生物進(jìn)化過程中微生物形成完善的代謝調(diào)節(jié)機(jī)制-在線瀏覽
2024-12-14 14:53本頁面
【正文】 善的代謝調(diào)節(jié)機(jī)制 不會有代謝產(chǎn)物的積累 解除或突破微生物的代謝調(diào)節(jié)控制 目的產(chǎn)物積累 微生物育種的目的 方法：突變、體內(nèi)重組 體外重組（基因工程） 工業(yè)微生物育種 微生物資源分布 土壤、水、空氣、動植物及其腐敗殘骸都是微生物的主要棲居和生長繁殖場所 分離微生物新種的步驟 采樣、增殖、純化和性能測定等步驟。 典型的微生物采樣和篩選方法 直接從自然界分離得到的菌株為野生型菌株。 研究的比較清楚 引起 DNA復(fù)制錯誤 嘧啶比嘌呤對紫外線敏感得多 胸腺嘧啶二聚體 嘧啶的紫外線光化產(chǎn)物 誘變過程中需要注意 光復(fù)活作用 微生物等生物的細(xì)胞內(nèi)存在光復(fù)活酶 光復(fù)活酶識別胸腺嘧啶二聚體，并與之結(jié)合形成復(fù)合物 打開二聚體，將 DNA復(fù)原。 暗修復(fù)體系有四種酶參與反應(yīng)。 合適誘變劑量的選擇 ? 出發(fā)菌株的選擇 一是考慮出發(fā)菌株是否具有特定生產(chǎn)性狀的能力或潛力，即菌株是否具有產(chǎn)生特定代謝產(chǎn)物的催化酶系的基因。 ? 制備菌懸液 待處理的菌懸液應(yīng)考慮微生物的生理狀態(tài)、懸液的均一性和環(huán)境條件。 ? 懸液的均一性可保證誘變劑與每個細(xì)胞機(jī)會均等并充分地接觸，避免出現(xiàn)不純的菌落，給后續(xù)的篩選工作造成困難。 產(chǎn)孢子或芽孢的微生物最好采用其孢子或芽孢 菌懸液的細(xì)胞濃度一般控制為： 真菌孢子或酵母細(xì)胞 106?107個 /ml，放線菌或細(xì)菌 108個 /ml。 ?誘變處理 在誘變處理前，一般應(yīng)預(yù)先做誘變劑用量對菌體死亡數(shù)量的致死曲線，選擇合適的處理劑量。致死率在 70%80% 誘變育種中還常常采取誘變劑復(fù)合處理，使它們產(chǎn)生協(xié)同效應(yīng)。 ? 平皿快速檢測法 平皿快速檢測法是利用菌體在特定固體培養(yǎng)基平板上的生理生化反應(yīng)，將肉眼觀察不到的產(chǎn)量性狀轉(zhuǎn)化成可見的 “ 形態(tài) ” 變化。 —— 定性或半定量用 ，大大提高篩選的效率 —— 初篩 微生物特異性平板檢測方法 飽浸含某種指示劑的固體培養(yǎng)基的濾紙片變色圈 指示劑直接摻入或噴灑固體培養(yǎng)基，菌落周圍形成變色圈。菌落利用此物質(zhì)形成透明圈。 ?特殊變異菌的篩選方法 營養(yǎng)缺陷型突變株 抗阻遏和抗反饋突變型 抗生素抗性突變株 條件抗性突變 營養(yǎng)缺陷型突變株 濃縮、進(jìn)一步檢出和鑒別營養(yǎng)缺陷型等步驟。 目的：淘汰大量野生型，使?fàn)I養(yǎng)缺陷型占的比例增加 ? 進(jìn)一步檢出所需缺陷型 逐個檢出法 影印培養(yǎng)法 一般從菌落大小也可以判斷
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