乙肝六項(xiàng)操作及檢驗(yàn)結(jié)果的解釋-展示頁
2024-10-04 14:30本頁面
【正文】 育 20分鐘。 乙肝六項(xiàng)操作 HBCAblgM(捕獲法〕 ? 測(cè)定原理 ? 采用兔抗人 HbcAg IgM包被固相載體反響板，參加待測(cè)標(biāo)本，同時(shí)參加 HbcAgHRP，當(dāng)標(biāo)本中存在 HbcAb時(shí)，該 HbcAbIgM與包被HbcAg結(jié)合并與酶結(jié)合形成 HBcAgHbcAbHBcAgHRP復(fù)合物，參加 TMB底物產(chǎn)生顯色反響，反之那么無顯色反響。 ? 結(jié)果判斷與分析 ? 臨界值〔 .〕的計(jì)算： ? 臨界值＝陰性對(duì)照孔 OD值 N 〔未稀釋臨界值＝陰性對(duì)照孔 OD值 N 〕 ? 結(jié)果判定：樣品 OD值 S/=1者為 HBcAb陽性 ? 樣品 OD值 S/1者為 HBcAb陰性 ? 注意：加底物顯色，顯色的強(qiáng)弱與待測(cè)標(biāo)本中 HBCAb的含量成反比。 ? 終止：每孔加終止液 50 l，混勻。 ? 洗滌：用洗滌液充分洗滌 5次，洗滌完扣干〔每次應(yīng)保持 3060秒的浸泡時(shí)間〕。 ? 加酶：每孔參加酶標(biāo)記抗體 50 l，輕拍混勻。對(duì)照孔中參加陰、陽性對(duì)照血清各 50 l。 第八頁，共三十五頁。 第七頁，共三十五頁。 第六頁，共三十五頁。 終止：每孔加終止液 50 l，混勻。 洗滌：用洗滌液充分洗滌 5次，洗滌完扣干〔每次應(yīng)保持 3060秒的浸泡時(shí)間〕。 加酶：分別在每孔中參加酶標(biāo)記抗體 50 l，輕輕混勻。 ? 結(jié)果判定：樣品 OD值 S/=1者為HBsAg陽性 ? 樣品 OD值 S/1者為 HBsAg陰性 第五頁，共三十五頁。 第四頁，共三十五頁。 – ：每孔加終止液 50 l，混勻。 – 洗滌：用洗滌液充分洗滌 5次，洗滌完扣干〔每次應(yīng)保持 3060秒的浸泡時(shí)間〕。 – 加酶：不用洗滌，分別在每孔中參加酶標(biāo)記抗體 50 l，輕輕混勻。 乙肝六項(xiàng)操作 HBSAg (雙抗體夾心法 ) – 二 .HBSAg操作 – ：分別用加樣器在對(duì)照孔中參加陰、陽性對(duì)照血清各 75 l于相應(yīng)孔中。 ? ：將微孔條固定于支架，按序編號(hào)。 第二頁，共三十五頁。 乙肝六項(xiàng)的操作、本卷須知 及檢驗(yàn)結(jié)果的解釋 第一頁，共三十五頁。 乙肝六項(xiàng)操作 HBSAg (雙抗體夾心法〕 ? 原理 ? 在微孔條上預(yù)包被，被純化的乙肝外表抗體，配以酶標(biāo)記抗體〔 HBsAbHRP〕及TMB等其它試劑，采用夾心法原理檢測(cè)人血清〔或血漿〕中乙肝外表抗原〔 HBsAg〕。 乙肝六項(xiàng)操作 HBSAg (雙抗體夾心法〕 ? 操作步驟 ? 一 .準(zhǔn)備 ? ：將試劑盒各組分別取出，平衡至室溫〔 1825℃ 〕， ? ：濃縮洗滌液配制前充分搖勻〔如有晶體應(yīng)充分溶解〕， ? 濃縮洗滌液和蒸餾水或去離子水按 25倍稀釋后使用。 第三頁，共三十五頁。 – ：置 37℃ 溫育 60分鐘。 – 溫育：置 37℃ 溫育 30分鐘，室溫平衡 5分鐘。 – ：每孔參加底物 A、 B各 50 l，輕拍混勻，置 37℃ 暗處 30分鐘。 – 三 .HBSAg測(cè)定 – 用酶標(biāo)儀單波長 450nm或雙波長 450/630nm測(cè)定各孔 OD值〔用單波長測(cè)定時(shí)需設(shè)空白對(duì)照一孔， 30分鐘內(nèi)完成測(cè)定，并記錄結(jié)果〕。 乙肝六項(xiàng)操作 HBSAg (雙抗體夾心法 ) ? 結(jié)果判斷與分析 ? 臨界值〔 .〕的計(jì)算： Cutoff臨界值 =陰性對(duì)照孔 OD值 N ，陰性對(duì)照 OD均值大于 OD值計(jì)算，小于 以 。 乙肝六項(xiàng)操作 HBeAb檢測(cè)〔 ELISA)競(jìng)爭(zhēng)法 一 .試劑準(zhǔn)備同上 二 .HBeAb操作 加樣：分別用加樣器在對(duì)照孔中參加陰、陽性對(duì)照血清各 50 l于相應(yīng)孔中。 溫育：置 37℃ 溫育 30分鐘，室溫平衡 5分鐘。 顯色：每孔參加底物 A、 B各 50 l，輕拍混勻，置 37℃ 暗處
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