生物化學(xué)第二章核酸化學(xué)2性質(zhì)研究方法-展示頁
2025-01-25 13:52本頁面
【正文】 甲酰胺等，均可引起核酸分子變性 變性 DNA的特征： （ 1）溶液粘度降低： DNA雙螺旋是緊密的剛性結(jié)構(gòu)，變性后轉(zhuǎn)化成柔軟而松散的無規(guī)則單股線性結(jié)構(gòu)，因此粘度明顯下降。 （一） DNA變性 (denaturation) DNA變性的概念 ：指 DNA分子中的雙螺旋結(jié)構(gòu)解鏈為無規(guī)則線性結(jié)構(gòu)的現(xiàn)象。核酸的紫外吸收是核酸定量測定的基礎(chǔ)。 DNA的 pI約為 4～ 5， RNA的 pI約為 ～ ，在 pH7～ 8電泳時泳向正極。 二、核酸的水解 三、核酸的兩性電離與等電點(diǎn) 核酸的磷酸基具有酸性，堿基具有堿性，因此，核酸具有 兩性電離的性質(zhì) 。 粘性 ：核酸的水溶液粘度很大，粘度 DNA大于 RNA。 DNA蛋白在低濃度的鹽溶液中隨鹽濃度的增加而增加，在 1mol/L的 NaC溶液中溶解度比純水高 2倍，在 ，僅為水的 1%，幾乎不溶解；而RNA蛋白在鹽溶液中其溶解度受鹽濃度的影響較小，在 溶解度較大。 DNA和 RNA在生物細(xì)胞內(nèi)都與蛋白質(zhì)結(jié)合成核蛋白。 溶解性 ： RNA和 DNA都是極性的化合物，一般說來，這些化合物都微溶于水，不溶于乙醇、乙醚、氯仿等有機(jī)溶劑。 核酸的分離純化 、 測定及研究方法 核酸的性質(zhì)是由其結(jié)構(gòu)決定的。主講教師： 季祥 郵箱： 167。 核酸的理化性質(zhì) 167。 核酸的結(jié)構(gòu)特點(diǎn) 是分子大 ,有一些可解離的基團(tuán) ,具有共軛雙鍵等 .這些特點(diǎn)決定了核酸及其組分核苷酸性質(zhì)的基礎(chǔ) .下面介紹幾種重要的性質(zhì) : 一、物理性質(zhì) 性狀 ： RNA及其組分核苷酸、核苷、嘌呤堿、嘧啶堿的純品都呈白色的粉末或結(jié)晶； DNA則為疏松的石棉一樣的纖維狀固體。它們的鈉鹽易溶于水。 DNA核蛋白與 RNA核蛋白的溶解度受溶液的鹽濃度的影響而不同。因此，在核酸的提取中，常用此法將兩種核蛋白分開，然后用蛋白質(zhì)變性劑去除蛋白質(zhì)。 核酸變性后，粘度下降。但核酸中磷酸基的酸性大于堿基的堿性，其等電點(diǎn)偏酸性。 四、 UV吸收 ： 核酸分子中含有嘌呤堿和嘧啶堿，因而具有紫外吸收的的性質(zhì)，在 260nm處核酸紫外吸收最強(qiáng)。 五、 DNA DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型，不僅與其生物功能有密切關(guān)系，還能解釋 DNA的重要特性變性與復(fù)性，這對于深入了解 DNA分子結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系又有重要意義。 DNA變性的本質(zhì) ：維持雙螺旋穩(wěn)定性的氫鍵斷裂，堿基間的堆積力遭到破壞，但不涉及到其一級結(jié)構(gòu)的改變。 （ 2）旋光性發(fā)生變化：變性后整個 DNA分子的對稱性及分子構(gòu)型改變，使 DNA溶液的旋光性發(fā)生變化。 增色效應(yīng) (hyperchromic effect)： 指 DNA變性后其紫外吸收明顯增強(qiáng)的效應(yīng)。在 DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)中堿基藏入內(nèi)側(cè)，變性時 DNA雙螺旋解開，于是堿基外露，堿基 對雙鏈 DNA進(jìn)行加熱變性，當(dāng)溫度升高到一定高度時，DNA溶液在 260nm處的
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