基因表達和基因重組-展示頁
2025-01-13 17:44本頁面
【正文】 G CCTAG GATCC G + Bam HⅠ 作用 與甲基化酶共同構(gòu)成細菌的限制修飾系統(tǒng) ， 限制外源 DNA， 保護自身 DNA。羥基末端磷酸化，或標記探針 末端轉(zhuǎn)移酶 在 3180。末端 Klenow片段 又名 DNA聚合酶 I大片段，具有完整 DNA聚合酶 I的 5??3?聚合、 3??5?外切活性，而無 5??3?外切活性。磷酸基和 3180。 生物技術(shù)工程 : 基因工程、蛋白質(zhì)工程、酶工程、細胞工程等 目的 ① 分離獲得某一感興趣的基因或 DNA ② 獲得感興趣基因的表達產(chǎn)物（蛋白質(zhì)） 基因工程 (geic engineering) —— 實現(xiàn)基因克隆所用的方法及相關(guān)的工作稱基因工程，又稱 重組 DNA工藝學 。 獲取同一拷貝的過程稱為 克隆化 (cloning)，即 無性繁殖 。 （三）轉(zhuǎn)導作用 當病毒從被感染的 （ 供體 ） 細胞釋放出來 、 再次感染另一 （ 供體 ） 細胞時 ， 發(fā)生在供體細胞與受體細胞之間的 DNA轉(zhuǎn)移及基因重組即為轉(zhuǎn)導作用(transduction)。 可接合質(zhì)粒如 F 因子 (F factor) 質(zhì)粒 —— 細菌染色體外的小型環(huán)狀雙鏈 DNA分子 （二）轉(zhuǎn)化作用 通過自動獲取或人為地供給外源 DNA， 使細胞或培養(yǎng)的受體細胞獲得新的遺傳表型 ， 稱為轉(zhuǎn)化作用 (transformation)。 是最基本的 DNA重組方式 ， 通過鏈的斷裂和再連接 ， 在兩個 DNA分子同源序列間進行單鏈或雙鏈片段的交換 。 基因重組和基因工程 Geic Rebination and Geic Engineering 第 十 四 章 基因重組 ： 不同的 DNA分子間發(fā)生共價連接形成重組 DNA 分子。 重組 DNA 質(zhì)粒 DNA 基因片段 重組 DNA技術(shù)發(fā)展史 pSC101 EcoRI Boyer 和 Cohen的實驗 和pR65 大腸桿菌 pSC101 pR65 抗四環(huán)素 抗卡那霉素 EcoRI 抗卡那霉素基因 DNA連接酶 重組 DNA分子 培養(yǎng)平皿 四環(huán)素平板 卡那霉素基因 四環(huán)素 \卡那霉素基因 大腸桿菌 人體生長激素釋放激素 (SS) 抑制和調(diào)節(jié)多種激素的作用 從動物腦中提取 : 5mg50萬只羊腦 基因工程 9升大腸桿菌 培養(yǎng)液 SS基因 基因載體 重組體 分 切 接 轉(zhuǎn) 篩 表 SS 第 一 節(jié) DNA的重組 DNA Rebination DNA重組 接合作用 (conjugation) 轉(zhuǎn)化作用 (transformation) 轉(zhuǎn)導作用 (transduction) 轉(zhuǎn) 座 (transposition) 同源重組 (homologous rebination) 位點特異的重組 (sitespecific rebination) 發(fā) 生 在 同 源 序 列 間 的 重 組 稱 為 同 源 重 組(homologous rebination)， 又稱基本重組 。 一、同源重組 二、細菌的基因轉(zhuǎn)移與重組 （一）接合作用 當細胞與細胞 、 或細菌通過菌毛相互接觸時 ， 質(zhì)粒 DNA從一個細胞 （ 細菌 ） 轉(zhuǎn)移至另一細胞 （ 細菌 ） 的 DNA轉(zhuǎn)移稱為接合作用(conjugation)。 例：溶菌時，裂解的 DNA片段被另一細菌攝取。 λ噬菌體的生活史 溶菌生長途徑 (lysis pathway) 溶源菌生長途徑 (lysogenic pathway) 例 第 二 節(jié) 重組 DNA技術(shù) DNA Rebination Technique ? 相關(guān)概念 ? DNA克隆 ? 工具酶 ? 目的基因 ? 基因載體
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