【正文】 術有限公司亞西牌液氮生物容器 四川亞西橡塑機器有限公司超純水儀 上海睿浦實業(yè)有限公司手提式不銹鋼壓力蒸汽滅菌器 上海三申醫(yī)療機械有限公司 溶液配置1. LB培養(yǎng)基：蛋白胨1%，%，NaCll%，；%的瓊脂粉， ，高壓蒸汽滅菌20分Pa510?鐘；冷卻至50℃后加入相應抗生素，倒平板。2 材料和方法 菌株、質粒和植物材料紅豆杉葉片取自本實驗室培養(yǎng)的曼地亞紅豆杉幼嫩葉片，采摘于華中科技大學植物園，用于總RNA的提?。淮竽c桿菌（E coli）菌株為 ；?5DH連接載體pMD18T抗性標記為氨芐青霉素（Amp） 。根據(jù)大量文獻報道，MYB家族基因對類黃酮、花青素、萜類等次級代謝產物的合成有很大影響，作為紅豆杉的萜類次級代謝產物的紫杉醇，我們推測其生物合成可能受到MYB1基因的影響。③ MYB1 基因表達產物的亞細胞定位分析：首先根據(jù) pCAMBIA1304 質粒的多克隆位點及 MYB1 基因序列設計并合成特異引物，擴增帶有酶切位點的目的基因 MYB1；然后構建亞細胞定位載體 pCAMBIA1304+MYB1，基因槍轉化洋蔥表皮后，對瞬間表達的融合蛋白進行定位分析。② MYB1 基因的生物信息學分析：應用生物信息學軟件及生物信息數(shù)據(jù)庫，對獲得的 MYB1 基因的序列進行分析。這一方面有利于滿足當今社會人們對這種抗癌特效藥的需求，也在另一方面保護了紅豆杉物種，維持了生態(tài)平衡，實現(xiàn)了生態(tài)的可持續(xù)發(fā)展。探索紅豆杉細胞中轉錄因子對其次級代謝產物紫杉醇的調控作用，有利于了解紫杉醇的生物合成途徑，能夠給構建高產紫杉醇的轉基因工業(yè)化菌種或植物提供方向。探索這種基因表達的轉錄因子與紅豆杉細胞中次級代謝產物紫杉醇的表達量的關系。因此，本課題從轉錄調控的角度，探索紅豆杉MYB轉錄因子在其次級代謝產物合成過程中的作用，尤其是對于代謝產物紫杉醇的調節(jié)作用。目前，許多研究表明，作為代謝途徑的關鍵基因的轉錄因子，MYB基因的表達產物對于萜類次級代謝產物的合成至關重要 【18】 。大量的研究表明，MYB 基因，特別是 R2R3MYB 基因在參與調控植物次生代謝途徑中的作用至關重要。④ MYB基因的研究進展自PazAres等從單子葉植物玉米中克隆出與色素合成相關的ZmMYBC1基因以來，大量MYB類基因從各種植物中得以分離鑒定 【12】 。MYB轉錄因子是最大的植物轉錄因子家族成員之一，幾乎參與了植物發(fā)育和代謝的各個方面 【11】 。MYB蛋白的DNA結合結構域集中在氨基端(圖1)，每個重復區(qū)含有3個在空間上規(guī)則排列的色氨酸殘基，這3個色氨酸殘基在折疊形成MYB結構域的疏水核心中起重要作用，一般在所有的MYB蛋白中是保守的，但R3的第1個色氨酸殘基可被芳香族氨基酸(如苯丙氨酸)或其他疏水氨基酸所代替 【10】 。動物中的MYB蛋白DNA結合域通常含有3個5055個氨基酸的不完全重復區(qū)，每個重復區(qū)折疊成一個螺旋轉角螺旋（HTH）結構，插入到目標DNA的大溝中 【8】 。在植物中首先從玉米中克隆了含有MYB結構域的轉錄因子C1基因，之后在植物中發(fā)現(xiàn)的MYB相關基因的數(shù)量迅速增加 【7】 。但運用植物組織、細胞培養(yǎng)技術生產紫杉醇仍處在實驗室階段，如何獲得高含量、產紫杉醇穩(wěn)定的愈傷組織一直都是組織培養(yǎng)、細胞培養(yǎng)生產紫杉醇的關鍵。生產紫杉醇的微生物大多是與紅豆杉共生的真菌，其紫杉醇含量極微，并且這些真菌的培養(yǎng)和大規(guī)模發(fā)酵困難，菌株衰退也是一個難題。但化學合成從實質意義上說還沒有取得徹底的突破，目前還不具備應用價值。從理論上來說這是一個好方法，但是紫杉醇的合成途徑非常復雜，涉及到多種酶以及很多分支途徑，單純依靠轉化一、兩種限速酶基因，只能保證轉入的限速酶表達量提高，使之不再是限速因素，但其它階段對于最終產量的限制依然存在，而且同時轉入多種基因的可行性非常低，這種方法的缺陷很明顯。因此，近年來國內外許研究人員、實驗室和公司一直試圖通過生物合成、化學合成、微生物提取、組織和細胞培養(yǎng)、尋找類似物等途徑來解決紫杉醇的藥源短缺問題。臨床研究表明，紫杉具有廣譜而高效的抗癌活性，對于治療卵巢癌、乳腺癌等療效突出。2. 有關紫杉醇紫杉醇(Taxo1)是2O世紀7O年代初從短葉紅豆杉樹皮中提取分離得到的一種四環(huán)二萜酰胺類化合物，分子式為：C 47H51NO14，是紅豆杉屬植物中的一種復雜的天然次生代謝物，主要由紫杉烷環(huán)和側鏈組成 【2】 ，其生物合成非常復雜，全過程約20步酶促反應，涉及多步環(huán)化、羥基化、酰基化反應 【3】 。引種的曼地亞紅豆杉生物特性穩(wěn)定，沒有發(fā)生變異，紫杉醇含量接近甚至高于原產地。南方紅豆杉主要分布在滇東、滇西南、滇東。云南紅豆杉主要分布在滇西與地洲等地。紅豆杉在全球共有十一種，目前我國共有四種和一個變種，即云南紅豆杉、西藏紅豆杉、東北紅豆杉、中國紅豆杉和南方紅豆杉（變種） 。紅豆杉 MYB1 基因的克隆及其表達產物的亞細胞定位分析畢業(yè)論文目 錄摘要﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍ⅠAbstract ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍Ⅱ緒論 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍ 51. 有關紅豆杉 ﹍ ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍ 52. 有關紫杉醇 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍53. 有關MYB基因 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍6① MYB基因﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍6② MYB基因編碼蛋白（MYB蛋白）的結構特征﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍6③ MYB基因的功能 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍ 7④ MYB基因的研究進展﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍74. 本課題研究的切入點﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍ 85. 研究的目的和意義﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍ 96. 本課題研究的主要內容﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍ 9第一章 MYB1基因的克隆 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍101 前言﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍102 材料和方法﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍10 菌株、質粒和植物材料﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍10 試劑﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍ 10 儀器﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍ 10 溶液配置﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍ 11 引物設計﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍ 11 總RNA提取﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍12 反轉錄合成cDNA第一鏈 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍14 MYB1全長克隆﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍14 PCR擴增目的基因MYB1全長﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍ 14 割膠回收目的基因片段(MYB1) ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍15 目的基因與克隆載體pMD18T質粒的連接 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍15 轉化 感受態(tài)細胞﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍16?5DH 大腸桿菌 感受態(tài)細胞的制備 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍16 重組質粒轉化 感受態(tài)細胞 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍17 挑斑篩選陽性克隆 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍17 陽性克隆的菌液PCR擴增鑒定﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍17 目的基因的測序 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍183 結果與分析 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍18 紅豆杉葉片細胞總 RNA 的提取和質量分析 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍18 反轉錄得到cDNA第一鏈 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍19 目的基因的PCR擴增 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍19 重組質粒的菌液PCR鑒定 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍20 目的基因MYB1的測序結果 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍20 MYB1基因的比對分析 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍214 討論 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍21 RNA 的提取 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍21 MYB1基因的PCR擴增質量 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍22第二章 MYB1基因的生物信息學分析 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍231 前言 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍232 材料與方法 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍243 結果與分析 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍24 推導的 MYB1 基因的氨基酸序列 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍24 紅豆杉 MYB1 基本理化性質的預測和分析 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍25 紅豆杉 MYB1 跨膜結構預測和分析 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍25 紅豆杉 MYB1 功能結構域的預測和分析 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍25 紅豆杉 MYB1 亞細胞定位的預測和分析 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍26 紅豆杉MYB1 二級結構的預測和分 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍27 多序列比對﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍28 進化樹分析﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍294 討論 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍30第三章 MYB1基因表達產物的亞細胞定位分析 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍321 前言 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍32 基因槍轉化 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍32 亞細胞定位 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍33 亞細胞定位分析的必要性 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍332 材料與方法 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍33 菌株、質粒和植物材料 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍34 試劑與用品 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍34 儀器 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍34 溶液配制 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍35 擴增含有酶切位點的MYB1基因﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍35 質粒的提取 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍35 以質粒為模板擴增含有酶切位點的MYB1基因﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍36 含有酶切位點的MYB1基因與pMD18T質粒的連接﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍37 重組子轉化 感受態(tài)細胞 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍37?5DH 挑斑篩選陽性克隆 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍38 菌液PCR鑒定﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍38 T+MYB1重組子的酶切鑒定 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍38 亞細胞定位載體質粒pCAMBIA1304的雙酶切 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍39 目的基因與pCAMBIA1304質粒的連接﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍40 重組子轉化 感受態(tài)細胞 ﹍﹍﹍﹍﹍4014 pCAMBI130??Y?5DH 挑斑篩選陽性克隆﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍41 菌液PCR鑒定 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍41 重組子的酶切鑒定 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍4114pI130 提取陽性菌液的質粒﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍42 陽性質粒的酶切驗證﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍23 基因槍轉化洋蔥表皮細胞﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍23 融合蛋白的瞬間表達與定位﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍443 結果與分析 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍44 含有酶切位點的MYB1基因的擴增 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍44 菌液PCR鑒定 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍44 T+MYB1重組子的酶切鑒定﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍45 亞細胞定位載體質粒pCAMBIA1304的雙酶切 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍46 重組子的酶切鑒定 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍4614pCAMBI130??Y 融合蛋白的亞細胞定位 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍474 討論 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍48 重組子 的構建 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍4818BTpD 臍組子 的朄! ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹉﹍﹍﹍﹍﹍4)4CI30??Y 亞細胞定位(﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹌﹍﹍﹍﹍68致謝 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍?﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹉﹍﹍﹍﹍﹍u0參考文獻 ﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍?﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍﹍?1緒論1. 有關紅豆杉紅豆杉是一種瀕臨滅絕的天然抗癌植物，由于在自然條件下生長緩慢，