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正文內(nèi)容

植物原生質(zhì)體培養(yǎng)和細(xì)胞融合-展示頁

2024-08-31 03:07本頁面
  

【正文】 ● 沉淀物重新懸浮于清洗培養(yǎng)基中,在 50g離心35min后再懸浮,如此反復(fù)洗滌 23次。 第一節(jié) 植物原 生質(zhì)體培養(yǎng) 一 、 設(shè)備與工具 除了需要組織培養(yǎng)的設(shè)備和工具之外 , 還需要一些用具 。第十章 植物 原生質(zhì)體培養(yǎng)和細(xì)胞融合 原生質(zhì)體融合 植物原 生質(zhì)體培養(yǎng) 主要內(nèi)容 原生質(zhì)體( protoplast): 是去除細(xì)胞壁的裸露植物細(xì)胞。 原生質(zhì)體培養(yǎng)再生植株技術(shù)是細(xì)胞融合( cell fusion) 和體細(xì)胞雜交( somatic cell hybridization) 基礎(chǔ)。 倒置顯微鏡 熒光顯微鏡 反照相設(shè)備 普通顯微鏡: 原生質(zhì)體或細(xì)胞培養(yǎng)密度 ( 采用血球計(jì)數(shù)板 ) 倒置顯微鏡: 觀察培養(yǎng)皿 、 培養(yǎng)瓶或滴瓶中的培養(yǎng)物 熒光顯微鏡: 檢查原生質(zhì)體活性及去壁情況 細(xì)菌過濾器 ?m的濾膜可以濾去細(xì)菌和病毒 ( 1) 可用抽濾瓶接真空泵抽濾滅菌 ( 2) 可用注射器推壓過濾滅菌 離心機(jī) 提純?cè)|(zhì)體 500r/min離心 35min 制備酶液用 2500r/min離心 10min 二、 化學(xué)試劑 無機(jī)化學(xué)試劑: 分析純 有機(jī)化學(xué)試劑: ● 維生素: 組織培養(yǎng)常用的維生素以外還需泛酸鈣,葉酸, VA, VC, VD, 生物素,氯化膽堿,對(duì)甲基苯甲酸 ● 激素: 生長素和細(xì)胞分裂素的適當(dāng)搭配 ● 滲透壓穩(wěn)定劑: 糖醇系統(tǒng)( 甘露醇,山梨醇,葡萄糖,蔗糖) ● 碳源和氮源: C源: 葡萄糖和蔗糖 ; N源: 水解酪蛋白,谷氨酰胺,甘氨酸, Arg, Asp 凝膠劑: 瓊脂粉、瓊脂糖、日本的 Gelloan Gum 三、 酶類 纖維素酶: 日本的 Cellulase onzuka R–10 Cellulase onzuka Rs 美國 Cellulysin 果膠酶: 日本的 Pectolyase Y23 Macerozyme 美國 Pectinase 四、原生質(zhì)體的分離與純化 外植體的選擇
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