抗原抗體反應(yīng)ppt課件(2)-展示頁
2025-05-08 02:29本頁面
【正文】 硫酸銨鹽析法： 比較簡(jiǎn)便 ， 蛋白質(zhì)變性小 ， 33%飽和硫鹽沉淀各類 Ig， 分離純度較差 。 上述冷酒精沉淀法 是 1946年 Cohn創(chuàng)立的較好方法 。1 2 ppt課件制作及講課 ? 原則 自愿 有興趣 ? 組織方式 分組講 選出最好在班上講 ? 內(nèi)容 自選 ? 數(shù)量 15張 ? 分別折算 1 2 3次作業(yè) 3 上章小結(jié)： 一 ﹑ 基本概念 主要組織相容性復(fù)合物等 二 ﹑MHC 抗原的結(jié)構(gòu)和功能 MHCI MHCII結(jié)構(gòu)、功能及兩者與肽結(jié)合的區(qū)別 三 ﹑MHC 抗原基因多態(tài)性及結(jié)構(gòu) 四 ﹑MHC 的檢測(cè)原理 和應(yīng)用 4 第七章 抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用 一節(jié) ﹑ 抗體的制備 二 節(jié) ﹑ 抗原抗體反應(yīng) 三 節(jié) ﹑ 抗原抗體反應(yīng)的應(yīng)用 5 一節(jié) ﹑ 抗體的制備 一 ﹑ 抗血清的制備及抗體純化 二 ﹑ 單克隆抗體的制備 三 ﹑ 抗體工程 四 ﹑ 催化性抗體 五 ﹑ 抗體在抗腫瘤治療中的應(yīng)用 繼續(xù) 6 一 ﹑ 抗血清的制備及抗體純化 抗血清的制備 抗血清： 含有能與相應(yīng)抗原結(jié)合的抗體分子的免疫動(dòng)物血清。 ③ 抗血清的純化 見下圖 ① 免疫動(dòng)物 抗原 (半抗原需經(jīng)轉(zhuǎn)化 ) 佐劑乳化 免疫動(dòng)物 ② 抗血清的制備 抗血清的效價(jià)測(cè)定 采血 獲得抗血清 7 抗血清 +3倍體積 0℃ ddH2O,調(diào) pH到 加 50% 20℃ 酒精 至最后質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 20%(保持 5℃ ) 上清 沉淀 (含 IgG/IgA/IgM/雜蛋白 ) 懸浮于 ,用 (0℃ ) 上清液 沉淀 (含 IgA/IgM/雜蛋白 ) 用 , 20至 30℃ 95%酒精至最后質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 25%， 維持在 6 ℃ 上清 沉淀 (IgG) 懸浮于 ddH2O,用 酸調(diào)至 上清液 沉淀 調(diào) pH至 ,離子強(qiáng)度為 — ,加50%冷酒精至最后質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 10%(3℃ ) 沉淀 (IgA/IgM) 上清 通過分子篩將二者分開 抗體 初步純化 8 抗血清的初步純化只是多數(shù)抗體 類別 的純化 。該法得到的只是較粗 Ig。 濃鹽使 IgA形成二聚體 ，不宜采用 。 9 抗體進(jìn)一步純化 IgG在血清中含量最高，占 75— 80%，純化的方法常用 3350%硫銨鹽析和 DEAE纖維素 柱層析法。 分離純化 IgM常用 18%硫銨沉淀，再 DEAE纖維素柱層析，收集洗脫液，再用分子篩分離，獲純化的 IgM。 10 問題： 血清中的抗體是由多個(gè)抗原決定簇刺激 B細(xì)胞克隆而產(chǎn)生的抗體，是多克隆抗體 (
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