尼克酰胺na在細(xì)胞ppt課件-展示頁(yè)
2025-05-21 08:13本頁(yè)面
【正文】 載體（ Mugineic acid family phytosiderophores， MAs） ， 由禾本科植物根系分泌， 它是一類低分子量的非蛋白氨基酸， 可溶解土壤中的 Fe，是 天然的 Fe螯合肽 。 2 尼克酰胺氨基轉(zhuǎn)移酶（ Nicotianamine aminotransferase ， NAAT）催化 NA的氨基轉(zhuǎn)變，在禾本科植物中， NAAT是獲得Fe所必需的。 NA也可能與 Fe（ Ⅲ ）作用保護(hù)細(xì)胞免受氧化脅迫的傷害。尼克酰胺 （ NA） 在細(xì)胞內(nèi)金屬運(yùn)輸和植物生殖發(fā)育過(guò)程的作用Role of Nicotianamine in the Intracellular Delivery of Metals and Plant Reproductive DevelopmentMichiko Takahashi， Yasuko Terada， Izumi Nakai Laboratory of Plant Biotechnology,University of Tokyo,Japan Department of Applied Chemistry,Science University of Tokyo,Japan The Plant Cell, Vol. 15, 1263–1280, June 2022 1 Introduction 2 Methods 3 Results 4 Discussion 1 Introduction 1 尼克酰胺（ Nicotianamine， NA） ， 是一種金屬螯合劑，普遍存在于高等植物中， NA可螯合金屬陽(yáng)離子。研究認(rèn)為 NA在植物體內(nèi) Fe和其他金屬的運(yùn)輸過(guò)程中起作用 。但是，在高等植物中 NA準(zhǔn)確的作用仍不清楚。 NAAT為禾本科植物所特有。 NAAT是MAs合成過(guò)程中的關(guān)鍵酶 (Fig 1)，催化 NA的氨基化，是 MAs生成過(guò)程中的一個(gè)基本媒介，MAs只有在禾本科植物中產(chǎn)生。4 MAs的生物合成途徑 為了研究非禾本科植物中 NAAT產(chǎn)生異常的原因，把包含花椰菜病毒的 35S啟動(dòng)子與hvnaatA基因編碼區(qū)結(jié)合的載體轉(zhuǎn)入煙草（產(chǎn)生NA但是不產(chǎn)生植物鐵載體），表達(dá) NAAT基因的轉(zhuǎn)基因煙草植物（ naat煙草）的幼葉有網(wǎng)紋狀失綠癥，花的形狀異常且不育， naat煙草可產(chǎn)生大量的 NAAT，從而使得 NA短缺。2 Methods1 二元載體構(gòu)建：缺鐵大麥根部中分離hvnaatA cDNA— 在 pUC118菌株 SmaI位點(diǎn)克隆 —pUC118 hvnaatA用 XbaI 和 SacI進(jìn)行融合 — 克隆在 pIG121Hm 菌株中。2） Naat煙草（ T2）， nas煙草，野生型煙草和對(duì)照煙草生長(zhǎng)在裝有蛭石的盆里，條件為 25C (day/night)，自然光照，每天用稀釋 1000倍的Hyponex 營(yíng)養(yǎng)液澆灌植物，培養(yǎng)后作為實(shí)驗(yàn)材料。3 DNA凝膠電泳分析： DNA的提取 — 分離 — 電泳 —擴(kuò)增 — 雜交 — 拍照4 RNA凝膠電泳分析： RNA的提取 — 變性 — 電泳 —擴(kuò)增 — 雜交 — 拍照5 尼克酰胺氨基轉(zhuǎn)氨酶（ NAAT）的分析： 用 HPLC分析6 葉片的顯微結(jié)構(gòu)和超微結(jié)構(gòu)觀察： 環(huán)氧樹(shù)脂切片法7 金屬濃度的測(cè)定：發(fā)射光譜儀測(cè)定8 金屬在葉片中的分布： 同步加速器誘導(dǎo)輻射 X射線熒光光譜儀（ XRF）觀察9 NA的提取和分析：用 HPLC進(jìn)行定量分析 10 失綠葉葉綠素的測(cè)定 ：用 SPAD502葉綠素儀測(cè)定 11 花型異常的逆轉(zhuǎn)實(shí)驗(yàn)：離體腋芽用五個(gè)溶液處理： (1)
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