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第二章-發(fā)酵液的預(yù)處理-展示頁(yè)

2024-08-31 00:47本頁(yè)面
  

【正文】 雙電層的形成及作用 發(fā)酵液中的菌體、細(xì)胞或蛋白質(zhì)等膠體粒子的表面,由于吸附溶液中的離子和自身基團(tuán)的電離,一般都帶有電荷。 絮凝 是指在某些高分子絮凝劑存在下,基于橋架作用,將膠體粒子交聯(lián)成網(wǎng),形成 l0mm大小絮凝團(tuán)的過程。 凝聚和絮凝是兩種方法,兩個(gè)概念。 第二節(jié) 發(fā)酵液預(yù)處理的方法 一、凝聚與絮凝方法 采用凝聚和絮凝技術(shù)能有效改變細(xì)胞、細(xì)胞碎片及溶解大分子物質(zhì)的分散狀態(tài),破壞其穩(wěn)定性,使其聚結(jié)成較大的可分離的顆粒,以提高過濾速率,便于分離;同時(shí),還能有效地除去雜蛋白質(zhì)和固體雜質(zhì),提高濾液質(zhì)量。 ( 2)固體懸浮物的去除 采用過濾方法,獲得澄清液 ( 3)蛋白質(zhì)的去除:可溶性蛋白 ( 4)重金屬離子的去除 ( 5)色素、毒性物質(zhì)、熱原質(zhì)等有機(jī)雜質(zhì)的去除 ( 6)改變發(fā)酵液的性質(zhì),以利于提取和精制后續(xù)工序操作的順利進(jìn)行 ( 7)調(diào)節(jié)適宜的 pH和溫度 發(fā)酵液預(yù)處理 的方法有三類:提高過濾速度的方法、改變發(fā)酵液性質(zhì)的方法、雜質(zhì)去除的方法。 胞外產(chǎn)物,預(yù)處理時(shí)應(yīng)盡可能使產(chǎn)物轉(zhuǎn)移到液相,然后用固液分離除去固相。 發(fā)酵液預(yù)處理的要求 預(yù)處理要滿足以下要求,才能達(dá)到目的。 ( 4)發(fā)酵液中有代謝產(chǎn)物及性質(zhì)相似的副產(chǎn)物 ( 5)發(fā)酵液中還含有色素、毒性物質(zhì)、熱原質(zhì)等有機(jī)雜質(zhì),導(dǎo)致其 性質(zhì)不穩(wěn)定,隨時(shí)間變化。 ( 2)發(fā)酵液中的 懸浮固形物主要是菌體和蛋白的膠狀物,其顆粒小, 帶電荷,可形成穩(wěn)定的膠體溶液; 相對(duì)密度與液相相差不大;固體粒子可壓縮性大;液相粘度大,大多為非牛頓型流體。 一、發(fā)酵液的一般特征 發(fā)酵液的組成 ( 1)大部分是水; ( 2)細(xì)胞或碎片; ( 3)少量未用完的培養(yǎng)基; ( 4)一定量的代謝產(chǎn)物及副產(chǎn)物。第二章 發(fā)酵液的預(yù)處理 第一節(jié) 概述 第二節(jié) 發(fā)酵液預(yù)處理的方法 第三節(jié) 發(fā)酵液的固液分離及設(shè)備 基本要求: 了解發(fā)酵液的特性和固液分離及設(shè)備,掌握發(fā)酵液預(yù)處理的方法。 重點(diǎn): 降低液體粘度的方法;凝聚與絮凝;發(fā)酵液中高價(jià)無機(jī)離子的除去;雜蛋白的除去。 第一節(jié) 概述 發(fā)酵液的特性 ( 1) 發(fā)酵產(chǎn)物濃度較低,大多為 1%~10%;大部分為水,一般為 90%~99%。 ( 3)發(fā)酵液中含有培養(yǎng)基成分,對(duì)后續(xù)操作產(chǎn)生一點(diǎn)影響。(空氣氧化、微生物污染、蛋白酶水解) 二、發(fā)酵液預(yù)處理的目的和要求 發(fā)酵液預(yù)處理的目的 ( 1)改變發(fā)酵液的物理性質(zhì),促進(jìn)從懸浮液中分離固形物的速度,提高固液分離器的效率; ( 2)盡可能使產(chǎn)物轉(zhuǎn)入便于后續(xù)工序處理的某一相中(多數(shù)是液相); ( 3)去除發(fā)酵液中部分雜質(zhì),以利于后續(xù)各步操作。 ( 1)菌體分離 采用離心和過濾方法。 胞內(nèi)產(chǎn)物,則應(yīng)先收集菌體或細(xì)胞,經(jīng)細(xì)胞破碎后,使產(chǎn)物轉(zhuǎn)移到液相,再用固液分離除去細(xì)胞碎片。 具體方法有凝聚與絮凝方法、加熱法、加水稀釋法、調(diào)節(jié) pH法、加入助濾劑法、加入反應(yīng)劑法、 加吸附劑法或加鹽法、高價(jià)無機(jī)離子去除的方法、可溶性雜蛋白去除的方法、色素及其他雜質(zhì)去除的方法等。 工業(yè)最常用方法之一。 凝聚 是向膠體懸浮液中加入某種電解質(zhì),在電解質(zhì)的異電離子作用下,由于膠體粒子之間雙電層電排斥作用降低,電位下降,使膠體體系不穩(wěn)定(脫穩(wěn)),膠體粒子間因相互碰撞而聚集成 1mm大小塊狀凝聚體的過程。 凝聚 ( 1)凝聚機(jī)理 (原理) 凝聚劑的作用有些是對(duì)初始粒子表面電荷的簡(jiǎn)單中和;另一些是消除雙電荷層(采用中性鹽例如 NaCl等)而脫穩(wěn);還有一些是通過氫鍵或其他復(fù)雜的形式與粒子相結(jié)合而產(chǎn)生凝聚。 在生理 pH值下,菌體或蛋白質(zhì)常常帶有負(fù)電荷,由于靜電引力的作用,使溶液中帶相反電荷的陽(yáng)離子被吸附在其周圍,在界面上形成雙電層。雙電層的電位越高,電排斥作用越強(qiáng),膠體粒子的分散程度也就越大,發(fā)酵液過濾就越困難。 反離子的價(jià)數(shù)越高, 凝聚值就越小,即凝聚能力越強(qiáng)。 金屬氧化物類 :如氫氧化鋁、氫氧化鐵、氫氧化鈣或石灰等。 絮凝 ( 1)機(jī)理:絮凝劑主要起架橋作用,即一個(gè)高分子聚合物(絮
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