固定化酶和固定化細胞-展示頁
2024-08-26 12:03本頁面
【正文】 固定化酶（細胞）的制備方法 酶和細胞固定化方法 載體結(jié)合法 交聯(lián)法 包埋法 網(wǎng)格型 微囊型 物理吸附法 離子結(jié)合法 共價結(jié)合法 熱處理（細胞） Company Logo Company Logo 吸附法 ?通過載體表面和酶分子表面間的次級鍵相互作用而達到固定目的的方法，是固定化中最簡單的方法。在應(yīng)用過程中，所選載體應(yīng)不和底物、產(chǎn)物或反應(yīng)液發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。 Company Logo ?（ 4）固定化酶應(yīng)有最小的空間位阻。 ?（ 3）固定化應(yīng)有利于自動化、機械化操作。 ?（ 2）酶與載體必須有 一定 的結(jié)合程度。 發(fā)展現(xiàn)狀 Company Logo 固定化酶的優(yōu)點 ?同一批固定化酶能在工藝流程中重復(fù)多次地使用； ?固定化后，和反應(yīng)物分開，有利于控制生產(chǎn)過程，同時也省去了熱處理使酶失活的步驟； ?穩(wěn)定性顯著提高； ?可長期使用，并可預(yù)測衰變的速度； ?提供了研究酶動力學(xué)的良好模型。 ?1986年，利用固定化原生質(zhì)體發(fā)酵生產(chǎn)堿性磷酸酶和葡萄糖氧化酶等相繼獲得成功。Company LOGO 固定化酶和固定化細胞 Company Logo 固定化酶的定義 ?所謂固定化酶 (immobilized enzyme)，是指在一定的空間范圍內(nèi)起催化作用，并能反復(fù)和連續(xù)使用的酶。 Company Logo ?1916年， Nelson和 Griffin發(fā)現(xiàn)酶的固定化現(xiàn)象； ?1969年，千畑一郎等將固定化氨基?；笐?yīng)用于生產(chǎn) L氨基酸，開創(chuàng)了固定化酶應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)的先例； ?1971年召開的第一屆國際酶工程會議上，建議采用統(tǒng)一的英文名稱 Immobilized Enzyme； ?1973年，固定化大腸桿菌菌體中的天冬氨酸酶連續(xù)生產(chǎn) L天冬氨酸。 酶固定化技術(shù)發(fā)展史 Company Logo ?從目前的發(fā)展?fàn)顩r來看，盡管酶種類繁多， 但已經(jīng)固定化的酶卻相對有限，采用固定化酶技術(shù)大規(guī)模生產(chǎn)的企業(yè)尚屬少數(shù)，真正在工業(yè)上使用的固定化酶還僅限于葡萄糖異構(gòu)酶、葡萄糖氧化酶和青霉素?；傅葹閿?shù)不多的十幾個酶種，故仍需大力研究開發(fā)使更多的固定化酶和細胞能適用于工業(yè)規(guī)模生產(chǎn)。 Company Logo 固定化酶的制備原則 ?（ 1）必須注意維持酶的構(gòu)象，特別是活性中心的構(gòu)象。酶的固定化既不影響酶的原有構(gòu)象，又能使固定化酶能有效回收貯藏，利于反復(fù)使用。這要求用于固定化的載體必須有一定的 機械強度 ，才能使之在制備過程中不易破壞或受損。 ?（ 5）固定化酶應(yīng)有最大的穩(wěn)定性。 ?（ 6）固定化酶的成本適中。 ?吸附法又可分為物理吸附法和離子吸附法。包括 范德華力、疏水相互作用、氫鍵。 物理吸附法 Company Logo ?離子吸附法 (ion adsorption)是通過離子鍵使酶與含有離子交換基團的水不溶性載體相結(jié)合的固定化方法。 離子吸附法 Company Logo ?離子吸附法常用的載體： ?陰離子交換劑： DEAE纖維素、四乙氨基乙基(TEAE)纖維素等； ?陽離子交換劑有羧甲基 (CM)纖維素、纖
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