? 大多數(shù)是多特異性抗體，且和 Rh系統(tǒng)抗原相關(guān)。 ? 類似特異性：如類似抗 c,抗 e特異性（ 指此抗體和具有該抗體對(duì)應(yīng)抗原的紅細(xì)胞反應(yīng)強(qiáng)度要明顯強(qiáng)于缺乏對(duì)應(yīng)抗原的紅細(xì)胞） ? 具有單特異性：如抗 e、抗 c、抗 D、抗 E、抗 C的特異性抗體。 ? 一般不需要對(duì)自身溫抗體進(jìn)行抗體特異性鑒定。且溫自身抗體鑒定無(wú)助于疾病的診斷、治療以及輸血，因此不需要常規(guī)進(jìn)行。 ZZAP處理紅細(xì)胞（ 2） ? 方法： ? 2ml 壓積細(xì)胞分裝 2管， 1ml/管。 ? 鹽水洗滌 3次（ 900~1000g)，除盡末次洗滌上清液。 ? 離心，上清液轉(zhuǎn)移至另一支含處理后紅細(xì)胞的試管中吸收。 影響吸收的循環(huán)次數(shù)的因素 ? 與血清中抗體的反應(yīng)強(qiáng)度有關(guān) ? 測(cè)定抗體的倍比稀釋度，以產(chǎn)生陽(yáng)性的最后一管來(lái)可以用于確立稀釋的循環(huán)次數(shù)。 確定吸收的循環(huán)次數(shù)（ 2） ?測(cè)定血清中抗體的反應(yīng)強(qiáng)度 ?吸收循環(huán)次數(shù)為反應(yīng)強(qiáng)度再加 1。 異體吸收 吸收用細(xì)胞血型 剩余抗體 R1R1, (CCee) c, E R2R2, (ccEE) e, C rr (ccdee) D, C, E 異體吸收后檢測(cè)（吸收是否完全） 吸收后血清 檢測(cè)用紅細(xì)胞 R1R1吸收 R2R2吸收 rr吸收 R1R1 0 R2R2 0 rr
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