紫外-可見光分光光度法(1)-在線瀏覽
2024-12-05 18:56本頁面
【正文】 對誤差與 T(或 A)的關(guān)系 實(shí)際工作中，應(yīng)控制 T在 10～ 70％ , A在 ～ (調(diào) c, b, ?) 9 顯色劑與顯色反應(yīng) 顯色反應(yīng)：在光度分析中將試樣中的待測組分轉(zhuǎn)變成有色化合物的反應(yīng)叫顯色反應(yīng)。 Fe3＋ ＋ SCN－ =FeSCN－ ； Mn2＋ － 5e＋ 4H2O= MnO4－ ＋ 8H＋ 在這兩類反應(yīng)中，用得較多的是 配位反應(yīng)。 11 有機(jī)顯色劑 CH3－ C－ C－ CH3 HO－ N N－ OH ＝ ＝ N N OH COOH SO3H OO型： N N N O H OH ON型 ： PAR N H N H N S N S型 ： 雙硫腙 測定很多重金屬離子，如：鉛、鋅、銅、銀、汞、鎘等。 ?選擇性好 。 ?反應(yīng)生成的有色化合物 組成恒定，穩(wěn)定 。 Fe3+, Cu2+ FeSSal（紫紅） Cu2+ pH= SSal 測 Fe3＋ :(控制 pH) 18 2. 物理法 — 選擇適當(dāng)?shù)臏y定波長 515 655 415 500 釷 偶氮砷 III 鈷 亞硝基紅鹽 A A 絡(luò)合物 絡(luò)合物 試劑 試劑 ?/nm ?/nm 19 1. 僅絡(luò)合物有吸收， 溶劑 作參比。 如 測汽水中的 Fe 3. 顯色劑或其他試劑也有吸收， 空白溶液 作參比 例 :鄰二氮菲光度法測 Li2CO3中的 Fe， 參比溶液為不含 Li2CO3樣品的所有試劑 。對于化學(xué)因素，前面巳經(jīng)講過，現(xiàn)在我們來看儀器測量不準(zhǔn)引入的誤差。 ? T%在 80～ 10%即 A=1～ 。 ? 當(dāng) T= A=，濃度的測量誤差最小。 ? 3．控制適當(dāng)?shù)奈舛确秶? ? 由測量誤差可知，當(dāng)吸光度在 ～ ，測量誤差最小，所以應(yīng)盡量控制吸光度在此范圍進(jìn)行測定。12MoO3+12NH4NO3+12H2O 磷鉬黃 (?小 ) 磷鉬 (V)藍(lán) (?大 ) Sn2+ 23 3. 蛋白質(zhì)測定 — 溴甲酚綠、考馬司亮藍(lán)等 4. 氨基酸測定 — 茚三酮 (紫色化合物 ) 5. 水質(zhì)檢測 : NH4+、 NO Mn2+、 Fe2+、SO4 Hg2+ 6. 藥物含量測定 — 比吸光系數(shù)定量；荷移光譜法測定 . 7. 紫外吸收 (UV): NO NO SO4SO3 CO3 SCN、酪氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、蛋白質(zhì)等。尤其在醫(yī)院的常規(guī)化驗(yàn)中， 95%的定量分析都用此法。 一般可檢測 104105 mol/l的微量組分，通過某些特殊方法 (如膠束增溶 )可檢測 106107 mol/l的組分。 ? 3)分析條件的選 ? 定量分析方法 ? 標(biāo)準(zhǔn)曲線法 ? 標(biāo)準(zhǔn)加入法 25 標(biāo)準(zhǔn)曲線法 ? 配制不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，由低濃度至高濃度依次測定其吸收光譜，作一定波長下濃度與吸光度的關(guān)系曲線，在一定范圍內(nèi)應(yīng)得到通過原點(diǎn)的直線，即標(biāo)準(zhǔn)曲線。 標(biāo)準(zhǔn)加入法 ? 樣品組成比較復(fù)雜，難于制備組成匹配的標(biāo)樣時(shí)用標(biāo)準(zhǔn)加入法。由加入待測試樣濃度由低至高依次測定上述溶液的吸收光譜，作一定波長下濃度與吸光度的關(guān)系曲線，得到一條直線。 26 多組分的測定 ?x?1, ?y?1, ?x?2, ?y?2由 x,y標(biāo)液 在 ?1, ?2處分別測得 . a) 在 ?1處測組分 x, 在 ?2處測組分 y. b) 在 ?1處測組分 x。 Vsp 滴定劑吸收 Vsp 被滴物吸收 Vsp 滴定劑與待測物均吸收 Vsp 產(chǎn)物吸收 29 絡(luò)合物組成的測定 1. 摩爾比法 : 固定 cM ,改變 cR 1:1 3:1 c(R)/c(M) A 3,0 30 2. 等摩爾連續(xù)變化法 : M R M R nn?MR (c c c ）?? 常數(shù)M:R=1:1 cM/c cM/c M:R=1:2 0 1 0 1 31 一元弱酸離解常數(shù)的測定 HL H＋ ＋ L HLHL L= [ H L ] + [ L ]KccAKK???? ? ? ??+ L++aaa(HL)[ H ] ( H L )=++ [ H ] + [ H ]Ka＝ [H+][L]/[HL] 高酸度下，幾乎全部以 HL存在，可測得 AHL＝ εHLc(HL). 代入整理： L HLAAK AAap = p H + l g 或 配制一系列 c相同 ,pH不同的溶液 ,測 A. HL、 L 顏色不同
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