流式細(xì)胞儀培訓(xùn)ppt課件-展示頁(yè)
2025-01-19 20:08本頁(yè)面
【正文】 – 允許一定帶寬的波長(zhǎng)通過(guò) ? 當(dāng)以 45o 角 放置濾片時(shí) ,該濾片可以通過(guò)一定波長(zhǎng)的光 ,同時(shí)也可以阻斷并折射該波長(zhǎng)以下的光 ， 這種方式的濾片稱(chēng)為二向色性濾片 ( dichroic filter) 630 nm BandPass Filter White Light Source 光信號(hào)收集 光信號(hào)分離，導(dǎo)向，各探測(cè)通道PMT接收并轉(zhuǎn)化為電信號(hào)。 ? 檢測(cè)表面標(biāo)記物 ? 檢測(cè)胞漿標(biāo)記物 ? 檢測(cè)胞核內(nèi)標(biāo)記物 ? 檢測(cè)可溶性蛋白 流式細(xì)胞術(shù) （ FLOW CYTOMETRY） 流式細(xì)胞儀的基本結(jié)構(gòu) 流式細(xì)胞儀 顯微鏡 流動(dòng)的細(xì)胞 靜止的細(xì)胞樣本 數(shù)量大 數(shù)量少 高速分選 樣本難以再利用 細(xì)胞群體特征量分布 可以揭示細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)信息 特殊的顯微鏡 ? 高速測(cè)定細(xì)胞，大樣本計(jì)數(shù) ? 檢測(cè)稀有細(xì)胞 ? 多參數(shù)分析 ? 自動(dòng)化 ? 細(xì)胞分選 流式細(xì)胞儀的主要特點(diǎn) 二、流式細(xì)胞儀工作原理 流式細(xì)胞儀工作原理 流式細(xì)胞儀通常以激光作為激發(fā)光源，經(jīng)過(guò)聚焦整形后的光束垂直照射在樣品流上，被熒光染色的細(xì)胞在激光束的照射下產(chǎn)生散射光和激發(fā)熒光。流式細(xì)胞術(shù)原理和應(yīng)用 張 國(guó) 平 生物醫(yī)學(xué)研究院心血管研究中心 202264 主要內(nèi)容 ? 流式細(xì)胞儀概述 ? 流式細(xì)胞儀的工作原理 ? 流式細(xì)胞儀的應(yīng)用 ? 檢測(cè)的一般步驟 一、流式細(xì)胞儀概述 流式細(xì)胞儀種類(lèi) BD FACSVantage BDCalibur Epics Altra Epics Altra Beckman Coulter 流式細(xì)胞儀的定義 流式細(xì)胞儀是指，使細(xì)胞（或其他粒子）以單個(gè)方式依次高速通過(guò)激發(fā)光束，采集細(xì)胞被光照時(shí)產(chǎn)生的各種信號(hào)，對(duì)信號(hào)進(jìn)行處理，并對(duì)各參數(shù)進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析的一種儀器。 利用流式細(xì)胞儀通過(guò)檢測(cè)熒光信號(hào)來(lái)檢測(cè)細(xì)胞或其它顆粒性物質(zhì)（表面或胞漿或胞核）的物理、化學(xué)特性并通過(guò)這些特性對(duì)細(xì)胞或顆粒進(jìn)行定量。這兩種信號(hào)被光電二極管和光電倍增管接收，之后轉(zhuǎn)換為電信號(hào)，再通過(guò)模 /數(shù)轉(zhuǎn)換器，將連續(xù)的電信號(hào)轉(zhuǎn)換為可被計(jì)算機(jī)識(shí)別的數(shù)字信號(hào)，最后由計(jì)算機(jī)進(jìn)行計(jì)算處理。 二色鏡 1 2 3 帶通濾波片 光電倍增管 激光束 細(xì)胞 收集透鏡 前向散射光 側(cè)向散射光，熒光 數(shù)據(jù)處理
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