高中生物專題5課題1dna的粗提取與鑒定練習新人教版選修1-展示頁
2024-12-20 20:14本頁面
【正文】 度為 2 mol/L， 過濾可除去不溶的雜質 ， 木瓜蛋白酶能夠分解蛋白質；在沸水浴的條件下 ， DNA 遇二苯胺試劑會被染成藍色 ；如果實驗材料是植物細胞 ， 需要先用洗滌劑瓦解細胞膜。 DNA 鑒定選用的試劑為二苯胺試劑 ，加熱后 (沸水 浴 )產生藍色。 L－ 1 D． 5 mol L－ 1 B． mol 一、選擇題 1． 由于雞血沒有找到 ， 某同學嘗試用豬的血液來代替 ， 但結果沒有成功 ， 其最可能的原因是 (B) A． 操作方法不對 B．豬血含 DNA 過少 C． NaCl溶液濃度太高 D．加二苯胺過少 解析： 豬的血液中主要是紅細胞 ， 但豬的成熟紅細胞中無細胞核 ， 所以豬血細胞中 DNA 含量低。加入酒精和用玻璃棒攪拌時 ， 動作要輕緩 ， 以免 加劇 DNA分子的斷裂 ， 導致 DNA分子不能形成 絮狀沉淀 。 三、操作提示 (1)以血液為實驗材料時 ， 每 100 mL 血液中需要加入 3 g 檸檬酸 鈉 ， 防止 血液凝固 。兩支試管中其中一支加入 DNA絲狀物 ， 各加入二苯胺 4_mL。 5． DNA 的析出與鑒定 (1)DNA的析出： DNA 的析出用的是與濾液體積相等的、 冷卻 的 酒精 溶液。 (3)方案三：將濾液放在 60～ 75_℃ 的恒溫水浴箱中保溫 10～ 15 min， 注意嚴格控制溫度范圍 ， 使 蛋白質 沉淀析出而 DNA 分子還未變性 ， 可以將 DNA 與蛋白質分離。 3． 去除濾液中雜質 (1)方案一：通過控制 NaCl 溶液 的濃度去除 雜質 。 2． 破碎細胞 ， 獲取含 DNA 的濾液 動物細胞的破碎比較容易 ， 例如 ， 在雞血細胞液中加入一定量的 蒸餾水 ， 同時 用玻璃棒攪拌 ， 過濾后收集濾液即可。 2． DNA 的鑒定 在沸水浴的條件下 ， DNA遇 二苯胺 會被染成藍色。 ④ 大多數蛋白質不能忍受 60～ 80_℃ 的高溫而發(fā)生變 性 ， 而 DNA在 80_℃ 以上才會變性。 ② DNA 不溶于 酒精 ， 但是某些 蛋白質 則可溶于其中。 課題 1 DNA 的粗提取與鑒定 一、 DNA 的粗提取和鑒定 1． DNA 的粗提取 (1)基本思路：利用 DNA與 RNA、 蛋白質 和 脂質 等在物理和化學性質方面的 差異 ， 提取 DNA，去除其他成分。 (2)方法和原理： ① DNA 和 蛋白質 等其他成分在不同濃度的 NaCl 溶液中溶解度不同 ， 利用這一特點選擇適當的 鹽濃度 就能使 DNA 充分溶解 ， 而使 雜質 沉淀 ， 或者相反 ， 以達到分離目的。 ③ 蛋白酶 能水解 蛋白質，但是對 DNA 沒有影響。 ⑤ 洗滌劑 能瓦解細胞膜 ， 但對 DNA 無影響。 二、實驗設計 1． 選取實驗材料 選用 DNA 含量較高 的生物組織 ， 成功的可能性更大。如果是植物細胞 ， 需要先用 洗滌 劑 溶解 細胞膜 。 (2)方案二：直接向濾液中加 入 嫩肉粉 ， 反應 10～ 15 min， 嫩肉粉 中的 木瓜蛋白酶 能夠分解蛋白質。 4． DNA 的進一步提純 利用 DNA不溶于冷卻的 %酒精 這一原理 ， 可從 濾液 中析出較純凈的 DNA， 此時 DNA 的狀態(tài)為 白色絲狀物 。 (2)DNA鑒定：鑒定 DNA
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