【正文】
進(jìn)行水質(zhì)調(diào)節(jié)和消毒處理。相對受精率(%)= 凍精受精率/鮮精受精率100。將4天后達(dá)到發(fā)眼階段的卵子視為受精卵,并按以下公式進(jìn)行受精率的計算。人工授精按5105∶1的精卵比例將精子與卵子混合, 并迅速加入配好的授精液(100 mM NaCl,10 mM Tris),輕輕混勻,再用清水沖洗兩次,然后放入小型塑料籃中。相對精子活率(%)= 凍精精子活率/鮮精精子活率100。% 伊紅染液在載玻片上混勻并加蓋蓋玻片, 1 分鐘后在高倍鏡下進(jìn)行檢測,計數(shù)一個視野內(nèi)的著色精子和未著色精子,并按以下公式計算出相對精子活率。 卵子的采集與保存采集卵子前先把用干毛巾將成熟雌魚包好,并將體表特別是生殖孔附近擦干,然后由前向后對雌魚的腹部進(jìn)行適度的擠壓,將成熟的卵子擠入干燥的帶孔燒杯中,閉光儲存待用。在人工授精前采用同樣的方法對另2條雄魚進(jìn)行精液的采集,用作對照的新鮮精液。采精前先把雄魚體表的水用干毛巾擦干,用剪刀將魚體剪開后取出精巢,用干紗布吸完精巢表面的液體后用紗布包裹,然后用手進(jìn)行擠壓,將精巢內(nèi)的精液擠入干燥小燒杯中,整個過程要防止精液接觸水分。 實驗方法 精液稀釋液的配制分別以0、15%的甲醇(MeOH)作為冷凍保護(hù)劑,,再添加10%的蛋黃、 g/L的KCl,配制出四種不同的白斑狗魚精液稀釋液。1 材料與方法 實驗材料 親魚的選擇實驗所用白斑狗魚親魚為北園春市場出售的額爾齊斯河野生白斑狗魚,挑選身體健康且發(fā)育成熟的雄魚7條,雌魚4條。但是甲醇在白斑狗魚精液稀釋液中最適添加水平的研究未見報道。2000年又開發(fā)利用10%甲醇作為冷凍保存劑,含有9種成分的精液稀釋液[8]。關(guān)于白斑狗魚精液冷凍保存技術(shù)開始于1978年[5],1995年添加有10%蛋黃的Erdahl amp。目前,常用的冷凍保護(hù)劑主要有二甲亞砜、甲醇、乙二醇和甘油等。因此,研究和開發(fā)白斑狗魚精液冷凍保存技術(shù)對其增養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展和種質(zhì)保存具有重要意義。Nursing techneques of mandarin fish larvae 白斑狗魚(Esox lucius)屬鮭形目(Salmoniformes)、狗魚亞目(Esocoidei)、狗魚科(Esocidae)、狗魚屬(Esox),在我國境內(nèi)僅分布于新疆額爾齊斯河流域,白斑狗魚喜棲息于有支流的河道中,通常生活于水草叢生的沿岸地帶,屬大型肉食性兇猛魚類,生長速度快,食性以魚為主,其肉質(zhì)堅韌少刺,口味鮮美,營養(yǎng)價值高,是一種暢銷且具有發(fā)展前景的淡水增養(yǎng)殖品種[1,2]。Motility rate。關(guān)鍵詞:白斑狗魚;甲醇;冷凍保存;精子活率;受精率;苗種培育 The application study of methanol in cryopreservation of Esox lucius spermSummary:In order to study the methanol in Esox lucius’s semen cryopreservation of optimum adding level, this paper uses the ml straw and liquid nitrogen’s surface cooling method to study the influence of the methanol of four different levels to add frost fine work days pike sperm Fertilization rate, and the living conditions of the reproductive growth seedling. Experimental results show that add a 10% of methanol pure won the highest freezing semen live Fertilization rate and relatively pure breed, triplefrequency undifferenced observables frozen out in early stage and cultivate encouraged fresh semen bred in survival rate, weight and body length are no significant differences