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畢業(yè)論文羅非魚(yú)制取呈味肽的研究-在線瀏覽

2024-07-30 05:27本頁(yè)面
  

【正文】 ................................................................... 9 氨肽酶制劑的制備與活性分析 .............................................. 9 pH的優(yōu)選 ............................................................................... 10 溫度的優(yōu)選 ............................................................................ 10 酶用量與時(shí)間的優(yōu)選 ............................................................ 10 苦味的感官評(píng)價(jià)及游離氨基酸的測(cè)定 ................................. 10 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論 ............................................................................. 11 氨肽酶制劑的活性分析 ......................................................... 11 pH 對(duì)氨肽酶酶解的影響 ....................................................... 11 溫度對(duì)氨肽酶酶解的影響 .................................................... 12 酶用量 與時(shí)間對(duì)氨肽酶酶解的影響 ...................................... 12 呈味肽溶液苦味去除的分析 ................................................. 13 本章小結(jié) ........................................................................................ 14 參考文獻(xiàn) ............................................................................................... 15 致謝 ....................................................................................................... 16 I 第一章:緒論 呈味肽的概論 天然復(fù)合調(diào)味料是當(dāng)今調(diào)味品行業(yè)發(fā)展的新趨勢(shì)。 羅非魚(yú)下腳料綜合利用的現(xiàn)狀 羅非魚(yú)是聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織推薦養(yǎng)殖的熱帶亞熱帶經(jīng)濟(jì)魚(yú)類 ,全球有 85 個(gè)國(guó)家和地區(qū)養(yǎng)殖羅非魚(yú)。目前,羅非魚(yú)的加工產(chǎn)品以魚(yú)片為主,加工所產(chǎn)生的下腳料約占整魚(yú)的50%左右 [3]。 本課題的研究目的與意義 本課題將以羅非魚(yú)下腳料為原料,利用酶解技術(shù)制備呈味肽,從而探索羅非魚(yú)下腳料綜合利用的有效 II 途徑。 本論文的研究?jī)?nèi)容 研究各種條件下 酶解對(duì)呈味肽收得率的影響,及收得質(zhì)量的影響。 1 第二章 蛋白酶對(duì)羅非魚(yú)下腳料的酶解 材料與方法 材料與試劑 羅非魚(yú)下腳料來(lái)自海南翔泰漁業(yè)有限公司,蛋白質(zhì)含量為 %~%。 蛋白酶的優(yōu)選 按 1:3的比例將羅非魚(yú)下腳料與水混合,加入過(guò)量的各種蛋白酶,分別在適宜的條件下進(jìn)行酶解 10h,比較不同蛋白酶對(duì)羅非魚(yú)下腳料的水解率,選擇酶解作用最強(qiáng)的蛋白酶進(jìn)一步研究。 pH 和溫度的優(yōu)選 按 1:3的比例將羅非魚(yú)下腳料與水混合,采用上述優(yōu)選的蛋白酶,分別在不同的溫度和 pH 下進(jìn)行酶解,研究溫度、 pH 對(duì)水解率和短肽得率的影響,確定制備呈味肽的最佳溫度和 pH。由圖 1 可知,四種蛋白酶對(duì)羅非魚(yú)蛋白的水解率由大至小的順序是:堿性蛋白酶>胰蛋白酶>中性蛋白酶> 2 木瓜蛋白酶。 048121620木瓜蛋白酶 中性蛋白酶 胰蛋白酶 堿性蛋白酶水解率 / % 圖 1 不同蛋白酶對(duì)羅非魚(yú)下腳料的水解率 液固比的優(yōu)選 在 55℃ 、 、加酶量 800U/g 的條件下,采用 堿性蛋白酶對(duì)不同液固比的底物體系進(jìn)行酶解處理,酶解后的短肽得率如圖 4所示。液固比過(guò)大或過(guò)小均不利于堿性蛋白酶與底物的結(jié)合,液固比為 3:1 的 短肽得率最高,其最大值出現(xiàn)在 5 h,故該液固比可優(yōu)選為制備呈味肽的酶解條件。圖 2可以看出,溫度對(duì)堿性蛋白酶的酶解作用有很大的影響,兩個(gè)指標(biāo)均 3 因溫度不同而具有較大的差異, 堿性蛋白酶在 55℃ 時(shí)的水解率和短肽得率均為最高。 8121620242840 45 50 55 60溫度 / ℃水解率 / %81216202428短肽得率 / %水解率 短肽得率 圖 2 溫度對(duì)堿性蛋白酶酶解作用的影響 溫度的優(yōu)選 在不同溫度下,堿性蛋白酶酶解過(guò)程中水解率和短肽得率的最大值如圖 2所示。雖然水解率和短肽得率的最大值在酶解過(guò)程的不同時(shí)間出現(xiàn),但兩者畢竟具有一定關(guān)聯(lián)性, 55℃ 的溫度條件有利于酶解,從而同時(shí)有利于獲得較高的水解率和短肽得率。隨著堿性蛋白酶用量的增大,酶解作用增強(qiáng), 4 酶解前期的短肽得率也呈增大趨勢(shì)。加酶量為 600 U/g、 800 U/g、 1000 U/g 和 1200 U/g 的 短肽得率最大值分別是 %、 %、 % 和 %,其中加酶量 800 U/g 在酶解 5 h 的短肽得率最高。試驗(yàn)結(jié)果表明,溫度、 pH、液固比及加酶量對(duì)堿性蛋白酶的酶解作用均有影響,堿性蛋白酶酶解制備呈味肽的最佳條件是:溫度 55℃ 、 、液固比 3:加酶量 800 U/g 和酶解時(shí)間 5h。本次試驗(yàn)探索了羅非魚(yú)下腳料酶解制備呈味肽的工藝條件,可為羅非魚(yú)下腳料綜合利用提供有價(jià)值的參 考。 L 一亮氨酸一對(duì)硝基苯( AR) , ACROS。 培養(yǎng)基配制 富集培養(yǎng)基 (g/L ) 可溶性淀粉 8,酵母膏 2,干酪素 I0, KH2PO4 1, MgSO4 7H2O , NaCl 5,瓊脂 20,。 7H2O , NaCl 2, 干酪素平板培養(yǎng)基 干酪素 4g, KH2PO4 , Na2HPO4 7H2O ,瓊脂25g,蒸餾水 1000mL,調(diào)節(jié) , 121℃滅菌 20min (干酪素需先用少量的 ,后用于配置培養(yǎng)基。 將經(jīng)富集培養(yǎng)的菌液用無(wú)菌生理鹽水適當(dāng)稀釋,取一定量涂布平板, 37℃培養(yǎng) 18h,將生長(zhǎng)較好,透明圈較大的菌落挑至肉湯斜面上保藏,以供 6 初篩用。酶活高的用于進(jìn)行復(fù)篩。 發(fā)酵:發(fā)酵培養(yǎng)基:可溶性淀粉 20 g/L,葡萄糖 20 g/L,蛋白胨10 g/L,牛肉膏 20 g/L,酪蛋白 10 g/L, KH2PO4 1 g/L, Na2HPO47H 2O g/L。 將斜面菌種接入發(fā)酵培養(yǎng)基,每瓶接 1 環(huán)斜面菌種,置于 37 ℃ 、 200 r/min 的條件下振蕩培養(yǎng) 36 h;在冰水浴中,采用 200 w 超聲波
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