《尼克酰胺na在細胞》ppt課件-全文預覽
【正文】 這些金屬的運輸。為此，作者測量了 naat煙草和對照煙草葉片的內源 NA。3 Results1 大麥 naatA基因在煙草中的整合及其表達2 轉基因煙草（ naat煙草）的表型具失綠癥 幼葉失綠癥是植物金屬缺乏的普遍癥狀。M NA+20 181。M NA+20181。M NA+20181。2 植物材料和生長條件：1） 通過三親株交配 — 二元載體 pIG121HmhvnaatA 被引入到根瘤農(nóng)桿菌株 C58— 煙草中進行轉化和再生 — 離體煙草腋芽 T0嫁接到 nas煙草上 —— 收獲naat煙草 T1的種子 — 在 nas煙草上繼續(xù)嫁接獲得 T2。 注：在缺鐵脅迫下，禾本科植物根系分泌出 MAs ，活化土壤中難溶的三價鐵化合物，然后在專一的轉運蛋白的作用下將 Fe3+MAs 轉運進胞質中，從而被植物利用。 2 尼克酰胺氨基轉移酶（ Nicotianamine aminotransferase ， NAAT）催化 NA的氨基轉變，在禾本科植物中， NAAT是獲得Fe所必需的。尼克酰胺 （ NA） 在細胞內金屬運輸和植物生殖發(fā)育過程的作用Role of Nicotianamine in the Intracellular Delivery of Metals and Plant Reproductive DevelopmentMichiko Takahashi， Yasuko Terada， Izumi Nakai Laboratory of Plant Biotechnology,University of Tokyo,Japan Department of Applied Chemistry,Science University of Tokyo,Japan The Plant Cell, Vol. 15, 1263–1280, June 2022 1 Introduction 2 Methods 3 Results 4 Discussion 1 Introduction 1 尼克酰胺（ Nicotianamine， NA） ， 是一種金屬螯合劑，普遍存在于高等植物中， NA可螯合金屬陽離子。但是，在高等植物中 NA準確的作用仍不清楚。 NAAT是MAs合成過程中的關鍵酶 (Fig 1)，催化 NA的氨基化，是 MAs生成過程中的一個基本媒介，MAs只有在禾本科植物中產(chǎn)生。2 Methods1 二元載體構建：缺鐵大麥根部中分離hvnaatA cDNA— 在 pUC118菌株 SmaI位點克隆 —pUC118 hvnaatA用 XbaI 和 SacI進行融合 — 克隆在 pIG121Hm 菌株中。3 DNA凝膠電泳分析： DNA的提取 — 分離 — 電泳 —擴增 — 雜交 — 拍照4 RNA凝膠電泳分析： RNA的提取 — 變性 — 電泳 —擴增 — 雜交 — 拍照5 尼克酰胺氨基轉氨酶（ NAAT）的分析： 用 HPLC分析6 葉片的顯微結構和超微結構觀察： 環(huán)氧樹脂切片法7 金屬濃度的測定：發(fā)射光譜儀測定8 金屬在葉片中的分布： 同步加速器誘導輻射 X射線熒光光譜儀（ XRF）觀察9 NA的提取和分析：用 HPLC進行定量分析 10 失綠葉葉綠素的測定 ：用 SPAD502葉綠素儀測定 11 花型異常的逆轉實驗：離體腋芽用五個溶液處理： (1) 0 181。M FeCl3， (3) 20181。M檸檬酸 Fe(III)， (5) 100181。最后，再嫁接離體煙草（ T2naat煙草）進行分析。因為 NA是NAAT的酶作用物，可
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