動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)及無(wú)血清培養(yǎng)研究進(jìn)展-展示頁(yè)
2025-07-31 10:01本頁(yè)面
【正文】 生命科學(xué)研究和基因工程藥物開(kāi)發(fā)的需要，第三代化學(xué)組分限定培養(yǎng)基也已被開(kāi)發(fā)出來(lái)，并在市場(chǎng)上獲得了很好地效果。由于這類培養(yǎng)基含有大量動(dòng)物來(lái)源蛋白和不明的添加成分，許多廠商基于生物藥物安全和藥品開(kāi)發(fā)報(bào)批考慮，致力于開(kāi)發(fā)第二代無(wú)血清培養(yǎng)基。自從第一次使用無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)獲得成功之后，至今無(wú)血清培養(yǎng)基的研制與應(yīng)用大約經(jīng)歷了三個(gè)不同的階段。21 世紀(jì)后，隨著生命科學(xué)研究的不斷深入和生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)快速發(fā)展，細(xì)胞有血清培養(yǎng)表現(xiàn)出嚴(yán)重的不足，因而動(dòng)物細(xì)胞的無(wú)血清培養(yǎng)技術(shù)日益引起同行專家的高度關(guān)注。1976 年，Sato等發(fā)現(xiàn) GH3細(xì)胞株能在添加了少量生長(zhǎng)因子的無(wú)血清培養(yǎng)基中維持生長(zhǎng)。任何血清使用前必須經(jīng)過(guò)鑒定，只有無(wú)菌、無(wú)內(nèi)毒素、無(wú)溶血或低溶血、蛋白質(zhì)以及營(yíng)養(yǎng)素達(dá)到一定標(biāo)準(zhǔn)以上的血清才能使用。傳代培養(yǎng)過(guò)程中有個(gè)別細(xì)胞傳至50代以后，由于遺傳物質(zhì)改變，失去接觸抑制，成為無(wú)限增殖的癌細(xì)胞形成的細(xì)胞群，叫細(xì)胞系。原代培養(yǎng)的細(xì)胞由于接觸抑制不再分裂，還要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理后，再分瓶培養(yǎng)，讓細(xì)胞繼續(xù)增殖，這種培養(yǎng)叫傳代培養(yǎng)。用此種方式培養(yǎng)的細(xì)胞也具有較強(qiáng)的抗污能力，細(xì)胞生長(zhǎng)較為集中，生長(zhǎng)密度也高。固定化培養(yǎng)屬于包埋培養(yǎng)方式，目前已有的固定化培養(yǎng)方式包括微載體培養(yǎng)、中空纖維培養(yǎng)以及微囊發(fā)培養(yǎng)三種方式。盡管，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)當(dāng)中存在著各式各樣的困難，科研人員還是會(huì)不斷提高分子生物學(xué)的研究水平，擴(kuò)大研究范圍，因?yàn)閯?dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是多個(gè)學(xué)科研究領(lǐng)域當(dāng)中重要的工具。2）懸浮培養(yǎng)：懸浮適應(yīng)細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞等非貼壁依賴性細(xì)胞不需要生長(zhǎng)的支撐面，細(xì)胞可懸浮于液體培養(yǎng)基，并大量增殖。1）貼壁培養(yǎng)：對(duì)于那些具有貼壁依賴性的細(xì)胞一般使用貼壁培養(yǎng)的方式。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)主要用的是合成培養(yǎng)基。天然培養(yǎng)基是從動(dòng)物體液或組織中分離提取獲得的。4）緩沖環(huán)境：緩沖環(huán)境的作用是為細(xì)胞提供一個(gè)酸堿度在培養(yǎng)細(xì)胞生理范圍內(nèi)的培養(yǎng)液，提供水分和無(wú)機(jī)鹽，維持細(xì)胞的正常代謝。2）氣體：氣體主要是O2 和CO2，O2 可以給細(xì)胞提供能量，而CO2 不僅是細(xì)胞增殖所需的物質(zhì)，也是其自身的代謝產(chǎn)物，此外，CO2 還有著調(diào)節(jié)培養(yǎng)基pH 的作用。1）無(wú)菌無(wú)毒：無(wú)菌無(wú)毒的操作環(huán)境是保證動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)成功的前提。原代培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)到一定時(shí)候后，由于受群體環(huán)境影響，需要轉(zhuǎn)移到另一個(gè)容器，這種培養(yǎng)稱為傳代培養(yǎng)。從體內(nèi)取出的細(xì)胞進(jìn)行的首次培養(yǎng)式細(xì)胞培養(yǎng)最初的階段，也稱為原代培養(yǎng)。培養(yǎng)方式有貼壁、懸浮以及固定化培養(yǎng)等方式。因此本文對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)及大規(guī)模培養(yǎng)、無(wú)血清培養(yǎng)做一些總結(jié)。近年來(lái)生命科學(xué)迅速發(fā)展，各種在分子水平的實(shí)驗(yàn)如核移植、細(xì)胞雜交、DNA介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移等，都是借助細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)而得以實(shí)現(xiàn)的。關(guān)鍵詞：動(dòng)物細(xì)胞；細(xì)胞培養(yǎng)；無(wú)血清培養(yǎng)基1 引言組織培養(yǎng)技術(shù)創(chuàng)建于18世紀(jì)末，之后于1907 年美國(guó)生物學(xué)家Harrison在無(wú)菌條件下，以淋巴液為培養(yǎng)基在試管中培養(yǎng)蛙胚神經(jīng)組織宣告成功后，才逐漸發(fā)展成為一種從機(jī)體獲取細(xì)胞，模擬體內(nèi)生存環(huán)境，在無(wú)菌、適當(dāng)溫度及酸堿度和一定營(yíng)養(yǎng)條件下，使其生長(zhǎng)繁殖并維持結(jié)構(gòu)和功能的實(shí)
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