【正文】
第二十二頁,共五十一頁。 目的基因的脫氧核苷酸序列是未知的, 可以從基因文庫中找到目的基因〔酶切〕。 1 2 3 4 5 22 55 72 94 時間( min) 溫度 ( ℃ ) PCR反響 適溫延伸 3 高溫變性 1 低溫退火 2 重復(fù) 1~3步 25~30輪 目的 DNA片段 擴(kuò)增 100萬倍以上 DNA雙螺旋 DNA單鏈 與引物復(fù)性 DNA變性 形成2條單鏈 子鏈延伸 DNA加倍 第十九頁,共五十一頁。 人工合成 (基因比較小 ) DNA合成儀 第十七頁,共五十一頁。 篩選含有目的基因的受體細(xì)胞 獲得目的基因 形成重組 DNA分子 將 重組 DNA分子 導(dǎo)入受體細(xì)胞 目的基因的表達(dá) 第十五頁,共五十一頁。 最常用的基因載體是細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)的 (核區(qū)) 質(zhì)粒(細(xì)胞質(zhì) DNA) 大腸桿菌 無影響 只能 第十三頁,共五十一頁。 第十一頁,共五十一頁。 ?具有標(biāo)記基因,便于進(jìn)行篩選。 ?能夠在宿主細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定地保存。 ──DNA連接酶 第九頁,共五十一頁。 T G C A A C G T 5′ 3′ 3′ 5′ A C G T 5′ 3′ G C A T 3′ 5′ 另一種限制酶 第八頁,共五十一頁。 限制酶 第六頁,共五十一頁。 已發(fā)現(xiàn)數(shù)千種 ── 限制性核酸內(nèi)切酶 第五頁,共五十一頁。進(jìn)行基因操作最少需要以下三種工具: 第四頁,共五十一頁。 剪切拼接導(dǎo)入 甲 生物 取出所需基因 生物 新類型 表達(dá) 乙 生物 第三頁,共五十一頁。 第二頁,共五十一頁。但繁殖慢,產(chǎn)量低。第一頁,共五十一頁。 家蠶能夠吐出蠶絲為人類利用。 大腸桿菌繁殖很快,但不會產(chǎn)絲。 ? 用人工方法,把甲生物的某個基因提取出來,在體外進(jìn)行切割、拼接和重組,然后將其導(dǎo)入乙生物的細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行大量復(fù)制,并進(jìn)行表達(dá),從而定向地改變乙生物的遺傳性狀,或獲得人類所需要的基因產(chǎn)物〔蛋白質(zhì)、多肽、酶〕。 基因的大小以納米計算,要對它進(jìn)行剪切、拼接等操作,沒有非常精細(xì)的工具是不行的。 主要在 中。 例如:大腸桿菌的一種限制酶能識別序列,并在 之間切開。 G A A T T C C T T A A G 5′ 5′ 3′ 3′ 粘性末端 粘性末端 限制性內(nèi)切酶 C T T A A G