【正文】 （3）用10%甲醇作為保護(hù)劑的凍精所繁殖的魚苗與新鮮精液繁殖的魚苗在早期培育階段的成活率沒有顯著性差異。本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明，甲醇10%的添加取得最優(yōu)的效果，精子活率顯著在高于其它三個(gè)添加水平，這提示采用10%的添加水平，對(duì)白斑狗魚膜的完整性來說是保護(hù)性最強(qiáng)的。 a注：平均值后相同字母表示差異不顯著，（P ，n=3）3 討論 白斑狗魚的精液冷凍保護(hù)劑的選擇魚類精子保存主要有低溫、常溫和冷凍三種，其中超低溫冷凍保存是從上世紀(jì)50年代開始的。,注：平均值后相同字母表示差異不顯著，（P ） 10%甲醇稀釋液凍精繁殖苗種生長性狀用鮮精和第Ⅲ組凍精繁殖的魚苗經(jīng)過24天的飼養(yǎng)，對(duì)其成活率、體重和體長的分析結(jié)果見表2。表1　四種精液稀釋液對(duì)白斑狗魚凍精精子活率、受精卵受精率的影響精液稀釋液 相對(duì)精子活率（%） 相對(duì)受精率（%）Ⅰ +0%甲醇+10%蛋黃+ g/LKCl177。試驗(yàn)在同一水泥池中的6個(gè)不同網(wǎng)箱中進(jìn)行，培育水溫為1116℃，定時(shí)開動(dòng)增氧機(jī)，每天投喂23次，適時(shí)進(jìn)行水質(zhì)調(diào)節(jié)和消毒處理。相對(duì)精子活率（%）= 凍精精子活率/鮮精精子活率100。采精前先把雄魚體表的水用干毛巾擦干，用剪刀將魚體剪開后取出精巢，用干紗布吸完精巢表面的液體后用紗布包裹，然后用手進(jìn)行擠壓，將精巢內(nèi)的精液擠入干燥小燒杯中，整個(gè)過程要防止精液接觸水分。2000年又開發(fā)利用10%甲醇作為冷凍保存劑，含有9種成分的精液稀釋液[8]。Nursing techneques of mandarin fish larvae 白斑狗魚(Esox lucius)屬鮭形目（Salmoniformes）、狗魚亞目（Esocoidei）、狗魚科(Esocidae)、狗魚屬(Esox),在我國境內(nèi)僅分布于新疆額爾齊斯河流域，白斑狗魚喜棲息于有支流的河道中，通常生活于水草叢生的沿岸地帶，屬大型肉食性兇猛魚類，生長速度快，食性以魚為主，其肉質(zhì)堅(jiān)韌少刺，口味鮮美，營養(yǎng)價(jià)值高，是一種暢銷且具有發(fā)展前景的淡水增養(yǎng)殖品種[1,2]。實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明，添加有10%甲醇的凍精獲得了最高的相對(duì)精子活率和受精率，利用該組凍精繁殖出的魚苗在早期培育階段與新鮮精液繁殖出來的苗種在成活率、體重和體長方面都沒有顯著性差異。精液冷凍保存技術(shù)開始于20世紀(jì)50年代初，其范圍屬于低溫生物學(xué)。、受精率的影響，以及10%甲醇的稀釋液對(duì)繁殖苗種生長性狀的影響，開發(fā)出更好的精液冷凍保存技術(shù)，為生產(chǎn)應(yīng)用和種質(zhì)保存服務(wù)。 精液的冷凍保存分別將四種已預(yù)冷的冷凍稀釋液與精液以3：1的比例進(jìn)行混合，每種稀釋液裝10支，用燒熱的鑷子進(jìn)行封口，隨后將麥管水平放置在距液氮表面2 cm 處，經(jīng)過5 min的降溫后，迅速投入液氮中，然后裝入相應(yīng)的袋子中，保存在液氮罐內(nèi)。孵化過程中的水溫9～12℃，并用循環(huán)水泵進(jìn)行淋水增氧。SD表示，均數(shù)的比較采用OneWay ANOVA 分析法，P 。177。 a177。近年來大量的研究表明甲醇是一種更為有效的冷凍保護(hù)劑，在對(duì)四種歐洲鯉科魚類、大西洋鮭和里海斑鱒精液的研究表明10%甲醇的保護(hù)效果都優(yōu)于5%或10%的DMSO的效果[3,4]。 含10%甲醇稀釋液的凍精所繁殖苗種的生長情況 關(guān)于魚類精液冷凍保存技術(shù)的研究，除了在對(duì)稀釋液的配制、降溫平衡、冷凍保存方法以及冷凍精液的解凍等過程的進(jìn)行集中研究外，也對(duì)鯉魚（Cyprinus carpio L.）、斑點(diǎn)叉尾鮰（Ictalurus punctatus）和虹鱒（Oncorhynchus mykiss）等幾種主要經(jīng)濟(jì)魚類進(jìn)行了凍精繁殖苗種在生長、形態(tài)及畸形率等方面進(jìn)行了一些研究[101，102，103]。本論文設(shè)計(jì)在張俊杰老師的悉心指導(dǎo)和嚴(yán)格要求下業(yè)已完成，從課題選擇到具體的寫作過程，論文初稿與定稿無不凝聚著張俊杰老師的心血和汗水，在我的畢業(yè)設(shè)計(jì)期間，張俊杰老師為我提供了種種專業(yè)知識(shí)上的指導(dǎo)和一些富于創(chuàng)造性的建議，張老師一絲不茍的作風(fēng)，嚴(yán)謹(jǐn)求實(shí)的態(tài)度使我深受感動(dòng)，沒有這樣的幫助和關(guān)懷和熏陶，我不會(huì)這么順利的完成畢業(yè)設(shè)計(jì)。 Demianowicz, W. (2001). Effect of extender position and equilibration time on fertilization ability and enzymatic activity of rainbow trout cryopreserved spermatozoa. Theriogenology 56, 177–192.