【正文】 璃懸鉤，以便將點樣后的色譜濾紙掛在鉤上；并除去溶劑槽和支架。（1）展開容器 通常為屬形或長方形玻璃缸，缸上具有磨口玻璃蓋，應(yīng)能密閉，用于下行法時，蓋上有孔，可插入分液漏斗，用以加入展開劑。用作藥品鑒別時，供試品在色譜圖中所顯主斑點的位置與顏色（或熒光），應(yīng)與對照品在色譜圖中所顯主斑點相同。供試品經(jīng)展開后，可用比移值（Rf）表示其各組成成分的位置（比移值=原點中心至斑點中心的距離／原點中心至展開劑前沿的距離）。柱色譜法還可分部收集流出液后用適宜方法測定。采用紙色譜法、薄層色譜法或柱色譜法分離有色物質(zhì)時，可根據(jù)其色帶進行區(qū)分；分離無色物質(zhì)時，可在短波（254nm）或長波（365nm）紫外光燈下檢視，其中紙色譜或薄層色譜也可噴以顯色劑使之顯色，或在薄層色譜中用加有熒光物質(zhì)的薄層硅膠，采用熒光猝滅法檢視。分離時的溫度，除氣相色譜法或另有規(guī)定外，系指在室溫操作。色譜法又可根據(jù)分離方法分為：紙色譜法、薄層色譜法、柱色譜法、氣相色譜法、高效液相色譜法等。離子交換色譜法是利用被分離物質(zhì)在離子交換樹脂上交換能力的不同使組分分離；常用的樹脂有不同強度的陽離子交換樹脂、陰離子交換樹脂，流動相為水或含有機溶劑的緩沖液。吸附色譜法是利用被分離物質(zhì)在吸附劑上吸附能力的不同，用溶劑或氣體洗脫使組分分離；常用的吸附劑有氧化鋁、硅膠、聚酰胺等有吸附活性的物質(zhì)。照上述標準曲線法操作，設(shè)對照品溶液的讀數(shù)為a，供試品溶液的讀數(shù)為b， b值應(yīng)小于（a－b）。此法僅適用于第一法標準曲線呈線性并通過原點的情況。按上述標準曲線法自“將儀器按規(guī)定啟動后”操作，測定吸光度，記錄讀數(shù)；將吸光度讀數(shù)與相應(yīng)的待測元素加入量作圖，延長此直線至與含量軸的延長線相交，此交點與原點間的距離即相當于供試品溶液取用量中待測元素的含量（如圖）。按各品種項下的規(guī)定制備供試品溶液，使待測元素的估計濃度在標準曲線濃度范圍內(nèi)，測定吸光度，取3次讀數(shù)的平均值，從標準曲線上查得相應(yīng)的濃度，計算元素的含量。將儀器按規(guī)定啟動后，依次測定空白對照溶液和各濃度對照品溶液的吸光度，記錄讀數(shù)。具體方法應(yīng)按各品種項下的規(guī)定選用。儀器某些工作條件（如波長、狹縫、原子化條件等）的變化可影響靈敏度、穩(wěn)定程度和干擾情況。常用的背景校正法有連續(xù)光源（在紫外光區(qū)通常用氘燈）、塞曼效應(yīng)、自吸效應(yīng)等。背景吸收通常來源于樣品中的共存組分及其在原子化過程中形成的次生分子或原子的熱發(fā)射、光吸收和光散射等。 由檢測器、信號處理器和指示記錄器組成，應(yīng)具有較高的靈敏度和較好的穩(wěn)定性，并能及時跟蹤吸收信號的急速變化。其功能是將供試品溶液中的汞離子還原成游離汞，再由載氣將汞蒸氣導入石英原子吸收池，進行測定。其功能是將待測元素在酸性介質(zhì)中還原成低沸點、易受熱分解的氫化物，再由載氣導入由石英管、加熱器等組成的原子吸收池，在吸收池中氫化物被加熱分解，并形成基態(tài)原子。一般以石墨作為發(fā)熱體，爐中通入保護氣，以防氧化并能輸送試樣蒸氣。 由電熱石墨爐及電源等部件組成。燃燒火焰由不同種類的氣體混合物產(chǎn)生，常用乙炔空氣火焰。（1）火焰原子化器 由霧化器及燃燒燈頭等主要部件組成。 常用待測元素作為陰極的空心陰極燈。原子吸收分光光度法遵循分光光度法的吸收定律，一般通過比較對照品溶液和供試品溶液的吸光度，求得供試品中待測元素的含量。因此，進行光譜比對時，應(yīng)考慮各種因素可能造成的影響。鑒別時，％；（4）待測成分的晶型有變化，輔料也存在干擾，此種情況一般不宜采用紅外光譜鑒別。同一化合物的圖譜若在不同卷上均有收載時，則以后卷所載的圖譜為準。、異構(gòu)體限度檢查或含量測定 供試品制備和具體測定方法均按各品種項下有關(guān)規(guī)定操作。提取的樣品再經(jīng)適當干燥后依法進行紅外光譜鑒別。 品種鑒別項下應(yīng)明確規(guī)定制劑的前處理方法，通常采用溶劑提取法。如已規(guī)定特定的藥用晶型，則應(yīng)采用相應(yīng)晶型的對照品依法比對。當供試品的實測光譜與《藥品紅外光譜集》所收載的標準光譜不一致時，在排除各種可能影響光譜的外在或人為因素后，應(yīng)按該藥品光譜圖中備注的方法或各品種項下規(guī)定的方法進行預處理，再繪制光譜，比對。具體操作技術(shù)參見《藥品紅外光譜集》的說明。儀器的標稱分辨率，除另有規(guī)定外，應(yīng)不低于2cm1。1cm1。傅里葉變換紅外光譜儀在3000cm1附近的波數(shù)誤差應(yīng)不大于177。附錄Ⅴ C 紅外分光光度法儀器及其校正可使用傅里葉變換紅外光譜儀或色散型紅外分光光度計。在規(guī)定的波長處測定對照品和供試品溶液的吸光度后，按上述（1）法計算供試品濃度。用比色法測定時，由于顯色時影響顯色深淺的因素較多，應(yīng)取供試品與對照品或標準品同時操作。計算分光光度法一般不宜用作含量測定。（3）計算分光光度法 計算分光光度法有多種，使用時應(yīng)按各品種項下規(guī)定的方法進行。（2）吸收系數(shù)法 按各品種項下的方法配制供試品溶液，在規(guī)定的波長處測定其吸光度，再以該品種在規(guī)定條件下的吸收系數(shù)計算含量。（1）對照品比較法 按各品種項下的方法，分別配制供試品溶液和對照品溶液，對照品溶液中所含被測成分的量應(yīng)為供試品溶液中被測成分規(guī)定量的100％177。 分別按各品種項下規(guī)定的方法進行。由于吸收池和溶劑本身可能有空白吸收，因此測定供試品的吸光度后應(yīng)減去空白讀數(shù)，或由儀器自動扣除空白讀數(shù)后再計算含量。一般供試品溶液的吸光度讀數(shù)，～。除另有規(guī)定外，吸收峰波長應(yīng)在該品種項下規(guī)定的波長177。測定法測定時，除另有規(guī)定外，應(yīng)以配制供試品溶液的同批溶劑為空白對照，采用l cm的石英吸收池，在規(guī)定的吸收峰波長177。因此，在測定供試品前，應(yīng)先檢查所用的溶劑在供試品所用的波長附近是否符合要求，即將溶劑置1cm石英吸收池中，以空氣為空白（即空白光路中不置任何物質(zhì)）測定其吸光度。例如甲醇、乙醇的截止使用波長為205nm。試劑濃度/%(g/ml)測定用波長/nm透光率/%碘化鈉220＜亞硝酸鈉340＜對溶劑的要求含有雜原子的有機溶劑時，通常均均有很強的末端吸收。取在120℃干燥至恒重的基準重鉻酸鉀約60mg，精密稱定，在規(guī)定的波長處測定并計算其吸收系數(shù)，并與規(guī)定的吸收系數(shù)比較，應(yīng)符合表中的規(guī)定。2nm。儀器波長的允許誤差為：紫外光區(qū)177。附錄Ⅴ A紫外可見分光光度法儀器的校正和檢定 由于環(huán)境因素對機械部分的影響，儀器的波長經(jīng)常會略有變動、因此除應(yīng)定期對所用的儀器進行全面校正檢定外，還應(yīng)于測定前校正測定波長。當已知某純物質(zhì)在一定條件下的吸收系數(shù)后，可用同樣條件將該供試品配成溶液，測定其吸光度，即可由上式計算出供試品中該物質(zhì)的含量。單色光輻射穿過被測物質(zhì)溶液時，在一定的濃度范圍內(nèi)被該物質(zhì)吸收的量與該物質(zhì)的濃度和液層的厚度（光路長度）成正比，其關(guān)系如下式： A=lg =Ecl式中 A為吸光度； T為透光率；E為吸收系數(shù)，采用的表示方法是，其物理意義為當溶液濃度為1% （g/ml），液層厚度為1cm時的吸光度數(shù)值；c為100ml溶液中所含被測物質(zhì)的重量（按干燥品或無水物計算），g； l為液層厚度，cm。所用儀器為紫外分光光度計、可見分光光度計（或比色計）、紅外分光光度計或原子吸收分光光度計。附錄Ⅴ 分光光度法分光光度法是通過測定被測物質(zhì)在特定波長處或一定波長范圍內(nèi)的吸光度或發(fā)光強度，對該物質(zhì)進行定性和定量分析的方法。常用的波長范圍為：（1） 200～400nm的紫外光區(qū)；（2）400～760nm的可見光區(qū)；（3） 760～2500nm的近紅外光區(qū)；（4）～25μm（按波數(shù)計為4000～ 400cm1）的中紅外光區(qū)。為保證測量的精密度和準確度，所用儀器應(yīng)按照國家計量檢定規(guī)程或本附錄規(guī)定，定期進行校正檢定。物質(zhì)對光的選擇性吸收波長，以及相應(yīng)的吸收系數(shù)是該物質(zhì)的物理常數(shù)。在可見光區(qū)，除某些物質(zhì)對光有吸收外，很多物質(zhì)本身并沒有吸收，但可在一定條件下加入顯色試劑或經(jīng)過處理使其顯色后再測定，故又稱比色分析。 ，546. ；；， 處有尖銳吸收峰，也可作波長校正用，但因來源不同或隨著時間的推移會有微小的變化，使用時應(yīng)注意；近年來，常使用高氯酸鈥溶液校正雙光束儀器，以10%高氯酸溶液為溶劑，配制含氧化鈥(Ho2O3) 4％的溶液，416．28nm。1nm, 500附近177。 可用重鉻酸鉀的硫酸溶液檢定。波長/nm235（最小）257（最大）313（最?。?50（最大）吸收系數(shù)（）的規(guī)定值吸收系數(shù)（）的許可范圍～～～～ 可按下表所列的試劑盒濃度，配制成水溶液，置1cm石英吸收池中，在規(guī)定的波長處測定透光率，應(yīng)符合表中的規(guī)定。因此，當作溶劑使用時，它們的使用范圍均不能小于截止使用波長。另外，當溶劑不純時，也可能增加干擾吸收。溶劑和吸收池的吸光度，在220～，在241～，在251～。2nm以內(nèi)測試幾個點的吸光度，或由儀器在規(guī)定波長附近自動掃描測定，以核對供試品的吸收峰波長位置是否正確。2nm以內(nèi)，并以吸光度最大的波長作為測定波長。儀器的狹縫波帶寬度宜小于供試品吸收帶的半高寬度的十分之一，否則測得的吸光度會偏低；狹縫寬度的選擇，應(yīng)以減小狹縫寬度時供試品的吸光度不再增大為準。當溶液的pH值對測定結(jié)果有影響時，應(yīng)將供試品溶液的pH值和對照品溶液的pH值調(diào)成一致。 一般有以下幾種方法。10％，所用溶劑也應(yīng)完全一致，在規(guī)定的波長處測定供試品溶液和對照品溶液的吸光度后，按下式計算供試品中被測溶液的濃度：CX＝（AX/AR）CR式中 CX為供試品溶液的濃度； AX為供試品溶液的吸光度； CR為對照品溶液的濃度； AR為對照品溶液的吸光度。用本法測定時，吸收系數(shù)通常應(yīng)大于100，并注意儀器的校正和檢定。當吸光度處在吸收曲線的陡然上升或下降的部位測定時，波長的微小變化可能對測定結(jié)果造成顯著影響，故對照品和供試品的測試條件應(yīng)盡可能一致。（4）比色法 供試品本身在紫外可見光區(qū)沒有強吸收，或在紫外光區(qū)里有吸收但為了避免干擾或提高靈敏度，可加入適當?shù)娘@色劑，使反應(yīng)產(chǎn)物的最大吸收移至可見光區(qū)，這種測定方法稱為比色法。除另有規(guī)定外，比色法所用的空白系指用同體積的溶劑代替對照品或供試品溶液，然后依次加入等量的相應(yīng)試劑，并用同樣方法處理。當吸光度和濃度關(guān)系不呈良好線性時，應(yīng)取數(shù)份梯度量的對照品溶液，用溶劑補充至同一體積，顯色后測定各份溶液的吸光度，然后以吸光度與相應(yīng)的濃度繪制標準曲線，再根據(jù)供試品的吸光度在標準曲線上查得其相應(yīng)的濃度，并求出其含量。用聚苯乙烯薄膜（厚度約為0. 04mm）校正儀器，繪制其光譜圖，用3027cm1，2851cm1， 1601cm1，1028cm1，907cm1處的吸收峰對儀器的波數(shù)進行校正。5cm1，在1000cm1附近的波數(shù)誤差應(yīng)不大于177。用聚苯乙烯薄膜校正時，儀器的分辨率要求在3110～2850cm1范圍內(nèi)應(yīng)能清晰地分辨出7個峰，峰2851cm1與谷2870cm1之間的分辨深度不小于18%透光率，峰1583 cm1與谷1589cm1之間的分辨深度不小于12％透光率。供試品的制備及測定 除另有規(guī)定外，應(yīng)按照國家藥典委員會編訂的《藥品紅外光譜集》各卷收載的各光譜圖所規(guī)定的方法制備樣品。采用固體制樣技術(shù)時，最常碰到的問題是多晶現(xiàn)象，固體樣品的晶型不同，其紅外光譜往往也會產(chǎn)生差異。如未規(guī)定該品種供藥用的晶型或預處理方法，則可使用對照品，并采用適當?shù)娜軇┰嚻放c對照品在相同的條件下同時進行重結(jié)晶，然后依法繪制光譜，比對。當采用固體制樣技術(shù)不能滿足鑒別需要時，可改用溶液法繪制光譜后比對。提取時應(yīng)選擇適宜的溶劑，以盡可能減少輔料的干擾，并力求避免導致可能的晶型轉(zhuǎn)變。 不能采用全光譜比對，可借鑒【注意事項】“2（3）”的方法，選擇主要成分的若干個特征譜帶，用于組成相對穩(wěn)定的多組分原料藥的鑒別?！咀⒁馐马棥俊皯?yīng)與對照的圖譜（光譜集XX圖）一致”，系指《藥品紅外光譜集》各卷所載的圖譜。，比對時應(yīng)注意以下四種情況：（1）輔料無干擾，待測成分的晶型不變化，此時可直接與原料藥的標準光譜進行比對；（2）輔料無干擾，但待測成分的晶型有變化，此種情況可用對照品經(jīng)同法處理后的光譜比對；（3）待測成分的晶型不變化，而輔料存在不同程度的干擾，此時可參照原料藥的標準光譜，在指紋區(qū)內(nèi)選擇3～5個不受輔料干擾的待測成分的特征譜帶作為鑒別的依據(jù)。，供試品制備時研磨程度的差異或吸水程度不同等原因，均會影響光譜的形狀。附錄Ⅴ D 原子吸收分光光度法原子吸收分光光度法的測量對象是呈原子狀態(tài)的金屬元素和部分非金屬元素，系由待測元素燈發(fā)出的特征譜線通過供試品經(jīng)原子化產(chǎn)生的原子蒸氣時，被蒸氣中待測元素的基態(tài)原子所吸收，通過測定輻射光強度減弱的程度，求出供試品中待測元素的含量。對儀器的一般要求 所用儀器為原子吸收分光光度計，由光源、原子化器、單色器和檢測系統(tǒng)等組成，另有背景校正系統(tǒng)、自動進樣系統(tǒng)等。 主要有四種類型：火焰原子化器、石墨爐原子化器、氫化物發(fā)生原子化器及冷蒸氣發(fā)生原子化器。其功能是將供試品溶液霧化成氣溶膠后，再與燃氣混合，進入燃燒燈頭產(chǎn)生的火焰中，以干燥、蒸發(fā)、離解供試晶，使待測元素形成基態(tài)原子。改變?nèi)細夂椭細獾姆N類及比例可以控制火焰的溫度，以獲得較好的火焰穩(wěn)定性和測定靈敏度。其功能是將供試品溶液干燥、灰化，再經(jīng)高溫原子化使待測元素形成基態(tài)原子。 （3）氫化物發(fā)生原子化器 由氫化物發(fā)生器和原子吸收池組成，可用于砷、鍺、鉛、錫、硒、錫、銻等元素的測定。（4）冷蒸氣發(fā)生原子化器 由汞蒸氣發(fā)生器和原子吸收池組成，專門用于汞的測定。 其功能是從光源發(fā)射的電磁輻射中分離出所需要的電磁輻射，儀器光路應(yīng)能保證有良好的光譜分辨率和在相當窄的光譜帶（）下正常工作的能力，～。 背景干擾是原子吸收測定中的常見現(xiàn)象。這些干擾在儀器設(shè)計時應(yīng)設(shè)法予以克服。在原子吸收分光光度分析中，必須注意背景以及其他原因引起的對測定的干擾。在火焰法原子吸收測定中可采用選擇適宜的測定譜線和狹縫、改變火焰溫度、加入絡(luò)合劑或釋放劑、采用標準加入法等方法消除干擾；在石墨爐原子吸收測定中可采用選擇適宜的背景校正系統(tǒng)、加入適宜的基體