13第十三章基因工程與基因組學(xué)-展示頁(yè)
2025-01-20 03:55本頁(yè)面
【正文】 片段（分） 限制性?xún)?nèi)切酶切割外源 DNA片段與載體（切） 外源 DNA片段與載體連接（接） 重組 DNA分子轉(zhuǎn)入宿主細(xì)胞（轉(zhuǎn)） 重組子的篩選與鑒定（篩） 目的基因的確認(rèn)與分析 三、基因工程的流程及相關(guān)技術(shù) （一）外源 DNA片段的分離方法 1. 構(gòu)建基因組文庫(kù)分離法 2. 差別顯示反轉(zhuǎn)錄 PCR 3. 利用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)擴(kuò)增目的基因 用克隆載體將某種生物的基因組全部遺傳信息儲(chǔ)存于一個(gè)受體菌的群體，即構(gòu)成了這種生物的基因組文庫(kù)。 ③載體上的限制酶酶切位點(diǎn)對(duì)于任何一種限制酶來(lái)說(shuō)只能有一個(gè)。 ? 細(xì)菌人工染色體（ BAC）、酵母菌人工染色體（ YAC）和人類(lèi)人工染色體（ HAC） λ 噬菌體載體 YAC（ 1Mb） 載體的基本條件 ①有獨(dú)立的復(fù)制原點(diǎn) (ori)，能獨(dú)立地自我復(fù)制，而且能帶動(dòng)外源 DNA一起復(fù)制。 ? 常用的載體有細(xì)菌質(zhì)粒、噬菌體、病毒等。coli DNA 連接酶 T4 DNA連接酶 載體 (vector) ?將外源 DNA片段運(yùn)送進(jìn)宿主細(xì)胞 (host cell)進(jìn)行擴(kuò)增或表達(dá)的運(yùn)載工具稱(chēng)為載體。 Eco R Ⅰ 屬名 種名 菌株名 序號(hào) （一）限制性核酸內(nèi)切酶 常見(jiàn)內(nèi)切酶 （二） DNA連接酶 ? 連接 5’－磷酸和 3’－ OH，形成磷酸二酯鍵，封閉 DNA雙鏈上的缺刻。 ?基因工程（ gene engineering）： 利用人工的方法把生物的遺傳物質(zhì)在體外進(jìn)行切割、拼接和重組，獲得重組 DNA分子，然后導(dǎo)入宿主細(xì)胞或個(gè)體，使受體的遺傳特性得到修飾或改變的過(guò)程。第十三章 基因工程與基因組學(xué)概述 廊坊師范學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院 遺傳學(xué)教研室 第一節(jié) 基因工程 一、 基因工程概述 二、 基因工程工具酶 三、基因工程的流程及相關(guān)技術(shù) 四、基因工程的發(fā)展應(yīng)用 一、 基因工程概述 ?遺傳工程（ geic engineering）， 也稱(chēng)生物工程，利用工程技術(shù)的方法改造和修飾生物體，使其產(chǎn)生新的性狀或產(chǎn)品，從而改良生物體的一種遺傳學(xué)手段。 ?核心是利用重組 DNA
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