【正文】
24。,常用方法: 單抗直接標記,第八頁,共五十四頁。il225。),免疫熒光技術(shù)是根據(jù)抗原—抗體反應的原理,先將已知的抗原或抗體標記上熒光素,制成熒光抗原或抗體,再用這種熒光抗體(或抗原)作為探針檢測細胞表面或細胞內(nèi)的相應抗原(或抗體)。n fā)經(jīng)驗,免疫熒光技術(shù)(j236。ng)級,能量損失,第七頁,共五十四頁。)41年的研發(fā)經(jīng)驗,熒光激發(fā)(jīfā)與發(fā)射原理,能量(n233。,第六頁,共五十四頁。ng)波長的光線照射后發(fā)出的熒光。如,組織中的蛋白質(zhì)和脂類在紫外線照射下能發(fā)射出微弱的淡藍色熒光。熒光的顏色多為紅、藍、綠或黃等。由于物質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)不同,所吸收的光和所發(fā)射的熒光波長也不同。)41年的研發(fā)經(jīng)驗,熒 光,有些物質(zhì),當用光照射時,它吸收了該種波長的光后還會發(fā)射出各種顏色和不同強度的光,而當光停止照射后,這種發(fā)射的光也隨之消失,這種發(fā)射的光稱為熒光(fluorescence)。,第五頁,共五十四頁。 (5)統(tǒng)計學意義明顯。ngli224。 (3)多參數(shù)相關(guān)測量。n fā)經(jīng)驗,特點: (1)單細胞分析。,第四頁,共五十四頁。))的物理、生理、生化、免疫、遺傳、分子生物學性狀及功能狀態(tài)等進行定性或定量檢測的一種現(xiàn)代細胞分析技術(shù)。n fā)經(jīng)驗,流式細胞術(shù),流式細胞分析,又稱流式細胞術(shù)(flow cytometry,F(xiàn)CM),是以高能量激光照射高速流動狀態(tài)下被熒光色素染色的單細胞或微粒(wēil236。,第三頁,共五十四頁。)41年的研發(fā)經(jīng)驗,流式細胞術(shù),流式細胞分析,又稱流式細胞術(shù)(flow cytometry,F(xiàn)CM),是以高能量激光照射高速流動狀態(tài)下被熒光色素染色的單細胞或微粒,測量其產(chǎn)生的散射光和發(fā)射熒光的強度,從而對細胞(或微粒)的物理、生理(shēnglǐ)、生化、免疫、遺傳、分子生物學性狀及功能狀態(tài)等進行定性或定量檢測的一種現(xiàn)代細胞分析技術(shù)。n fā)經(jīng)驗,流式細胞儀的原理 流式細胞儀使用一般方法(fāngfǎ)及技巧,第二頁,共五十四頁。n fā)經(jīng)驗,第一頁,共五十四頁。,Partec Excellence in Flow Cytometry,Contributions to New Developments in Medical Diagnosis and Microbiology 德國 Partec公司中國(zhōnɡ ɡu243。)服務中心 張向陽,超過41年的研發(fā)(y225。,Partec Excellence in Flow Cytometry,超過41年的研發(fā)(y225。,Partec Excellence in Flow Cytometry,超過(chāogu242。他綜合了激光技術(shù)、計算機技術(shù)、半導體技術(shù)、流體力學、細胞化學等各門學科。,Partec Excellence in Flow Cytometry,超過41年的研發(fā)(y225。),測量其產(chǎn)生的散射光和發(fā)射熒光的強度,從而對細胞(或微粒(wēil236。他綜合了激光技術(shù)、計算機技術(shù)、半導體技術(shù)、流體力學、細胞化學等各門學科。,Partec Excellence in Flow Cytometry,超過41年的研發(fā)(y225。 (2)快速分析。 (4)定性或定量分析(d236。ngfēnxī)細胞。 (6)分選。,Partec Excellence in Flow Cytometry,超過(chāogu242。熒光的波長比吸收光線的波長要長些。被這些物質(zhì)吸收的光稱為激發(fā)光,產(chǎn)生的發(fā)射光即熒光。 物質(zhì)的熒光有兩種,一種是自發(fā)性熒光,即組織在短波長光照射下自行發(fā)射出的熒光。另一種熒光是誘發(fā)熒光,即細胞與熒光色素結(jié)合后,經(jīng)一定(yīd236。常用的是誘發(fā)熒光,能產(chǎn)生熒光的生物染色劑稱為熒光染料(或稱熒光色素)。,Partec Excellence in Flow Cytometry,超過(chāogu242。ngli224。,Partec Excellence in Flow Cytometry,超過41年的研發(fā)(y225。sh249。從而使形成的抗原—抗體復合物上含有標記的熒光素,利用流式細胞儀檢測標本,熒光素受外來(w224。i)激發(fā)光的照射而發(fā)生明亮的熒光(如,黃、綠色或紅色等),通過確定抗原或抗體的性質(zhì)、定位來推斷細胞的信息,以及利用定量技術(shù)測定含量。,Partec Excellence in Flow Cytometry,超過(chāogu242。n r249。g242。,第九頁,共五十四頁。)41年的研發(fā)經(jīng)驗,細胞膜電位(di224。i)、離子、脂類探針,現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)或開發(fā)出來了各種細胞膜電位、各類離子、pH值、脂類探針,運用(y249。ng)這些探針在流式細胞儀上可輕易檢測各種細胞功能,可實現(xiàn)一些意想不到的效果。,Partec Excellence in Flow Cytometry,超過(chāogu242。ngguāng)術(shù)語,MESF(Molecules of equivalent soluble fluorochrome)等量可溶性熒光分子:國際標準單位,用來衡量熒光強度 自發(fā)熒光:細胞或顆粒在激發(fā)照射下會發(fā)出各種波長的熒光。,Partec Excellence in Flow Cytometry,超過(chāogu242。nɡ ji224。,Partec Excellence in Flow Cytometry,超過(chāogu242。nɡ ji224。,Partec Excellence in Flow Cytometry,超過(chāogu242。ngguāng)染料種類,488nm藍色激光激發(fā): FITC(異硫氰酸熒光素):綠色 530nm PE(藻紅蛋白(d224。i))