【正文】 100．檢出分泌特異抗體細(xì)胞后，應(yīng)即時進(jìn)行克隆化篩選與鑒定，以免非必需細(xì)胞過分生長。98．體外法生產(chǎn)單克隆抗體是使雜交瘤細(xì)胞在人工反應(yīng)器內(nèi)大規(guī)模培養(yǎng)并表達(dá)相應(yīng)抗體。96．組織纖維溶酶原激活劑是一川絲氨酸蛋白酶。35．大多數(shù)植物原生質(zhì)培養(yǎng)1～3day，即再生新細(xì)胞壁。33．純化植物原生質(zhì)體的方法有離心法、飄浮法、界面法及滴洗法。31．～。29．。27．高等植物細(xì)胞壁主要成分為纖維素，其次為半纖維素，果膠質(zhì)及蛋白質(zhì)。73．兩種完整細(xì)胞融合時，95．微載體培養(yǎng)優(yōu)點(diǎn)在于兼有固定化培養(yǎng)與懸浮培養(yǎng)的雙重特點(diǎn)。50．細(xì)胞培養(yǎng)包括細(xì)胞及細(xì)胞團(tuán)塊單層培養(yǎng)及單細(xì)胞程謂之電場誘導(dǎo)融合作用。25．再培養(yǎng)法是檢查細(xì)胞活力的根本方法。23．對于木本植物冬芽凍存物需于00C慢速化凍。21．對于種子、花粉、球莖等高度脫水材料可以采用快速降溫的凍存。19．常用的凍凍保護(hù)劑有DMSO，甘油，PEG，葡萄糖、山梨糖及蔗糖。17．目前已建立植物細(xì)胞種質(zhì)保存法有：干燥保存法，液體石蠟覆蓋法，低溫保存法，低壓低氧保存法及超低溫深凍保存法。15．自離體植物細(xì)胞培養(yǎng)物中篩選細(xì)胞突變體的方法有直接選擇法，間接選擇法及綠島法。13．篩選植物突變細(xì)胞的目的在于獲得某些藥物高產(chǎn)細(xì)胞株或某些物質(zhì)轉(zhuǎn)化的高產(chǎn)酶細(xì)胞株。11．植物細(xì)胞培養(yǎng)物易發(fā)生自發(fā)突變，其突變頻率在107～106之間。9．看護(hù)培養(yǎng)法培養(yǎng)時間較微室培養(yǎng)長。7．植物細(xì)胞單細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)有平板培養(yǎng)法，微室培養(yǎng)法、看護(hù)培養(yǎng)法等。69．HGH是指人生長激素。67．微細(xì)胞不含有染色體DNA。攜帶有重組體分子的細(xì)胞中尋找新合成的蛋白質(zhì)。5．懸浮培養(yǎng)特點(diǎn)是培養(yǎng)過程中，細(xì)胞總數(shù)不斷增加，一定時間后產(chǎn)量達(dá)最高點(diǎn)，生長趨于停止。45．細(xì)菌的斜面基多采用碳源限量而氮源豐富的配方。43．一般情況下，干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)放線菌孢子形成。20．化學(xué)物質(zhì)來菌只適用于局部空間或某些器械消毒。65．對未知目的基因功能的表達(dá)產(chǎn)物的檢測方法是在18．水的主要生理功能是參與代謝反應(yīng)，作為反應(yīng)的價質(zhì)，提供氫、氧元素；參與物質(zhì)運(yùn)輸；傳遞熱量，調(diào)節(jié)體溫。自考現(xiàn)代生物制藥技術(shù)63．適當(dāng)?shù)膯幼?，只能保證目的基因的正確轉(zhuǎn)錄，而并不能保證基因的完全正確表達(dá)。61．基因的表達(dá)受到啟動子等調(diào)控元件的控制。59．閱讀框架是由起始密碼子決定的。57．大腸桿菌，酵母與哺乳動物細(xì)胞三大基因表達(dá)體系已成為當(dāng)前基因工程工業(yè)性生產(chǎn)的核心。55．真核生物轉(zhuǎn)錄成不均RNA之后，還需加工，如去掉內(nèi)含子，修飾，加工5，末端和3，末端。53．原核生物細(xì)胞沒有核膜，因此表達(dá)過程中的轉(zhuǎn)錄與翻譯往往同時進(jìn)行。51．目的基因重組克隆的篩選方法包括：根據(jù)重組體表型篩選，重組體結(jié)構(gòu)分析法，檢測目的基因法及檢測目的基因表達(dá)產(chǎn)的法。49．不帶β半糖苷酶活性蛋白的菌落中央也可出現(xiàn)淡藍(lán)色斑點(diǎn)。47．普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)可轉(zhuǎn)導(dǎo)宿主染色體上任何基因。45．大腸桿菌感受的制備方法包括Hanahan法，氯化鈣法及電轉(zhuǎn)化法。穩(wěn)定因素。物體體內(nèi)的某些細(xì)胞和某19．細(xì)菌裂爭可采用：非離些分子，它們既是機(jī)體對內(nèi)子型或離子型去污劑，有機(jī)外環(huán)境刺激應(yīng)答的效應(yīng)機(jī)溶劑，堿處理及加熱處理。的現(xiàn)象。88超誘導(dǎo)：是指細(xì)胞在某都是松馳型質(zhì)粒。：由TH2細(xì)胞產(chǎn)生，能抑制TH1細(xì)胞合成因子的能力，是一種糖蛋白。81白細(xì)胞介素：由白細(xì)胞或其它細(xì)胞產(chǎn)生的又在白細(xì)胞間起調(diào)節(jié)作用和介導(dǎo)作用的因子。79酶試劑盒；將酶、反應(yīng)試劑、穩(wěn)定劑、激活劑，填充劑、及緩沖劑等配成檢測用的混合制劑稱酶試劑盒。77酶比活：指每毫克酶蛋白所表現(xiàn)的活力。75偶聯(lián)效率：偶聯(lián)固定化反應(yīng)過程中載體結(jié)合蛋白質(zhì)的能力稱為偶聯(lián)效率。73載體結(jié)合法：將細(xì)胞懸浮液直接與水不溶性轂體相結(jié)合的固定化方法。44．關(guān)于感受態(tài)本質(zhì)的假說71固定比酶：限制或定位于特定空間位置的酶稱為固定化醇。42．連接反應(yīng)溫度應(yīng)介于催化反應(yīng)與末端粘合之間。40．TDT即末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶。15．分子量較小，不具自身傳遞性是松馳型質(zhì)粒的特點(diǎn)。13．嚴(yán)緊質(zhì)粒大多為具有自身傳遞能力的大質(zhì)粒。11．雄性大腸桿菌表面的性纖毛是一種接合質(zhì)粒形成的表面物質(zhì)。87集落刺激因子：CSF為一組糖蛋白物質(zhì)，由淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞自然產(chǎn)生，有刺激紅細(xì)胞系以外造血細(xì)胞增殖和分化的作用。85腫瘤壞死因子：是一種由巨噬細(xì)胞分泌能產(chǎn)生細(xì)胞素，使腫瘤細(xì)胞溶解的因子。69酶工程：應(yīng)用酶的特異性催化功能并通過工程化為人類生產(chǎn)有用產(chǎn)品及提供有益服備的技術(shù)為本酶工程。67雜合瘤：骨髓瘤細(xì)胞與免疫淋巴細(xì)胞融合制備的雜種細(xì)胞稱為雜合瘤。65營養(yǎng)互補(bǔ)選擇法：利用兩種親本細(xì)胞營養(yǎng)互補(bǔ)作用原理篩選雜種細(xì)胞的方法稱為營養(yǎng)互補(bǔ)選擇法。63抗藥性篩選系統(tǒng)：利用生物細(xì)胞對藥物敏感性差異篩選雜種細(xì)胞的方法。61胞質(zhì)體：不具有細(xì)胞核的細(xì)胞稱為胞質(zhì)體。59動物體細(xì)胞雜交技術(shù)：在外力作用下，令兩上或兩上以上異源細(xì)胞合并為一個多核細(xì)胞的過程，稱為動物體細(xì)胞雜交技術(shù)。57單細(xì)胞分離培養(yǎng)：動物組織分散后，將其單個細(xì)胞培養(yǎng)成純系細(xì)胞集群的技術(shù)，稱之為單胞分離培養(yǎng)。55細(xì)胞塊培養(yǎng)法：將動物組織切成直徑1～2mm小塊，進(jìn)行培養(yǎng)的方法，稱為組織塊培養(yǎng)法。53動物細(xì)胞工程：根據(jù)細(xì)胞生物學(xué)及工程學(xué)原理定向改造動物細(xì)胞遺傳性、創(chuàng)造新物種，通過工程化為人類提供名貴藥品服務(wù)的技術(shù)，稱為動物細(xì)胞工程。52半連續(xù)培養(yǎng)法：在反應(yīng)器中投料和接種，培養(yǎng)一段時間后，將培養(yǎng)液和新鮮培的理論、方法，按照人們設(shè)計(jì)的藍(lán)圖，改良加工生物或用生物及其制備物作為加工原料，以提供所需生物制品為人類社會服力的綜合性科學(xué)技術(shù)。第一篇：自考現(xiàn)代生物制藥技術(shù)自考現(xiàn)代生物制藥技術(shù)一、名詞概念二、知識點(diǎn)自考現(xiàn)代生物制藥技術(shù)吉林大學(xué)現(xiàn)代生物制藥技術(shù))一、名詞概念 ：應(yīng)用生物科學(xué)17微細(xì)胞：是某些細(xì)菌的突變株在生長期間產(chǎn)生的一類微小的圓形的無核細(xì)胞，它具細(xì)胞壁及細(xì)胞膜、DNA上，并引入受體細(xì)胞，從而可使受體細(xì)胞獲得外源基因的遺傳信息，并進(jìn)行正常的復(fù)制，表達(dá)和遺傳。細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)。，稱為半連續(xù)培養(yǎng)法。54動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)：在一定條件下，通過人工供給營養(yǎng)物質(zhì)及生長因子，使離體動物細(xì)胞或組織生長繁殖的方法，稱為動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。56細(xì)胞單層培養(yǎng)法：動物組織塊經(jīng)銷化分散成單個細(xì)胞或細(xì)胞團(tuán)塊后，粘附于培養(yǎng)容器表面培養(yǎng)成新生細(xì)胞單層的培養(yǎng)法，稱為細(xì)胞單層培養(yǎng)法。58確立細(xì)胞株：正常細(xì)胞在移植繼代過程中，有些細(xì)胞增殖力突增強(qiáng)，在特定條件下可無限繁殖，與初代細(xì)胞相比，其形態(tài)、生理生化特性，病毒敏感生，抗原性及染色體結(jié)構(gòu)均發(fā)生變化，具有致癌性，這些細(xì)胞稱為確立細(xì)胞株。60核體：細(xì)胞核連同其外表薄層細(xì)胞質(zhì)構(gòu)成的顆粒稱為核體。62微核雜種細(xì)胞：按完整細(xì)胞之間的融合方式，將微核與另一完整細(xì)胞融合，使后者獲得另一種細(xì)胞中的若干個染色體，所獲融合子稱為微核雜種細(xì)胞。64營養(yǎng)缺陷型細(xì)胞：在一些營養(yǎng)物質(zhì)的合成能力上出現(xiàn)缺陷，因此必須在基本培養(yǎng)基中加入相應(yīng)的有機(jī)成分才能正常生長的變異細(xì)胞。66雜交瘤技術(shù)：骨髓瘤細(xì)胞與免疫淋巴細(xì)胞融合制自考現(xiàn)代生物制藥技術(shù)備雜種細(xì)胞的方法為雜交瘤技術(shù)。68微載體培養(yǎng)法：將細(xì)胞吸附于微載體表面的培養(yǎng)方法。70酶：生物體內(nèi)具有特殊催化功能的蛋白質(zhì)稱為酶。86干擾素：是一類在同種細(xì)胞上具有廣譜抗病毒活性的蛋白質(zhì)，其活性的發(fā)揮又受細(xì)胞基因組的調(diào)節(jié)和控制，涉及RNA和蛋白質(zhì)的合成。質(zhì)粒。12．根據(jù)質(zhì)粒在細(xì)胞中拷貝數(shù)的不同，可把質(zhì)粒分為松馳型質(zhì)粒和嚴(yán)緊型質(zhì)粒。14．分子量較大，自身傳遞上嚴(yán)緊型質(zhì)粒的特點(diǎn)。16．基因工程中使用的質(zhì)粒39．大腸桿菌DNA連接酶只能催化DNA雙鏈的單鏈缺口和帶粘性末端的雙鏈DNA。41．DNA連接酶的最適溫度0是37C。43．根據(jù)受體系統(tǒng)不同，基因工程可分為微生物基因工程、動物基因工程和植物基因工程。72固定化細(xì)胞：被限制或定位于特定空間位置的細(xì)胞稱為固定化細(xì)胞。74包埋法：將細(xì)胞定位于凝膠網(wǎng)格內(nèi)的技術(shù)稱為包埋法。：806235356 76酶活力：醇類催化特定化學(xué)反應(yīng)的能力稱為酶活力。78固定化反應(yīng)的酶活力回收串：固定醇所顯示的活力與加入偶聯(lián)液中酶總活力的比值稱為固定化反應(yīng)的酶活力回收率。80細(xì)胞因子：是人類或動物的各類細(xì)胞分泌的具有多樣生物活性的因子，是可溶性物質(zhì)，是一組不均一的蛋白質(zhì)分子，能調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長與分化。：即白細(xì)胞介素3，由激活的T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生，能刺激多能造血干細(xì)胞和各系細(xì)胞的分化和增殖，促進(jìn)和維持肥大細(xì)胞的增殖，增殖中性粒細(xì)胞、酸性粒細(xì)胞的活性，促進(jìn)NX細(xì)胞殺傷實(shí)體瘤的活性。：是由B淋巴細(xì)胞分泌的一種細(xì)胞因子，分子量為75KD的糖蛋白，其主要作有得促進(jìn)PHA活化的PBMC增殖以及亞適劑量IL2協(xié)同促進(jìn)作用。種大分子合成抑制物的適17．松馳型質(zhì)?？杀宦让顾禺?dāng)作用，誘生蛋白合成增加擴(kuò)增。18．細(xì)菌收獲可通過離心進(jìn)89生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑：是生行。制，也是機(jī)體維持內(nèi)環(huán)境的20．。21．野生型λ噬菌體為雙鏈線形分子，具有12個堿基二、知識點(diǎn) 的粘性末端，進(jìn)入大腸桿菌包括局部原生質(zhì)體化假說及酶受體假說。46．局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)只能轉(zhuǎn)導(dǎo)宿主染色體上少數(shù)基因。48．β半乳糖基因插入失活法的重組質(zhì)粒產(chǎn)生白色菌落。50．動植物病毒也可作為外源基因的載體。52．原核生物中基因表達(dá)以操縱子形式進(jìn)行。54．原核生物的mRNA在翻譯完畢之后，隨即被水解掉。56．基因工程中基因表達(dá)的研究，是指外源基因在某一種細(xì)胞中的表達(dá)活動。58．基因表達(dá)合成功能蛋白的基本條件是依賴于基因的有效轉(zhuǎn)錄，mRNA正確的轉(zhuǎn)譯和轉(zhuǎn)譯后的加工。60．用于保證目的基因處于正確的閱讀框架中的方法有：選用適當(dāng)?shù)拿盖形稽c(diǎn)；用人工接頭調(diào)節(jié)閱讀框架；構(gòu)建一組適合不同閱讀框架的載體。62．基因的高效表達(dá)必須依賴一個強(qiáng)的啟動子。64．對已知功能的基因表達(dá)產(chǎn)物的檢測，可以采用蛋白質(zhì)電泳，免疫擴(kuò)散和凝集，酶聯(lián)免疫和放射免疫等方法。19．培養(yǎng)基中的生長因素的主要功能是作為酶的重要組成成分。21．用于輻射滅菌的射線有性營養(yǎng)環(huán)境不利于放線菌孢子形成。44．霉菌的孢子培養(yǎng)，一般以大米、小米、玉米、麥米、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。4．植物細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)法是懸浮、微室、平板、看護(hù)、懸滴及單花粉等多種培養(yǎng)方式。6．植物細(xì)胞接種濃度通常10～10細(xì)胞/毫升。66．應(yīng)用大細(xì)胞系統(tǒng)檢測基因表達(dá)時，主要是利用質(zhì)?；颚溯d體擴(kuò)增的途徑。70．HGH可以治療侏儒癥，促進(jìn)燒傷及骨折等創(chuàng)傷性組織的恢復(fù)。8．微室培養(yǎng)法的優(yōu)點(diǎn)是可直接觀察分裂繁殖及分化全過程，胞質(zhì)環(huán)流規(guī)律及線粒體生長與分裂活動，亦可進(jìn)行連續(xù)觀察原生質(zhì)體融合，細(xì)胞壁再生及融合后細(xì)胞分裂活動，同時可進(jìn)行顯微攝像。10．細(xì)胞突變的主要原因是染色體缺失、重復(fù)、倒位、異位、堿基順序轉(zhuǎn)換、顛換及移碼所引起。12．人工誘發(fā)植物細(xì)胞突變的化學(xué)因素主要有堿基類似物、烷化劑、抗生素等。14．篩選細(xì)胞突變體主要依據(jù)細(xì)胞表型變化。16．植物細(xì)胞培養(yǎng)物處于無組織無器官分化的分散狀態(tài)時許多重要基因并不表達(dá)。18．超低溫深凍保存法系將植物種質(zhì)于1960C的液氮中保存。20．為提高存活力，凍存材料應(yīng)選用抗寒力強(qiáng)的幼齡培養(yǎng)細(xì)胞。22．對于不耐寒植物細(xì)胞需采用慢速冰凍法。24．深凍細(xì)胞活力及存活率測定的方法有再培養(yǎng)法、二醋酸熒光素染色法及氯化自考現(xiàn)代生物制藥技術(shù)三笨四氮唑還原法。26．植物原生質(zhì)體制備的材49．以組織塊為材料的培養(yǎng)方法叫組織塊培養(yǎng)法。72．完整細(xì)胞間融合是擴(kuò)大生物變異的有效手段。95．動物細(xì)胞生長緩慢，又料應(yīng)用較多的是葉片，愈傷組織及懸浮培養(yǎng)細(xì)胞。28．植物原生質(zhì)體制備時的脫壁酶有纖維素酶，果膠酶，斗纖維素酶，蝸牛酶及崩潰酶。30．。32．。34．植物原生質(zhì)體活力測定方法有：根據(jù)形態(tài)特征判斷其活力，活體染色法及光染料活體染色法。36．大多數(shù)植物原生質(zhì)體通常在1～2周內(nèi)發(fā)生具有錨地依賴依。97．抗乙型肝炎表現(xiàn)抗原單克隆抗體是專一性識別HbsAg的單一抗體。99．體內(nèi)法生產(chǎn)克隆抗體是利用生物體為細(xì)胞反應(yīng)器大規(guī)模培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞生產(chǎn)抗體的方法。：806235356定的是IFNa。38．白介素2的生物學(xué)作用主要是刺激細(xì)胞增生。40．NK細(xì)胞對射線照射最為敏感。42．B細(xì)胞具有表面球蛋白，而T細(xì)胞、NK細(xì)胞，K細(xì)胞的表面則不具有表面球蛋白。45．具有生物活性的腫瘤壞死因子為三聚體構(gòu)型。47．細(xì)胞因子多為單鏈分子，其基因多由多個外顯子和內(nèi)含子組成，但其基因均為單拷貝。49．IL8可來源于單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、肺泡巨噬細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、T細(xì)胞等。51．IFNβ在成纖維細(xì)胞中誘生。53．TNF也可誘生IFN。55．EPO的主要來源為腎小管，腎間質(zhì)細(xì)胞。57．細(xì)胞因子研究發(fā)展前景包括細(xì)胞因子的加工改造，細(xì)胞因子的受體及其免疫調(diào)節(jié)的信息傳遞，細(xì)胞因子基因表達(dá)的調(diào)控，分子水平上了解在疾病治療中的作用以及作為有效的免疫佐自考現(xiàn)代生物制藥技術(shù)劑。59．干擾素對蛋白酶敏感。61．干擾素具有廣泛的抗病毒活性。63．IFN對免疫功能的調(diào)節(jié)作用包括增強(qiáng)巨噬細(xì)胞活力，使補(bǔ)體水平下降及延長同種移植物的排斥反應(yīng)。86．TNF具有抗腫瘤作用。88．TNF經(jīng)鑒定有兩類：TNFα，TNFβ。90．TNF與其它細(xì)胞因子，化療藥物聯(lián)合作用可以降低TNF劑量及副作用，提高療效。9．T4DNA連接酶的作用機(jī)制：（1）T4DNA連接酶與輔因子ATP形成酶AMP復(fù)合物；25mMTrisHCL(),10mM EDTA ）中劇烈振蕩；（4）加200μl親配制液溶液II（ NaOH1%SDS）,混合內(nèi)容物，不要振蕩，置冰上；（5）加150μl冰預(yù)冷溶液III（5M Kac60ml,），溫和振蕩10s置0于闊步35min；（6）4C。65．干擾素制劑大劑量使用的最佳途徑是批注，皮下注射。67．干擾素臨床應(yīng)用的適應(yīng)癥包括急性病毒性感染、慢性病毒性感、惡性腫瘤、器官移植患者、乙型腦炎等。69．白介素2的臨床應(yīng)用包括抗病毒感染、抗細(xì)菌感染、抗腫瘤及艾滋病的治療等。71．紅細(xì)胞生成素的臨床應(yīng)用包括慢性腎功能衰竭、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、癌性貧血、早產(chǎn)嬰兒自體輸血及用于外科手術(shù)的輔助治療等。73．糖基成份對細(xì)胞因子