第七章可見(jiàn)分光光度法-展示頁(yè)
2025-08-10 12:47本頁(yè)面
【正文】 Aa??15 2． 吸光系數(shù)兩種表示法： 1） 摩爾吸光系數(shù) ?： 在一定 λ下 ， c=1mol/L， b=1cm時(shí)的吸光度 2） 百分含量吸光系數(shù) / 比吸光系數(shù) a： 在一定 λ下 ， c=1g/100mL， b=1cm時(shí)的吸光度 3） 兩者關(guān)系 3．吸收光譜（吸收曲線）： λ~A %1110 cmaM ???最大吸收 最小吸收 特征值 → 定性依據(jù) 肩峰 16 4． 吸光度測(cè)量的條件選擇： 1） 測(cè)量波長(zhǎng)的選擇 : 樣參調(diào)節(jié)光路光學(xué)性質(zhì)和厚度相同樣品池樣品溶液，參比池空白溶液樣品池參比池配制樣品的溶劑空白溶液ATA??? ???????? ????????? ???%1000? 注：采用空白對(duì)比消除因溶劑和容器的吸收、光的散射和界面反射等因素對(duì)透光率的干擾 下測(cè)定須在較小的左右測(cè)定靈敏度高m a xm a xm a xm a x??????????cbAAA選 A=~ 2） 吸光度讀數(shù)范圍的選擇： 3） 參比溶液 (空白溶液 )的選擇： 17 三、偏離 Beer定律的因素 ?依據(jù) Beer定律， A與 C關(guān)系應(yīng)為經(jīng)過(guò)原點(diǎn)的直線 ?偏離 Beer定律的主要因素表現(xiàn)為以下兩個(gè)方面 ?（ 一 ） 光學(xué)因素 ?（二）化學(xué)因素 cbA ??? ??18 （一）光學(xué)因素 1． 非單色光的影響： ? Beer定律應(yīng)用的重要前提 —— 入射光為單色光 ?照射物質(zhì)的光經(jīng)單色器分光后并非真正單色光 ?其波長(zhǎng)寬度由入射狹縫的寬度和棱鏡或光柵的分辨率決定 ?為了保證透過(guò)光對(duì)檢測(cè)器的響應(yīng) ， 必須保證一定的狹縫寬度 ?這就使分離出來(lái)的光具一定的譜帶寬度 19 21020121IIII和為對(duì)應(yīng)的透過(guò)光光強(qiáng)分別和入射光光強(qiáng)分別為的光組成和設(shè)入射光由波長(zhǎng)為 ??cbIIcbIITA ????????????? ?? 10lglg00?02010201020102010201211212110101010IIIIIIIIIIIITbcbcbcbc?????????????????）（又??????0201020111210lglg IIIIbcTAbc???????? ? ）（ ???20 ?討論： 入射光的譜帶寬度嚴(yán)重影響吸光系數(shù)和吸收光譜形狀 ?結(jié)論： ? 選擇較純單色光（ Δλ↓ ，單色性 ↑ ） ? 選 λ max作為測(cè)定波長(zhǎng)（ Δ ?↓ ， S↑ 且成線性） 偏離線性關(guān)系越嚴(yán)重與）（定律不成線性關(guān)系，偏離與成線性關(guān)系CAB e e rCAbcA????????1221121???????21 2．雜散光的影響： ?雜散光是指從單色器分出的光不在入射光譜帶寬度范圍內(nèi) ， 與所選波長(zhǎng)相距較遠(yuǎn) ?雜散光來(lái)源：儀器本身缺陷；光學(xué)元件污染造成 ?雜散光可使吸收光譜變形 ， 吸光度變值 3． 反射光和散色光的影響： ?反射光和散色光均是入射光譜帶寬度內(nèi)的光 直接對(duì) T產(chǎn)生影響 ?散射和反射使 T↓ ， A↑ ， 吸收光譜變形 注：一般可用空白對(duì)比校正消除 4． 非平行光的影響： ?使光程 ↑ ， A↑ ， 吸收光譜變形 22 （二）化學(xué)因素 ? Beer定律適用的另一個(gè)前提：稀溶液 ?濃度過(guò)高會(huì)使 C與 A關(guān)系偏離定律 23 四、透光率的測(cè)量誤差 —— ΔT ?影響測(cè)定結(jié)果的相對(duì)誤差兩個(gè)因素： T和 ΔT ?ΔT影響因素：儀器噪音 1）暗噪音 2）訊號(hào)噪音 TbbAccbTAlg1lg??????????? ???TTTCClg????濃度的相對(duì)誤差24 1） 暗噪音 —— 與檢測(cè)器和放大電路不確切性有 關(guān)與光訊號(hào)無(wú)關(guān) 0)lg( )()( 2 ?? ???? ? TT TTTT TdTd對(duì)應(yīng)最小的測(cè)量誤差，????? % TT%%1~%????TT今假設(shè)大多數(shù)分光光度計(jì)的適宜測(cè)量范圍~%20~%65：：AT 測(cè)定結(jié)果相對(duì)誤差較小?25 2）訊號(hào)噪音 —— 與光訊號(hào)有關(guān) 表明測(cè)量誤差較小的范圍
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