菌種操作規(guī)程ppt課件-展示頁
2025-01-19 10:18本頁面
【正文】 然后按照配方將稱量好的葡萄糖加入溶解，再用吸管吸取 KH2PO MgSO4溶液加入，用量筒定容至所需體積， PH自然。 生產(chǎn)斜面的制備 ? 生產(chǎn)斜面 分為子斜面和母斜面，其 PDA培養(yǎng)基配方如下： 成分 馬鈴薯 葡萄糖 瓊脂 KH2PO4 MgSO4 配比 20% 2% 2% % % 規(guī)格 自然 分析純 生物試劑 分析純 分析純 生產(chǎn)斜面 ? 選擇無芽馬鈴薯去皮后用蒸餾水洗干凈，稱量所需重量，并切成邊長 。 ? 生產(chǎn)能力試驗(yàn)： 原則上每批斜面孢子應(yīng)作生產(chǎn)能力試驗(yàn)，尤其在大生產(chǎn)不正常情況下，為配合發(fā)酵工藝尋找異常原因，每批斜面應(yīng)作搖瓶考察。經(jīng)無菌試驗(yàn)檢查正常。 砂土孢子的制備 ? 斜面孢子的選擇及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 取經(jīng)選育的單菌落制備的大試管斜面孢子或生產(chǎn)良好的茄氏瓶斜面孢子，具以下條件：孢子層生長豐滿，較均勻，孢子數(shù)量較多，少水，孢子呈淡黃色。如此反復(fù)洗滌直到 PH呈中性。 砂土管的制備 ? 砂的處理 普通黃沙用稀酸（ 1N的 HCL或 H2SO4）或稀堿（ 1NNaOH）浸泡 12小時(shí)后 ,倒去酸水，用自來水充分沖洗至 PH中性，烘干后用磁鐵吸去鐵屑，經(jīng) 60目篩過篩后備用。 ? 保藏 合格安瓿管置 2～ 5℃ 冰箱保藏，保藏期為 1～ 10年。 ? 安瓿管的泄漏測定 用高頻火花測定儀進(jìn)行測定。然后再在室溫抽 4h。 孢子懸浮液的制備 ? 將經(jīng)過搖瓶考察指標(biāo)符合要求對(duì)照的斜面孢子，制成高濃度的孢子懸浮液，用無菌的毛細(xì)吸管或注射器將菌液分裝于安瓿管底部，每管裝 ～ 預(yù)凍及速凍 ? 灌裝好的安瓿管置 2～ 5℃ 冰箱預(yù)凍 1h，然后置 30℃ 溫度下速凍 1h后取出，置真空干燥器內(nèi)。 ? 按 10%的抽樣率抽取滅菌好的脫脂牛奶作無菌實(shí)驗(yàn)，每支肉湯倒入約 1mL左右的牛奶。 脫脂牛奶的制備 ? 將買來的新鮮牛奶倒入離心管中以 3000轉(zhuǎn) /分離心15分鐘，去掉上層的脂，下層即為脫脂牛奶。任意選取一種放于重鉻酸鉀 濃硫酸溶液（ 100g/mL）中浸泡 10h，然后取出用自來水反復(fù)沖洗多次，最后用蒸餾水洗二次，烘干。 ? 3 責(zé)任 菌種組操作人員負(fù)責(zé)本操作規(guī)程的實(shí)施。菌種操作規(guī)程 （ Master Operation Procedure for ARA Production Strain） CA/WA001— 2022版 ? 1目的 建立菌種操作規(guī)程，確保菌種保藏、自然選育、生產(chǎn)供種操作規(guī)范性，提供優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)的生產(chǎn)菌種。 ? 2 范圍 生產(chǎn)一部菌種組。 安瓿管的制備 ? 空白安瓿管的制備 ? 安瓿管有三種：手榴彈形、球形、直形。將寫有菌種編號(hào)及制備膜的標(biāo)簽放入安瓿管內(nèi)，將有字的一面向管壁，塞上棉塞， 121℃滅菌 1小時(shí)。 ? 脫脂好的牛奶倒入試管（ Φ18 200mm）或 250mL三角瓶中，置消毒鍋中滅菌，滅菌溫度 110℃ 、時(shí)間 20分鐘。然后置 37℃ 恒溫間培養(yǎng) 48h觀察肉湯變化情況，判定是否染菌，如無染菌，即可使用。 真空干燥 ? 將裝在安瓿管的真空干燥器接入真空泵上，在 15℃ 溫度下，抽真空 6～ 8h。 ? 封口 將抽好的安瓿管在酒精噴燈上進(jìn)行熔封（邊抽真空邊封口）。測定方法：將測定儀照著安瓿管管壁打一槍，如果各壁呈紫色的光即為合格，如果沒有顏色，呈白光，即是不合格產(chǎn)品。 ? 記錄 安瓿管在保藏過程中應(yīng)控制溫度，每天查看溫度并填寫《 溫度、濕度原始記錄 》 ，在使用過程中應(yīng)填寫 《 安瓿管使用記錄 》 。 ? 土的處理 取離地面 1公尺以下的黃土，（不含有機(jī)質(zhì)）打碎，加適量水充分?jǐn)嚢瑁?
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