【正文】 皮苷與異香蘭素作用得新橙皮苷 ,新橙皮苷經(jīng)過(guò)氫化轉(zhuǎn)變?yōu)樾鲁绕ぼ斩洳闋柾?,其甜度為蔗糖的 950 倍 ,而且此兩種甜味劑回味均無(wú)苦味 ,可直接用于各種食品中 ,并具保健作用。 SatuS Pekkarinen 等人發(fā)現(xiàn)在亞油酸甲脂體系中 ,楊梅酮 (myricetin)與槲皮素 (Quercetin)的抗氧化效果優(yōu)于維生素 E。 天然色素 生物類黃酮多呈黃色 ， 同時(shí)又具有很寬的溶解性 [16]， 既具有水溶性的生物類黃酮 ,又有脂溶性的生物類黃酮 ,所以完全可以根據(jù)食品加工的需要來(lái)選擇合適的生物類黃酮作為著色劑。 保健食品 由于生物類黃酮所具有的保健功能 ,人們又開(kāi)發(fā)出多種保健食品。 超聲波輔助萃取的基本原理 超 聲波輔助 提取技術(shù) 超聲波是指頻率為 20千赫～ 50兆赫左右的電磁波 [17]，它是一種機(jī)械波，需要能量載體 —— 介質(zhì)來(lái)進(jìn)行傳播。也就是說(shuō)，超聲波并不能使樣品內(nèi)的分子產(chǎn)生極化，而是在溶劑和樣品之間產(chǎn)生聲波空化作用，導(dǎo)致溶液內(nèi)氣泡的形成、增長(zhǎng)和爆破壓縮，從而使固體樣品分散，陶然： 芹菜葉中黃酮類物質(zhì)提取工藝的研究 6 增大樣品與萃取溶劑之間的接觸面積，提高目標(biāo)物從固相轉(zhuǎn)移到液相的傳質(zhì)速率。 超聲波輔助提取的原理 超聲波萃取中的優(yōu)越性，是基于超聲波的特殊物理性質(zhì)。 （ 1）加速介質(zhì)質(zhì)點(diǎn)運(yùn)動(dòng)。質(zhì)點(diǎn)的加速度經(jīng)計(jì)算一般可達(dá)重力加速度的二千倍以上。 （ 2）空化作用。加速植物有效成份的浸出提取。 綜上所述， 一般所需提取的 物質(zhì)在超聲波場(chǎng)作用下不但作為介質(zhì)質(zhì)點(diǎn)獲得自身的巨大加速度和動(dòng)能，而且通過(guò)“空化效應(yīng)”獲得強(qiáng)大的外力沖擊，所以能高效率并充分分離出來(lái)。在 40℃－ 50℃水中 超聲波強(qiáng)化萃取，無(wú)水煮高溫，不破壞 物質(zhì)的某些具有熱不穩(wěn)定，易水解或氧化特性的 有效 成份。（ 2）常壓萃取，安全性好，操作簡(jiǎn)單易行，維護(hù)保養(yǎng)方便。超聲波強(qiáng)化萃取 20～ 40 分鐘即可獲最佳提取率，萃取時(shí)間僅為水煮、醇沉法的三分之一或更少。據(jù)統(tǒng)計(jì)，超聲波在 65～ 70℃時(shí) 工作效率非常高。C度內(nèi) 各種 植物的有效成份基本沒(méi)有受到破壞。而蒸煮法的蒸煮時(shí)間往往需要兩到三小時(shí)，是超聲波提取時(shí)間的 3倍以上時(shí)間。適用性廣，絕大多數(shù)的 植物 各類成份均可超聲萃取。因此，可供選擇的萃取溶劑種類多、目標(biāo)萃取 物范圍廣泛。由于超聲萃取無(wú)需加熱或加熱溫度低，萃取時(shí)間短，因此大大降低能耗。（ 8）萃取工藝成本低，綜合經(jīng)濟(jì)效益顯著。(2)提取物的有效成分含量高，有利于進(jìn)一步的精制。(4)有效成分的提取率高，原料利 用充分，提高經(jīng)濟(jì)效益。 黃酮類化和物用傳統(tǒng)的有機(jī)溶劑加熱浸提，時(shí)間較長(zhǎng)，能源消耗大。所以研究此種方法對(duì)尋求更加有效的黃安徽工程科技學(xué)院畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文） 7 酮類化和物提取法有較大的幫助。蒸餾水。 實(shí)驗(yàn)步驟 芹菜葉的預(yù)處理 芹菜葉 →粉碎→按 1∶ 20料液比加無(wú)水乙醚→ 40℃冷凝回流 2小時(shí)脫脂→過(guò)濾→濾渣 干燥后備用。準(zhǔn)確吸取 0、 12mL 于 50mL 容量瓶中 ,加 12mL 95%的乙醇 ,加含 5% NaNO2水溶液 2mL,搖勻靜置 6min,再加含 10% Al(NO3)3水溶液 2mL,搖勻靜置 6min,再加含 5% NaOH 水溶液 20mL,用 95%乙醇水溶液稀釋 至 刻度 ,搖勻 ,在 490— 510 nm 波長(zhǎng)范圍內(nèi)掃描 ,確定最大吸收波長(zhǎng) 。以吸收度 Y 為縱坐標(biāo) ,濃度 x 為橫坐標(biāo) ,進(jìn)行回歸分析 ,繪制回歸曲線。得出回歸方程 : Y=（ R2=） （ 1） 樣品總黃酮 得率 的確定 以芹菜葉 為原料 ,經(jīng)乙醇 浸提總黃酮 ,提取液 過(guò)濾 離心后 定容至 50mL,每次準(zhǔn)確量取 。 陶然： 芹菜葉中黃酮類物質(zhì)提取工藝的研究 8 總黃酮的得率 =C*50/(w*1000)*100 （ 2） 式中： w 為樣品的質(zhì)量，單位 g； C 為提取液中總黃酮的含量，單位 mg/mL。 正交試驗(yàn) 根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果 ,選擇超聲功率、超聲提取溫度、料液比、超聲提取做 4因素 3水平正交試驗(yàn) ,確定最佳提取條件。 表 1 正交試驗(yàn)因素和水平表 水平 A 超聲波功率 /W B 提取溫度 /℃ C 料液比 /g： mL D 超聲波時(shí)間 /min 1 50 50 1:70 5 2 55 60 1:80 10 3 60 70 1:90 15 穩(wěn)定性試驗(yàn) 分別取少量 芹菜葉 黃酮的提取液進(jìn)行日光、自然光、 避光 、 加熱時(shí)間 、 加熱溫度 、pH、 Vc 的 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) ,在 510 nm處測(cè)其吸光度 ,根據(jù)蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程計(jì)算總黃酮含量 ,由此判斷芹菜葉 黃酮的光及熱穩(wěn)定性。 紫外可見(jiàn)光譜掃描 第 3 章 結(jié)果與討論 單因素試驗(yàn) 乙醇濃度對(duì)得率的影響 準(zhǔn)確稱取脫脂后的 芹菜葉 粉末 g,分別加入 50mL 的水以及不同濃度的 乙醇在60℃下浸提 2h 過(guò)濾 ,濾液按方程 (2)測(cè)定總黃酮提取率。結(jié)果表明 ,在較低濃度條件下 ,隨著乙醇濃度的增加 ,芹菜葉 總黃酮的提取率逐漸提升 ,到 65%的乙醇為溶劑時(shí) ,總黃酮的提取率達(dá)到峰值 ,之后 ,總黃酮的得率 隨著乙醇濃度的增加而降低。 安徽工程科技學(xué)院畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文） 9 超聲波功率對(duì)得率的影響 準(zhǔn)確稱取脫脂后的芹菜葉 粉末 0. 5g， 加入 40mL65%乙醇 ,在 60℃下超聲功率分別為0、 50W、 60W、 70W、 80W、 90W 和 100W 時(shí)超聲提取 10min， 過(guò)濾 ， 濾液按方程 (2)測(cè)定總黃酮提取率。結(jié)果表明隨著 使用 超聲波 輔助提取 ,總黃酮的提取率 在增加 ， 而到 50W 之后 ， 總黃酮提取率隨著超聲功率的增大而降 低。由于試驗(yàn)儀器的影響，最低的超聲波提取功率只能設(shè)定在 50W。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖所示。所以選擇 10min 為最佳的提取時(shí)間。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖所示。因此 ,選擇 60℃為最佳的超聲提取溫度。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖所示。 正交試驗(yàn) 為了全面考察超聲波輔助提取的最佳工藝參數(shù) ， 在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上 ,選擇 65%乙醇為最佳提取溶劑 ,以超聲功率 ,超聲提取溫 度 ,料液比和超 聲 提取時(shí)間這 4 種因素進(jìn)行L9(34)正交試驗(yàn) ， 確定最優(yōu)方案 ， 結(jié)果見(jiàn)表。 試驗(yàn)號(hào) A B C D 黃酮得率 1 1 1 1 1 2 1 2 2 2 3 1 3 3 3 4 2 1 2 3 5 2 2 3 1 6 2 3 1 2 7 3 1 3 2 8 3 2 1 3 9 3 3 2 1 K1 K2 K3 k1 k2 k3 極差 R 因素主 次 料液比 提取溫度 超聲波提取時(shí)間 超聲波功率 最優(yōu)方案 55W 50 度 80 10min 來(lái)源 : 虛構(gòu)數(shù)據(jù)，僅用作圖表示例 穩(wěn)定性的研究 光照對(duì)芹菜葉黃酮穩(wěn)定性的影響 分別準(zhǔn)確稱取 3份 芹菜葉粉末 ，于正交試驗(yàn)最佳提取條件下進(jìn)行提取，定容后按標(biāo)準(zhǔn)方程測(cè)其初始吸光度，并將裝有 提取液的 3支 容量瓶， 1支置于日光下照射 ， 另2支分別在室內(nèi)自然光下和暗箱藥品柜中放置 ,每隔 1d測(cè)其吸光度 ， 共測(cè)定 4次 ，并將每天測(cè)得的吸光度值與初始吸光度 對(duì)比 分別計(jì)算 ，得出 黃 酮 的保存率 含量?？梢?jiàn) ，日光對(duì)芹菜 黃酮穩(wěn)定性有一定影響 ,自然光對(duì)芹菜 黃酮的穩(wěn)定性影響不大 ,避光條件下 芹菜 黃酮的穩(wěn)定性較好。 由圖可知，在 20～ 60℃ 下，熱對(duì)芹菜黃酮的穩(wěn)定性幾乎沒(méi)有影響，在 70℃ 是保存率為 %，在 70℃ 以上時(shí)分解加速， 90℃ 時(shí)保存率為 %。 pH 對(duì)芹菜葉黃酮穩(wěn)定性的影響 陶然： 芹菜葉中黃酮類物質(zhì)提取工藝的研究 14 以檸檬酸 檸檬酸鈉為緩沖體系，研究了不同 pH 值對(duì) 芹菜 總黃酮熱穩(wěn)定性的影響。由圖可見(jiàn)， 芹菜 總黃酮的熱穩(wěn)定性隨 pH 值增大而減弱。 黃酮類化合物的鑒定 紅外掃描光譜 蘆丁的結(jié)構(gòu)中含有各種具有紅外吸收的官能團(tuán)，其中 OH 基團(tuán)在 3650～ 3500cm1處峰形尖，吸收強(qiáng)。其中的芳環(huán)在 1620～ 1480cm1處具有 4 個(gè)波峰， 1500～ 1480 cm1最強(qiáng)， 1620～ 1590 cm1其次， 1580 cm1較弱， 450 cm1常觀測(cè)不到。CH 基團(tuán)在 2700～ 3000 cm1具有吸收峰。在 1471～ 1519 cm1處具有一個(gè)明顯的吸