【正文】 距離等等。 1． 數(shù)值孔徑 數(shù)值孔徑簡寫 NA，數(shù)值孔徑是物鏡和聚光鏡的主要技術(shù)參數(shù)，是判斷兩者（尤其對物鏡而言）性能高低的重要標(biāo)志。 數(shù)值孔徑（ NA）是物鏡前透鏡與被檢物體之間介質(zhì)的折射率（ n）和孔徑角（ u）半數(shù)的正弦之乘積。孔徑角越大，進入物鏡的光通亮就越大，它與物鏡的有效直徑成正比，與焦點的距離成反比。基于這一原理，就產(chǎn)生了水浸物鏡和油浸物鏡，因介質(zhì)的折射率 n值大于 1， NA值就能大于 1。目前，有用折射率高的溴萘作介質(zhì)，溴萘的折射率為 ,所以 NA值可大 于 。 數(shù)值孔徑與其他技術(shù)參數(shù)有著密切的關(guān)系，它幾乎決定和影響著其他各項技術(shù)參數(shù)。OLYMPUS 現(xiàn)在推出了世界最先進的物鏡設(shè)計理念與最先進的精密加工技術(shù) ,使 50 倍物鏡的數(shù)值孔徑在 的情況下工作距離達(dá)到 1毫米 ,100 倍物鏡的數(shù)值孔徑在 1毫米 ,這幾乎是一個接近于理論的數(shù)值 . 2． 分辨率 顯微鏡的分辨率是指能被顯微鏡清晰區(qū)分的兩個物點的最小間距，又稱 ” 鑒別率 ” ?？梢娢镧R的分辨率是由物鏡的NA 值與照明光源的波長兩個因素決定。 要提高分辨率，即減小σ值，可采取以下措施 北京麥克奧迪儀器儀表有限公司 電話： 01082895262 傳真： 01082895263 4 （ 1） 降低波長λ值，使用短波長光源。 （ 3） 增大孔徑角 u值以提高 NA值。 3． 放大率和 有效放大率 由于經(jīng)過物鏡和目鏡的兩次放大，所以顯微鏡總的放大率Γ應(yīng)該是物鏡放大率β和目鏡放大率Γ 1的乘積： Γ=βΓ1 顯然，和放大鏡相比，顯微鏡可以具有高得多的放大率，并且通過調(diào)換不同放大率的物鏡和目鏡，能夠方便地改變顯微鏡的放大率。顯微鏡放大倍率的極限即有效放大倍率。有關(guān)系式： 500NAΓ1000NA 當(dāng)選用的物鏡數(shù)值孔徑不夠大，即分辨率不夠高時，顯微鏡不能分清物體的微 細(xì)結(jié)構(gòu)，此時即使過度地增大放大倍率，得到的也只能是一個輪廓雖大但細(xì)節(jié)不清的圖像，稱為無效放大倍率。所以為了充分發(fā)揮顯微鏡的分辨能力，應(yīng)使數(shù)值孔徑與顯微鏡總放大倍率合理匹配。焦深大 , 可以看到被檢物體的全層，而焦深小 ，則只能看到被檢物體的一薄層，焦深與其他技術(shù)參數(shù)有以下關(guān)系： （ 1） 焦深與總放大倍數(shù)及物鏡的數(shù)值孔徑成反比。 由于低倍物鏡的景深較大，所以在低倍物鏡照相時造成困難。 5． 視場直徑（ Field Of View） 觀察顯微鏡時，所看到的明亮的圓形范圍叫視場，它的大小是由目鏡里的視場光闌決定的。視場直徑愈大，愈便于觀察。 由公式可看出： （ 1） 視場直徑與視場數(shù)成正比。因此，若在低倍鏡下可以看到被檢物體的全貌，而換成高倍物鏡，就只能看到被檢物體的很小一部份。由于蓋玻片的厚度不標(biāo)準(zhǔn)，光線從蓋玻片進入空氣產(chǎn)生折射后的光路發(fā)生了改變，從而產(chǎn)生了相差，這就是覆蓋差。 國際 上規(guī)定，蓋玻片的標(biāo)準(zhǔn)厚度為 ，許可范圍在 ，在物鏡的制造上已將此厚度范圍的相差計算在內(nèi)。 7． 工作距離 WD 工作距離也叫物距，即指物鏡前透鏡的表面到被檢物體之間的距離。因此，它與焦距是兩個概念，平時習(xí)慣所說的調(diào)焦，實際上是調(diào)節(jié)工作距離。 數(shù)值孔徑大的高倍物鏡，其工作距離小。 物鏡的結(jié)構(gòu)復(fù)雜，制作精密，由于對像差的校正，金屬的物鏡筒內(nèi)由相隔一定距離并被固定的透鏡組組合而成。 齊焦既是在鏡檢時，當(dāng)用某一倍率的物鏡觀察圖像清晰后，在轉(zhuǎn)換另一倍率的物鏡時，其成像亦應(yīng)基本清晰，而且像的中心偏離也應(yīng)該在一定的范圍內(nèi)，也就是合軸程度。 現(xiàn)代顯微 物鏡已達(dá)到高度完善，其數(shù)值孔徑已接近極限，視場中心的分辨率與理論值之區(qū)別已微乎其微。 顯微物鏡與目鏡在參于成像這點上是有區(qū)別的。當(dāng)計算物鏡與目鏡，在消除像差上有很大差別。 顯微物鏡是一消球 差系統(tǒng)。因此，物體與像的計算位置的任何改變均導(dǎo)致像差變大。對于一臺顯北京麥克奧迪儀器儀表有限公司 電話： 01082895262 傳真： 01082895263 6 微鏡來說，機械筒長是固定的。 （ 4） 蓋玻片厚度 d （ 5） 工作距離 WD 這些參數(shù)，大多刻在物鏡筒上，如圖 3 所示。在物鏡和輔助物鏡之間是平行光，所以中間距離比較自由一些，可以加入棱鏡等光學(xué)元件。 （ 2） 按浸法特征：非浸式 (干式 )、浸式 (油浸、水浸、甘油浸及其它浸法 )。 （ 4） 按數(shù)值孔徑和放大倍數(shù)：低倍 (NA≤ 與β≤ 10X)，中倍 (NA≤ 與β≤ 40X)，高倍 (NA＞ 與β＞ 40X)。 a. 消色差物鏡（ Achromatic objective） 這是應(yīng)用最廣泛的一類顯微物鏡，外殼上常有 ”Ach”字樣。軸外點的像散不超過允許值 (－ 4 屬光 度 )，二級光譜未校正。數(shù)值孔徑至 的消色差物鏡由兩組雙膠透鏡構(gòu)成。高倍物鏡的平面像差可用浸法消除。 b. 復(fù)消色差物鏡（ Apochromatic objective） 這類物鏡的結(jié)構(gòu)復(fù)雜，透鏡采用了特種玻璃或螢石等材料制作而成，物鏡 的外殼上標(biāo)有 ”Apo”字樣。其倍率色差并不能完全校正，一般須用目鏡補償。因此，復(fù)消色差物鏡的性能很高，適用于高級研究鏡檢和顯微照相。在結(jié)構(gòu)上透鏡的數(shù)目比消色差物鏡多，北京麥克奧迪儀器儀表有限公司 電話： 01082895262 傳真： 01082895263 7 比復(fù)消色差物鏡少，成像質(zhì)量上，遠(yuǎn)較消色差物鏡為好，接近于復(fù)消色差物鏡。平場物鏡的視場平坦，更適用于鏡檢和顯微照相。而平視場復(fù)消色差物鏡，則必須用目鏡來補償它的倍率色差。只能在紫外線光譜區(qū)的個別區(qū)內(nèi)使用 (寬度不超過 20mm)，可見光譜區(qū)不能采用單色物鏡。主要缺點是相當(dāng)大一部分光束在中心被遮蔽 (入瞳面積的 25%)。并且兩同軸反射鏡的殘余像差是互相補償?shù)?，同時用透鏡組來增大數(shù)值孔徑。 f. 特種物鏡 所謂 ”特種物鏡 ”是在上述物鏡的基礎(chǔ)上，專門為達(dá)到某些特定的觀 察效果而設(shè)計制造的。調(diào)節(jié)環(huán)上的刻度可從 0 .,在物鏡的外殼上也標(biāo)科有此數(shù)字，表明可校正蓋玻片從 厚度之間的誤差。這時調(diào)節(jié)光闌的大小，使背景變黑，使被檢物體更明亮，增強鏡檢效果。 (d) 無罩物鏡（ No cover objective） 有些被檢物體，如涂抹制片等，上面不能加用蓋玻片，這樣在鏡檢時應(yīng)使用無罩物鏡，否則圖像質(zhì)量將 明顯下降，特別是在高倍鏡檢時更為明顯。 (e) 長工作距離物鏡 這種物鏡是倒置顯微鏡的專用物鏡，它是為了滿足組織培養(yǎng)，懸浮液等材料的鏡檢而設(shè)計。已知顯微鏡的分辨率能力是由物鏡的數(shù)值孔徑所決定的，而目鏡只是起放大北京麥克奧迪儀器儀表有限公司 電話： 01082895262 傳真： 01082895263 8 作用。 （六） 聚光鏡 聚光鏡裝在載物臺的下方。聚光鏡不僅可以彌補光量的不足和適當(dāng)改變從光源射來的光的性質(zhì)，而且將光線聚焦于被檢物體上，以得到最好的照明效果。 1． 阿貝聚光鏡（ Abbe condenser） 這是由德國光學(xué)大學(xué)大師恩斯特 .阿貝 (Ernst Abbe)設(shè)計。因此，多用于普通顯微鏡上。因此，在高級研究顯微鏡常配有此種聚光鏡。 3． 搖出式聚光鏡（ Swing out condenser） 在使用低倍物鏡時（如 4X），由于視場大，光 源所形成的光錐不能充滿真整個視場，造成視場邊緣部分黑暗，只中央部分被照亮。 4． 其它聚光鏡 聚光鏡除上述明場使用的類型外，還有作特殊用圖的聚光鏡。 （七） 照明方法 顯微鏡的照明方法按其照明光束的形成，可分為 ”透射式照明 ”，和 ”落射式照明 ”兩大類。主要應(yīng)用與金相顯微鏡或熒光鏡檢法。有兩種照明方式 （ 1） 臨界照明（ Critical illumination） 光源經(jīng)過聚光鏡后，成像于物平面上，如圖 5 所示。顯然，在臨界照明中，如果光源表面亮度不均勻，或明顯地表現(xiàn)出細(xì)小的結(jié)構(gòu)，如燈絲等，那么就要嚴(yán)重影響顯微鏡觀察效果，這是臨界照明的缺點。用透射光照明時，物鏡成像光束的孔徑角，被聚光鏡像方光束的孔徑角所決定，為使物鏡的數(shù)值孔徑得到充分利用，聚光鏡應(yīng)有與物鏡相同或稍大的數(shù)值孔徑。在光源 1 與聚光北京麥克奧迪儀器儀表有限公司 電話： 01082895262 傳真： 01082895263 9 鏡 5 之間加一輔助聚光鏡 2，如圖 6 所示。 2． 落射式照明 在觀察不透明物體時 ，例如通過金相顯微鏡觀察金屬磨片，往往是采用從側(cè)面或者從上面加以照明的方式。如圖 7 所示。所謂超顯微質(zhì)點，是指那些小于顯微鏡分辨極限的微小質(zhì)點。因此，在暗