13第十三章基因工程與基因組學(xué)-文庫(kù)吧在線文庫(kù)
【正文】 電穿孔轉(zhuǎn)化法 DNA轉(zhuǎn)入真核細(xì)胞 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 重組 DNA 感受態(tài) 細(xì)胞 冰浴 混合、靜置 42186。 ? 細(xì)菌人工染色體（ BAC）、酵母菌人工染色體（ YAC）和人類人工染色體（ HAC） λ 噬菌體載體 YAC（ 1Mb） 載體的基本條件 ①有獨(dú)立的復(fù)制原點(diǎn) (ori)，能獨(dú)立地自我復(fù)制，而且能帶動(dòng)外源 DNA一起復(fù)制。 ?基因工程（ gene engineering）： 利用人工的方法把生物的遺傳物質(zhì)在體外進(jìn)行切割、拼接和重組，獲得重組 DNA分子，然后導(dǎo)入宿主細(xì)胞或個(gè)體，使受體的遺傳特性得到修飾或改變的過程。 如： E ④具有一個(gè)選擇標(biāo)記基因。 一、 基因組學(xué)概念及范疇 基因組學(xué) (genomics) 就是發(fā)展和應(yīng)用 DNA制圖、測(cè)序新技術(shù)以及計(jì)算機(jī)程序，分析生命體（包括人類）全部基因組結(jié)構(gòu)及功能。 4.、序列圖 序列圖是指整個(gè)人類基因組的核苷酸序列圖，也是最詳盡的物理圖，既包括可轉(zhuǎn)錄序列，也包括非轉(zhuǎn)錄序列，是轉(zhuǎn)錄序列、調(diào)節(jié)序列和功能未知序列的總和。 三、后基因組學(xué) （ postgenomics) 完成一個(gè)生物體全部基因組測(cè)序后即進(jìn)入功能基因組學(xué)階段，也稱 后基因組階段 —— 詳盡分析序列，描述基因組所有基因的功能，包括研究基因的表達(dá)及其調(diào)控模式。中國(guó)是繼美、英、日、德、法之后第 6個(gè)國(guó)際人類基因組計(jì)劃參與者，也是參與這一計(jì)劃的唯一發(fā)展中國(guó)家。它具有兩個(gè)基本特征，即可遺傳性和可識(shí)別性，因此生物的任何有差異表型的基因突變型均可作為遺傳標(biāo)記。 保存、篩選 差別顯示分析基本流程 PCR（ DDRTPCR） 利用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)擴(kuò)增目的基因 （ 1）套式 PCR （ 2）反向 PCR （ 3）不對(duì)稱 PCR （ 4）錨定 PCR （ 5）長(zhǎng)程 PCR （ 6）反轉(zhuǎn)錄 PCR 人工合成基因 ? 根據(jù)已知的基因序列 ， 或根據(jù)氨基酸序列推測(cè) DNA序列 ? 將化學(xué)合成寡核苷酸的方法與酶促合成DNA的方法結(jié)合起來 ， 可以很快地人工合成基因 。經(jīng)改造的黏粒 (cosmid)、噬粒 (phagemid) ? 都要經(jīng)過人工改造。
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