【正文】 抗 HBs和 HBsAg不同時存在，假設(shè)同時檢出，可能為抗 HBs產(chǎn)生的早期，或?qū)儆诓煌瑏喰偷?HBV感染，或由 HBV的 S基因變異所致。乙肝疫苗接種者，體內(nèi)血循環(huán)中除了抗 HBs外，不應(yīng)出現(xiàn)其它乙肝病毒感染血清免疫學(xué)標志物，如抗 HBe、抗 HBc等。 ? 血液里外表抗體能維持很長時間，直到老年期抗體水平才有所降低。檢查出抗 HBs陽性，疾病即已逐漸恢復(fù)。它可以和外表抗原特異地結(jié)合，然后在體內(nèi)與人體的其他免疫功能共同作用下，可以把病毒去除掉，保護人體不再受乙肝病毒的感染，故稱外表抗體為保護性抗體。 第二十頁，共六十二頁。急性重癥乙型肝炎，肝細胞中以合成 HBcAg為主，很少或不合成 HBsAg，從而使外周血中無 HBsAg。 第十九頁，共六十二頁。 乙肝五項的各項簡述 ? 1． HBsAg 血清中檢出 HBsAg是乙型肝炎的早期診斷指標之一，出現(xiàn)于患者血清轉(zhuǎn)氨酶 (ALT)升高前 2— 8周，至恢復(fù)期 HBsAg滴度逐步降低乃至消失，抗 HBs出現(xiàn)。 32種可能組合 第十七頁，共六十二頁。 第十五頁，共六十二頁。 ? 滴加試劑時，應(yīng)先搖勻，并棄去 1~2滴，垂直滴加。 ? 試劑從包裝中取出后，應(yīng)盡快進行實驗，防止放置于空氣中過長時間，導(dǎo)致受潮。 ? 實驗環(huán)境應(yīng)保持一定溫度，避風(fēng)。 質(zhì)量控制 ? 應(yīng)防止樣品溶血。 第十三頁，共六十二頁。 ? 等待紫紅色條帶的出現(xiàn)，測試結(jié)果應(yīng)在 15分鐘內(nèi)讀取。 操作步驟 ? 試劑盒先恢復(fù)室溫，從原包裝鋁箔袋中取出試劑盒，在 1小時內(nèi)盡快地使用。 固相膜特點 ? 多孔性 毛細管作用 ? 非共價鍵高度吸附 高度敏感性 抗原或抗體 易于漂洗 操作簡便 第十一頁，共六十二頁。 第九頁，共六十二頁。 ? 對電解質(zhì)敏感，對試驗有影響。 ? 由一個根底金核及包圍在外的離子層構(gòu)成。 免疫層析快速檢測常用的結(jié)合物 ? 膠體金 ? 乳膠顆粒 第八頁，共六十二頁。 ? 缺乏之處 ? 敏感度略低，價格略高〔與 ELISA比〕 ? 不易制備定量、半定量試劑 ? 質(zhì)量控制困難 第六頁，共六十二頁。 第四頁，共六十二頁。 ? 歷史： 放射免疫測定 1960 酶免疫測定 1970 熒光免疫測定 19801990 化學(xué)發(fā)光免疫測定 1990 膜固相免疫測定 1990 第三頁，共六十二頁。乙肝五項、梅毒螺旋體抗體的檢測及應(yīng)用 孕前優(yōu)生健康檢查臨床檢驗操作技術(shù)培訓(xùn) ? 河南省人口和方案生育科學(xué)技術(shù)研究院 第一頁，共六十二頁。 免疫層析快速檢測技術(shù) 第二頁，共六十二頁。 原理 ? 將特異的抗原〔或抗體〕先固定于固相膜的某一區(qū)帶，當(dāng)該枯燥的固相膜一端浸入樣品后，由于毛細管作用，樣品將沿著該膜向前移動，當(dāng)移動至固定有經(jīng)過標記的抗體區(qū)域時，樣品中相應(yīng)的抗原即與該標記抗體發(fā)生特異性結(jié)合，抗原抗體復(fù)合物移動到特定區(qū)域被捕獲，使該區(qū)域顯示一定的顏色，從而實現(xiàn)特異性的免疫診斷。 ? 特點： ? 快速 ? 簡便 ? 可單份檢測 ? 穩(wěn)定性好 ? 檢測種類多 ? 可測定物質(zhì)范圍廣 第五頁，共六十二頁。 免疫層析快速檢測試劑結(jié)構(gòu)圖 第七頁，共六十二頁。 膠體金 ? 也稱金溶膠，是由金鹽復(fù)原形成的金顆粒懸液。呈球形〔小顆粒〕或橢圓形〔大顆?！?。 ? 呈色性：膠體金的光散射性與溶膠顆粒的大小密切相關(guān)，一旦顆粒大小發(fā)生變化，光散射也隨之發(fā)生變異，產(chǎn)生肉眼可見的顯著的顏色變化。 固相膜種類 ? 玻璃纖維素膜 尼龍膜 ? 聚偏氟乙稀膜 硝酸纖維素膜 ? 固相 NC膜 第十頁，共六十二頁。 免疫層析快速檢測技術(shù)分類 ? 雙抗體夾心法測抗原 ? 間接法測抗體 ? 雙抗原夾心法測抗體 ? 競爭法測抗體 第十二頁，共六十二頁。 ? 將試劑盒置于干凈平坦的臺面上，用塑料吸管垂直滴加 3滴〔 100微升〕無氣泡的血清 /血漿于試劑盒的加樣孔內(nèi)。 20分鐘后判斷無效。 結(jié)果判斷 夾心法 結(jié)果判斷 競爭法 結(jié)果判斷 第十四頁，共六十二頁。溶血、粘稠及高脂標本可能會導(dǎo)致檢測結(jié)果不穩(wěn)定。防止在過高溫度下進行實驗。 ? 試劑假設(shè)為室溫應(yīng)注意防潮；假設(shè)低溫下保存