【正文】 葉、壞死二種類型分別考慮 ,各分為 5級(jí)。 潛育期 :自接種至顯癥日數(shù)。 潛育期以及病情擴(kuò)展速度反映品種在不同階段的抗擴(kuò)展能力。二者牽涉到較繁復(fù)的計(jì)算。品種抗性的好壞最終體現(xiàn)在產(chǎn)量損失上 ,產(chǎn)量損失實(shí)際上是各個(gè)抗性組分綜合作用的結(jié)果 ,但產(chǎn)量損失需要一個(gè)完整的生長(zhǎng)季才能鑒定 ,而且容易受環(huán)境因素的影響 ,所以產(chǎn)量損失不作為綜合病情指數(shù)的構(gòu)成因子。分母項(xiàng)Ｉ、Ｓ、Ｔ分別為感病對(duì)照品種 (ＣＫ )的發(fā)病率、病級(jí)以及接種至最高病情所經(jīng)歷天數(shù)。凡在接種后沒(méi)有系統(tǒng)感染 ,ＳＤＩ =0的品種為免疫類型 。 。感 。 63個(gè)供試品種有 56個(gè)一致 ,說(shuō)明兩種方法符合 程度較好。且綜合病情指數(shù)劃分方法簡(jiǎn)單易行。 大豆對(duì)ＳＭＶ的數(shù)量抗性表現(xiàn)為潛育期長(zhǎng) ,發(fā)病率低 ,病級(jí)輕 ,病情擴(kuò)展慢以及產(chǎn)量損失小等多個(gè)方面。該種方法在小麥慢條銹性鑒定中曾有報(bào)道 [7],這種方法也可用于大豆對(duì)ＳＭＶ?jǐn)?shù)量抗性的鑒定。聚類分析依賴于整個(gè)群體 ,綜合病情指數(shù)是與共同對(duì)照的相對(duì)值 ,可進(jìn)行不同環(huán)境間材料的抗性比較 ,不受材料數(shù)量、時(shí)間、批次、地點(diǎn)的限制。所以在抗性鑒定中綜合病情指數(shù)分級(jí)方法比 4個(gè)組分的聚類分析方法更具通用性。 Hall、 G lom us f asiculatum Thaxt) Gerd. amp。 Sm ith、 G. m osseae N ico lson amp。供試 AM 真菌可不同程度地促進(jìn)大豆植株的生長(zhǎng)發(fā)育 , 增加植株高度、地上 )部和地下部干重及單株產(chǎn)量 , 減輕感病大豆品種‘開育 10’ SCN 的危害 , 降低病情指數(shù)、根上和根圍土壤中胞囊數(shù)量、 2 齡幼蟲和胞囊內(nèi)卵數(shù)。接種 SCN 顯著降低了 G. intraradices 和 G. versif orm e 對(duì)大豆根系的侵染率、 G. f asiculatum 的產(chǎn)孢數(shù)量及 G. intraradices 的侵入點(diǎn)數(shù)量 , 增加了 G. m osseae 的產(chǎn)孢數(shù)量。 由于絕大多數(shù)植物病原線蟲是在植物菌根圍 (mycorrhizosphere) 和根內(nèi)發(fā)生發(fā)展造成危害 , 這就必然同菌根圍內(nèi)主要成員 —— 菌根真菌產(chǎn)生一定的相互作用 [1 。我國(guó)也相繼觀察到 AM 真菌的數(shù)個(gè)菌種能在 SCN胞囊內(nèi)產(chǎn)孢 , 并有菌絲分布 [3 。 另外還有部分研究尚未確定其供試線蟲和AM 真菌的作用關(guān)系。本試驗(yàn)旨在溫室嚴(yán)格控制條件下 , 探索 AM 真 菌與 SCN 之間的相互作用關(guān)系 , 為今后進(jìn)一步的試驗(yàn)提供依據(jù)。根據(jù)初步統(tǒng)計(jì) ,AM 真菌抑制線蟲發(fā)育和繁殖的報(bào)道占 46. 4% , 增加線蟲發(fā)育和繁殖的占 17. 9% , 無(wú)顯著影響的占 35. 7%。本試驗(yàn)表明 G. f asiculatum 能有效地減少胞囊、卵和幼蟲數(shù)量 。 而 G. m osseae 和 G. versif orm e 沒(méi)有明顯降低胞囊內(nèi)卵的數(shù)量和根圍土壤中 2 齡幼蟲數(shù)量?？梢?,AM 真菌對(duì)抑制線蟲、減輕病害具有較好的效果。說(shuō)明在 AM 真菌與大豆胞囊線蟲相互作用的初期階段篩選有效抑制該病害的 AM 真菌菌種是可行的。在本試驗(yàn)條件下 SCN 似乎不影響 AM真菌在根內(nèi)的泡囊發(fā)育狀況 , 僅 抑制了少數(shù)供試 AM 真菌的侵染 。 在菌根真菌與病原線蟲的直接作用機(jī)制中 , 人們很早就注意到 AM 真菌對(duì)病原線蟲的內(nèi)寄生作用。因此 , 有必要深入了解 AM 真菌侵染大豆胞囊線蟲的胞囊、并在其內(nèi)部產(chǎn)孢的效應(yīng)與機(jī)制。另一方面 ,AM 真菌侵染大豆根系時(shí)激活了寄主的防御反應(yīng) , 與抗病性有關(guān)的防御酶活性提高了 , 從而可能使其對(duì) SCN 的再次進(jìn)攻產(chǎn)生快速反應(yīng) , 提高了抗病性 (待另文發(fā)表 )。 —— 李海燕 , 劉潤(rùn)進(jìn) , 束懷瑞，叢枝菌根真菌與大豆胞囊線蟲相互作用研究初報(bào)，植物病理學(xué)報(bào)， 2020， 32（ 4）： 356360 摘要 : 概述了大豆胞囊線蟲生理小種的研究簡(jiǎn)史 , 從鑒別寄主、鑒別寄主生長(zhǎng)環(huán)境、接種物的制備、調(diào)查時(shí)期、方法和鑒定標(biāo)準(zhǔn)等幾個(gè)方面對(duì)大豆 胞囊線蟲生理小種的鑒定技術(shù)進(jìn)行了論述 , 并綜述了掃描電鏡、生物技術(shù)在大豆胞囊線蟲生理小種鑒定上的應(yīng)用進(jìn)展。該病由俄國(guó)人 Jaczew ski 于 1899 年在我國(guó)東北首次發(fā)現(xiàn) [1 。我國(guó)黑龍江、遼寧、吉林、內(nèi)蒙古、陜西、河北、河南、山西、山東、安徽、江蘇、北京等省市都有該病發(fā)生 , 年發(fā)病面積在 267 萬(wàn)公頃以上 [2 。 —— 齊軍山，李長(zhǎng)松，李林等，大豆胞囊線蟲生理小種及其鑒定技術(shù)，中國(guó)油料作物學(xué)報(bào)，2020， 22（ 4）： 7174 摘要 大豆胞囊線蟲是一種世界性的病害。但由于抗性鑒定工作量大、易受環(huán)境因素影響以及大豆胞囊線蟲群體本身的異質(zhì)性 ,各個(gè)研究者的結(jié)果差異很大 ,具有抗源和組合特異性。分子標(biāo)記結(jié)合經(jīng)典遺傳試驗(yàn)定位了 2個(gè)抗性基因位點(diǎn)ｒｈｇ 1 和Ｒｈｇ 4,ｒｈｇ 1 在抗性遺傳中貢獻(xiàn)較大且具有非小種?；剐?,對(duì)抗病育種和基因克隆有重要意義 ,在Ｇ連鎖群上許多與ｒｈｇ 1 緊密連鎖的分子標(biāo)記已經(jīng)找到 , 11 并證明在抗性鑒定中有很大的利用價(jià)值。 大豆胞囊線蟲 (ＨｅｔｅｒｏｄｅｒａｇｌｙｃｉｎｅｓＩｃｈｉｎｏｈｅ )是一種世界性的大豆病害 ,一般造成產(chǎn)量損失 5%10%,嚴(yán)重發(fā)生地塊減產(chǎn)達(dá) 30%以上 ,甚至顆粒無(wú)收 ,每年由于大豆胞囊線蟲 病發(fā)生而造成經(jīng)濟(jì)損失可達(dá)數(shù)十億美元 [1]?？剐赃z傳機(jī)制是選育抗病品種的理論基礎(chǔ)。但是 ,由于受以下幾個(gè)因素的影響 ,遺傳研究進(jìn)展緩慢 :(1)大豆對(duì)胞囊線蟲的抗性受多對(duì)基因控制 ,環(huán)境變異大 。(3)大豆胞囊線蟲是一個(gè)遺傳上異質(zhì)的異交群體 ,基因型并不單一。 由于 常規(guī)抗性鑒定工作量大 ,容易受到環(huán)境因素的影響 ,而且溫室鑒定對(duì)材料是破壞性的 ,因此 ,許多研究致力于利用分子標(biāo)記進(jìn)行輔助選擇。Ｍａｈａｌｉｎｇａｍ等用ＥｘｃｅｓｓＰｅｋｉｎｇ的Ｆ2 群體以及 3 個(gè)形態(tài)標(biāo)記 ,108 個(gè)ＲＦＬＰ標(biāo)記和 400 個(gè)ＲＡＰＤ標(biāo)記 ,發(fā)現(xiàn)控制種皮色的Ｉ位點(diǎn)與Ｒｈｇ 4 相距 ,位于Ａ連鎖群上。Ｗｅｉｓｅｍａｎｎ等 (1992)[3 38]找到了一個(gè)與Ｉ位點(diǎn)相距 標(biāo)記ＰＢＬＴ 65。Ｑｉｕ等 (1999)[40]在ＰｅｋｉｎｇＥｓｓｅｘ的Ｆ 2∶ 3 群體中篩選到了與抗 5 號(hào)小種的基因連鎖的ＲＦＬＰ標(biāo)記 ,其中 5 個(gè)標(biāo)記 ,Ａ 593 和Ｔ 005 位于Ｂ連鎖群上 ,Ａ 018 位于Ｅ連鎖群 ,Ｋ 014 和Ｂ 072 位于Ｈ連鎖群 ,與抗 1 號(hào)小種的位點(diǎn)連鎖 ,可以解釋 %的變異 ,以上 5 個(gè)中的 3個(gè)標(biāo)記Ｂ 07Ｋ 01Ｔ 005 與抗 3 號(hào)小種的位點(diǎn)連鎖 ,可以解釋 %的變異 ,由此可以推測(cè)Ｐｅｋｉｎｇ中控制對(duì) 1 號(hào)和 3 號(hào)小種抗性的基因位于相同的位點(diǎn)上。 結(jié)合經(jīng)典遺傳試驗(yàn)和分子標(biāo)記的研究結(jié)果 ,可以初步推測(cè) ,Ｐｅｋｉｎｇ、ＰＩ 9076ＰＩ209332 等抗源中至少存在兩個(gè)相似的抗性基因位點(diǎn) :位 于Ｇ連鎖群上的ｒｈｇ 1 和位于Ａ連鎖群上Ｒｈｇ 4。對(duì)這些基因很難進(jìn)行等位性測(cè)定 ,所以 ,篩選與這些基因緊密連鎖的分子標(biāo)記 ,參考遺傳圖譜進(jìn)行ＱＴＬ定位 ,推測(cè)基因的等位性及遺傳效應(yīng)將是一條可行的途徑。 我國(guó)抗 SCN 育種起步較晚 . 20 世紀(jì) 80 年代以來(lái) , 黑龍江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院大豆所首先開展了抗大豆孢囊線蟲 3 號(hào)小種的抗源篩選 , 并篩選出抗源哈爾濱小黑豆 [43. 近十幾年來(lái) , 也育成推廣了一批抗或耐病的品種 , 如黑龍江省農(nóng)墾科學(xué)院的“墾豐 1 號(hào)”、吉林白城地區(qū)農(nóng)科所的“白城 2 號(hào)”、山西的“晉豆 11 號(hào)”、河南的“商丘 7608”、山東的“躍進(jìn) 5 號(hào)” [43. 此外黑龍江省大慶市農(nóng)科所以哈爾濱小黑豆為親本 , 選育出高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)、適應(yīng)性廣的抗線蟲大豆新品種 —— 慶豐 1 號(hào) [29. 山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物所以北京小黑豆、哈爾濱小黑豆為 抗源 , 選育高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)抗線蟲品種 —— 齊黃 25 號(hào)和早熟、高產(chǎn)抗線蟲品種黑豆 2 號(hào)、黃種皮新抗源 40A、 42A 系列品系 , 還選育出農(nóng)藝性狀優(yōu)良、高抗 SCN 褐色種皮的齊茶豆 1 號(hào) (濟(jì) 3045)等茶豆系列品系 [42, . 遼寧省農(nóng)業(yè)科學(xué)院油料作物研究所以遼豆 10(感病 )為母本 , Frankling(抗病 )為父本進(jìn)行有性 43 ]雜交 , 選育出在疫區(qū)比對(duì)照品種增產(chǎn) 25% 以上 , 高抗 1 號(hào)、 3 號(hào)生理小種的品系各 5 個(gè) [3. 王連錚等 [44 進(jìn)行了大豆抗孢囊線蟲 4 號(hào)生理小種 的品種選育 , 初步育成了 RN 01 和中作 RN 05 等農(nóng)藝性狀表現(xiàn)良好的抗病品種 . 這些抗病或耐病品種在發(fā)病條件下比生產(chǎn)上的常規(guī)品種一般增產(chǎn) 10% 30%。 4 大豆抗孢囊線蟲品種的鑒定 培育抗病品種離不開抗源篩選和雜交后代的抗病性鑒定 . 為了能客觀反映測(cè)試材料的抗病性 , 過(guò)去主要利用常規(guī)方法鑒定大豆對(duì)孢囊線蟲的抗性 , 如田 間種植鑒定、可控制光溫的溫 13 室鑒定和實(shí)驗(yàn)室鑒定抗病性的鑒定標(biāo)準(zhǔn)主要根據(jù)大豆植株根部著生的孢囊數(shù)決定 , 但由于大豆抗病性劃分標(biāo)準(zhǔn)的人為性 , 不同時(shí)期、不同作者對(duì)抗病性的判定標(biāo)準(zhǔn)差異很大。 抗 , 8 23 個(gè) 。 中感 , 40 55。 中抗 , 6 10 個(gè) 。 高抗 , 0. 1 3. 0。 中感 , 10. 1 30。 中抗 , 10% 30%。 感病 , 大于 60%. 中國(guó)最龐大的資料庫(kù)下載 常規(guī)的鑒定方法依賴于根上的孢囊數(shù) , 其鑒定的原則是準(zhǔn)確、快速 , 但鑒定環(huán)節(jié)最佳化 , 包括鑒定期間寄主和寄生物生長(zhǎng)環(huán)境最適化 , 均勻一致有強(qiáng)感染力的同質(zhì)接種物的制備方法和簡(jiǎn)便、快速、定量的接種技術(shù)是當(dāng)前常規(guī)鑒定方法的技術(shù)關(guān)鍵 [47. 如果在常規(guī)鑒定的同時(shí)能結(jié)合生化和分子生物學(xué)的方法進(jìn)行 ,對(duì)于獲得準(zhǔn)確的鑒定結(jié)果將有極大的幫助 . Pavlova [51 ]根據(jù)抗感品種根部 POD 和 SOD 活性研究認(rèn)為 , 呼吸酶的差異可作為抗線蟲品種選擇的一個(gè)因子 . Kim et al [52 ]報(bào)道了過(guò)氧化物同工酶酶譜與抗孢囊線蟲的關(guān)系 , 抗病品種的第 5 條譜帶較厚而感病品種則較薄 . 這表明與抗性相關(guān)的酶活性及同工酶譜的變化 , 可作為抗性篩選的生化標(biāo)記 . 分子生物學(xué)的發(fā)展 , 尤其是 DNA 分子標(biāo)記的出現(xiàn) , 為分子標(biāo)記輔助育種的抗性鑒定方法提供了更廣闊的前 景 . 這一部分已在“ 1. 2”中詳細(xì)論述 . 此外 , 郭金平 [53 利用 PCR 技術(shù)對(duì)甘薯的抗感線蟲病基因進(jìn)行了分子檢測(cè) , 發(fā)現(xiàn)經(jīng)線蟲病常規(guī)鑒定的甘薯品種出現(xiàn)特異條帶 , 而經(jīng)常規(guī)鑒定為感病的甘薯品種不出現(xiàn)特異條帶 , PCR 檢測(cè)結(jié)果與線蟲病常規(guī)鑒定基本一致 , 吻合度達(dá) 90. 91%. 目前利用抗線蟲病基因同源特異序列的 PCR 技術(shù)進(jìn)行大豆抗孢囊線蟲的分子鑒定在國(guó)內(nèi)外尚未見報(bào)道 . —— 陳觀水，陸熙園，吳揚(yáng)等，大豆抗孢囊線蟲病育種研究進(jìn)展，福建農(nóng)林大學(xué)學(xué)報(bào)， 2020，32（ 2）： 156161 14 此資料來(lái)自企業(yè) —— 宛煜嵩，王珍，中國(guó)大豆孢囊線蟲抗性研究進(jìn)展，分子植物育種，2020， 2（ 5）： 609619 摘 要 :以科豐 1 號(hào)南農(nóng) 1138 2 為親本構(gòu)建的ＲＩＬ群體ＮＪＲＩＫＹ為材料 ,對(duì)群體進(jìn)行了 5 個(gè)ＳＭＶ株系 (Ｓａ、Ｓｃ Ｓｃ Ｎ Ｎ 3)的抗病性鑒定。用Ｍａｐｍａｋｅｒ 3 0 進(jìn)行連鎖分析 ,發(fā)現(xiàn)Ｒｓａ與Ｒｎ Ｒｎ 3 和Ｒｓｃ 9 均連鎖 ,距離分別為 21 4ｃＭ、 23 5ｃＭ和 35 3ｃＭ 。Ｒｎ 1和Ｒｎ 3 之間的遺傳距離最近 ,為 10 2ｃＭ。根據(jù)ＲＦＬＰ、ＳＳＲ標(biāo)記分析結(jié)果構(gòu)建了一套大豆遺傳圖譜 ,該圖譜包含 22 個(gè)連鎖群、 256 個(gè)標(biāo)記 ,總遺傳距離為 3050 9ｃＭ。它們與Ｒｎ Ｒｎ 3 的距離分別為 15 04ｃＭ、17 82ｃＭ、 15 37ｃＭ和 16 14ｃＭ、 17 82ｃＭ、 16 58ｃＭ。研究表明 :除影響植株生長(zhǎng)外 ,ＳＭＶ還能使種皮產(chǎn)生斑駁 ,降低大豆的外觀品質(zhì)。國(guó)內(nèi)也已對(duì)ＳＭＶ株系進(jìn)行了鑒定及抗病性研究 ,其中主要工作是對(duì)東北株系Ｎ Ｎ Ｎ 3 的株系群和江淮下游的Ｓａ、Ｓｃ、Ｓｇ、Ｓｈ株系群的抗性 研究 [2]。凡先后兩次汁液摩擦接種后一個(gè)月內(nèi)不發(fā)病或只在接種葉上出現(xiàn)局部枯斑而上位葉無(wú)癥狀者為抗病 ,凡出現(xiàn)系統(tǒng)花葉癥狀或枯病癥狀者均為感病。 χ ｃ 2=Σ (｜Ｏ Ｅ｜ 0 5)2 /Ｅ )Ｏ為觀察值 ,Ｅ