20xx年醫(yī)學專題—流式細胞儀原理和一般用法-預覽頁
【正文】 etry,超過(chāogu242。g242。)41年的研發(fā)經(jīng)驗,細胞膜電位(di224。ng)這些探針在流式細胞儀上可輕易檢測各種細胞功能，可實現(xiàn)一些意想不到的效果。ngguāng)術語,MESF（Molecules of equivalent soluble fluorochrome）等量可溶性熒光分子：國際標準單位，用來衡量熒光強度 自發(fā)熒光：細胞或顆粒在激發(fā)照射下會發(fā)出各種波長的熒光。nɡ ji224。nɡ ji224。ngguāng)染料種類,488nm藍色激光激發(fā)： FITC(異硫氰酸熒光素）：綠色 530nm PE（藻紅蛋白(d224。n fā)經(jīng)驗,流式細胞儀的原理(yu225。這些信號可以被測量、存貯、顯示，于是細胞的一系列重要的物理特征和生化特征就被快速地、大量地測定。,Partec Excellence in Flow Cytometry,超過41年的研發(fā)(y225。流動室內(nèi)充滿鞘液，在鞘液的約束下，細胞排成單列由流動室的噴嘴噴出，成為細胞液柱。在與入射光束和液柱垂直的方向放置光學系統(tǒng)（透鏡、光闌，濾片和檢測器等）用以收集熒光信號。流動室由石英玻璃制成，并在石英玻璃中央開一個孔徑為350250um的長方形孔，供細胞單個流過，檢測區(qū)在該孔的中心，這種流動室的光學特性良好，流速較慢,因而細胞受照時間長，可收集的細胞信號光通量大，配上廣角收集透鏡，可獲得很高的檢測靈敏度和測量精度。,超過41年的研發(fā)(y225。)41年的研發(fā)經(jīng)驗,流式細胞儀的構(gòu)造(g242。,Partec Excellence in Flow Cytometry,超過41年的研發(fā)(y225。這種橢園形光斑激光能量分布屬正態(tài)分布。n fā)經(jīng)驗,光學系統(tǒng),流式細胞儀的光學系統(tǒng)是由若干組透鏡、濾光片、小孔組成，它們分別將不同波長的熒光信號送入到不同的電子探測器。,Partec Excellence in Flow Cytometry,超過(chāogu242。d236。,Partec Excellence in Flow Cytometry,超過(chāogu242。,Partec Excellence in Flow Cytometry,超過(chāogu242。,Partec Excellence in Flow Cytometry,超過(chāogu242。ibiǎo)細胞內(nèi)不同物質(zhì)、不同波長的熒光信號，這些信號以細胞為中心，向空間360度立體角發(fā)射，產(chǎn)生散射光和熒光信號, 下圖是以激發(fā)光光源波長488nm為例的示意圖：,第二十四頁，共五十四頁。 zhǒnɡ)碎片及鞘液中的小顆粒，以避免對被測細胞的干擾。shēn)在激光照射下發(fā)出微弱的熒光信號，稱為細胞自發(fā)熒光；另一種是經(jīng)過特異熒光素標記細胞后，受激發(fā)照射得到的熒光信號，通過對這類熒光信號的檢測和定量分析就能了解所研究細胞參數(shù)的存在與定量。h233。)41年的研發(fā)經(jīng)驗,高度(gāod249。,Partec Excellence in Flow Cytometry,超過41年的研發(fā)(y225。,Partec Excellence in Flow Cytometry,超過(chāogu242。bi233。)41年的研發(fā)經(jīng)驗,熒光信號(x236。 對數(shù)放大： 即放大器的輸出成10倍關系，如果原來輸出是1，當輸入增大到原來10倍時，輸出為2；當輸入增大到原來100倍時輸出是3等等。,第三十頁，共五十四頁。 FCS 1.0 研發(fā)于1984年 FCS 2.0 研發(fā)于1990年，兼容1.0格式 FCS 3.0 研發(fā)于1997年，兼容前兩者 支持(zhīch237。nji224。i)的某些數(shù)值。n fā)經(jīng)驗,文件頭信息(x236。ngguāng)：,第一個細胞(x236。)的種類,直方圖 散點圖 三維圖,第三十五頁，共五十四頁。)光強度，強度高的光信號靠右側(cè)顯示。n fā)經(jīng)驗,散點圖 （用于雙參數(shù)(cānsh249。 縱坐標，Y軸 表示光強度，強度高的光信號靠上側(cè)顯示。n fā)經(jīng)驗,什么(sh233。 在同一張圖中可以設置多個Region。,Partec Excellence in Flow Cytometry,超過(chāogu242。 3.被選定的子集將被計算機計算數(shù)據(jù)和顯示狀態(tài)。,Partec Excellence in Flow Cytometry,超過41年的研發(fā)(y225。)定義的平均值。)41年的研發(fā)經(jīng)驗,如何(r)放大 對數(shù)(du236。n fā)經(jīng)驗,光譜交叉重疊(ch243。,Partec Excellence in Flow Cytometry,超過41年的研發(fā)(y225。guǒ)是完全按照計算來做補償，圖形將很大一部分跑出了雙參數(shù)圖，也就是說無法得到我們滿意的圖形，但由于我們勾選了“Random Bias”，所有的圖形將重新被分配，就像上圖的Q1門中的顯示一樣。)41年的研發(fā)經(jīng)驗,FL1未染色(rǎns232。n fā)經(jīng)驗,第四十五頁，共五十四頁。,Partec Excellence in Flow Cytometry,超過(chāogu242。nyā)定位粒細胞后逐步調(diào)高電壓(di224。)41年的研發(fā)經(jīng)驗,技巧(j236。,Partec Excellence in Flow Cytometry,超過(chāogu242。nɡ hu243。ngch225。z225。)41年的研發(fā)經(jīng)驗,http://www.partec.com http://www.partec.de,我 們 的 網(wǎng) 站,第五十二頁，共五十四頁。,內(nèi)容(n232。表示數(shù)量累計，相同強度(qi225。打開應用軟件并選擇相應的方案或新建
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