dna分子標(biāo)記用于中藥鑒定-展示頁
2025-01-07 05:09本頁面
【正文】 發(fā)展起來的體外核酸擴(kuò)增技術(shù)，是一種模擬自然 DNA 復(fù)制過程的體外酶促合成特異性核酸片段技術(shù) 。 DNA 分子是兩性電解質(zhì)， 在高于其等電點(diǎn)的溶液（ ~ ） 中 ，堿基幾乎不解離，磷酸基團(tuán)全部解離， DNA 分子帶負(fù)電荷，在電場中向正極移動? ? DNA 分子在電場中通過介質(zhì)而泳動，除電荷效應(yīng)外，凝膠介質(zhì)還有分子篩效應(yīng)， 使分子大小和構(gòu)象不同的 DNA 分子遷移率出現(xiàn)較大差異，從而達(dá)到分離目的。 二、瓊脂糖凝膠電泳技術(shù) ? 瓊脂糖凝膠電泳是分離、純化、鑒定 DNA 片段的常用方法，具有簡便、快速的優(yōu)點(diǎn)。? DNA 的質(zhì)量將直接關(guān)系到實(shí)驗(yàn)的成敗。 ? 對于幼嫩器官的材料（鮮品或硅膠快速干燥樣品），一般方法都可以得到質(zhì)量符合要求的 DNA 。? 從植物藥材中提取 DNA 一般可分為兩個(gè)階段 :? 第一階段是植物細(xì)胞破裂后釋放出 DNA 。 一、 DNA提取技術(shù) ? DNA 的提取是現(xiàn)代生物技術(shù)進(jìn)行中藥鑒別的最關(guān)鍵步驟。因此，我們能夠選擇適當(dāng)?shù)? DNA 分子遺傳標(biāo)記，在屬、種、亞種、居群或個(gè)體水平上對研究對象進(jìn)行準(zhǔn)確地鑒別?；蚪M DNA 的這些不同區(qū)域在生物進(jìn)化過程中所受到的選擇壓力不同，前者所受選擇壓力大，表現(xiàn)出高度保守，后者所受選擇壓力小，表現(xiàn)出較大的變異。DNA 分子是由 G 、 A 、 C 、 T 四種堿基構(gòu)成，生物體特定的遺傳信息便包含在特定的堿基排列順序中，這就是生物的遺傳多樣(geic diversity)。? 學(xué)科發(fā)展的需要以及分子生物學(xué)技術(shù)的飛速發(fā)展使 DNA 分子遺傳標(biāo)記（ DNA molecular geic marker ）鑒別生藥應(yīng)運(yùn)而生 。DNA分子標(biāo)記鑒定分子標(biāo)記鑒定分子生藥學(xué) molecular pharmacognosy? 在分子水平上研究生藥的鑒定、生產(chǎn)和成分的一門科學(xué)，所依據(jù)的主要是生藥學(xué)和分子生物學(xué)的理論和方法，是生藥學(xué)的一個(gè)極富前瞻性和前景性的分支。分子生藥學(xué)研究內(nèi)容研究內(nèi)容鑒定方面 生產(chǎn)方面 獲取有效成分方面DNA分子標(biāo)記鑒別 藥材培育選種 轉(zhuǎn)基因器官培養(yǎng)技術(shù)DNA分子遺傳標(biāo)記? 以形態(tài)學(xué)為主的生藥鑒定方法 (性狀鑒別、顯微鑒別 )和理化鑒別，還不能解決所有生藥的真實(shí)性鑒定問題，特別是對同屬多來源生藥及種內(nèi)的一些變異 ( 道地藥材 ) 、動物藥等難以專屬性地鑒定。道地藥材? 道地藥材的形成是基因型與環(huán)境之間相互作用的產(chǎn)物，可用公式表示：? 表現(xiàn)型 phenotype=基因型 genotype+環(huán)境飾變（environmental modification）? 生藥 DNA 分子遺傳標(biāo)記鑒定是指通過比較生藥間 DNA 分子遺傳多樣性差異來鑒別生藥基源，確定其學(xué)名的方法。在 DNA 分子上，有編碼與物種存活密切相關(guān)的基因區(qū)域、編碼與物種存活不十分密切相關(guān)的基因區(qū)域和非編碼基因區(qū)域。? 正是由于這種 DNA 分子不同區(qū)域承受的選擇壓力不同，使得 DNA 分子的不同區(qū)域有不同程度的遺傳多樣性。? 下面對生藥 DNA 分子遺傳標(biāo)記鑒定的相關(guān)技術(shù)和方法作一簡單介紹。? 總 DNA 的有效提取要求材料中的 DNA 盡可能少的降解。? 第二階段是 DNA 與其它細(xì)胞組分如蛋白質(zhì)、碳水化合物、膜和細(xì)胞壁相分離，在這個(gè)階段，重要的是要保證大量的 DNA 不能混雜在細(xì)胞碎片中， DNA 要與蛋白質(zhì)和其它污染物完全分離，因?yàn)檫@些污染物的存在會干擾下一步的分析。? 但對于中藥材，情況則要復(fù)雜得多，需要針對具體材料，設(shè)計(jì)去除含酚羥基的化合物和多糖類化合物的方法。? 一般而言，所得的 DNA 應(yīng)完整、有足夠的量，電泳檢查時(shí)可給出精確
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