【正文】 的酶系，是細(xì)胞的產(chǎn)能場(chǎng)所。 細(xì)胞膜的生理功能 ① 選擇性地控制細(xì)胞內(nèi)外營養(yǎng)物質(zhì)和代謝產(chǎn)物的運(yùn)送 。 ⑤ 脂質(zhì)分子間或脂質(zhì)與蛋白質(zhì)分子間無共價(jià) 結(jié)合 ⑥ 脂質(zhì)雙分子層猶如一片海洋，周邊蛋白在其上面作漂浮運(yùn)動(dòng)，整體蛋白則似冰山狀沉浸在其中作橫向運(yùn)動(dòng)。 ③ 整合蛋白因其表面呈疏水性，因此可 溶于脂質(zhì)雙分子層的疏水性內(nèi)層中。 液態(tài)鑲嵌模型（辛格 和尼克爾森 ） ① 膜的主體是脂質(zhì)雙分子層。 細(xì)胞膜上長(zhǎng)鏈脂肪酸的長(zhǎng)度和飽和度因細(xì)菌種類和生長(zhǎng)溫度而異，通常生長(zhǎng)溫度要求越高的種，其飽和度也越高，反之則低。 細(xì)菌的細(xì)胞質(zhì)膜可通過 質(zhì)壁分離 、 鑒別性染色 或 原生質(zhì)體破裂 等方法在光學(xué)顯微鏡下觀察到。 細(xì)胞結(jié)構(gòu) 細(xì)胞膜 細(xì)胞質(zhì)膜又稱質(zhì)膜、細(xì)胞膜，是緊貼在細(xì)胞壁內(nèi)側(cè)、包圍著細(xì)胞質(zhì)的一層柔軟、脆弱、富有彈性的 半透性薄膜 ，厚約 7~8nm，由 磷脂 （ 20~30%）和 蛋白質(zhì) （ 50~70%）組成。 支原體 ：是一類在長(zhǎng)期進(jìn)化過程中形成的、適應(yīng)自然生活條件的無細(xì)胞壁的原核生物。 原生質(zhì)體和球狀體的共同特點(diǎn) :無完整細(xì)胞壁；細(xì)胞呈球狀 ；對(duì)滲透壓及其敏感 ；細(xì)胞不能分裂。原生質(zhì)體一般由革蘭氏陽性菌形成。 周質(zhì)空間中存在著多種周質(zhì)蛋白；水解酶類、合成酶類、結(jié)合蛋白、受體蛋白。 周質(zhì)空間又稱：周質(zhì)和壁膜間隙。 有 20 余種，但多數(shù)功能尚不清楚。 脂多糖的主要功能 LPS 結(jié)構(gòu)的多變，決定了革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞表面抗原決定簇的多樣性； LPS 負(fù)電荷較強(qiáng)，與磷壁酸相似，也有吸附 Mg2+Ca2+等陽離子以提高其在細(xì)胞表面濃度的作用，對(duì)細(xì)胞膜結(jié)果其穩(wěn)定作用。 外膜；位于革蘭氏陰性菌 細(xì)胞壁外層，由脂多糖、磷脂和脂蛋白等若干種蛋白質(zhì)組成的膜，有時(shí)也稱為外壁。 磷壁酸 分為兩類，其一為壁磷壁酸，其二為膜磷壁酸 磷壁酸 主要生理功能： 細(xì)胞壁形成負(fù)電荷環(huán)境，增強(qiáng)細(xì)胞膜對(duì)二價(jià)陽離子的吸收 貯藏磷元素 增強(qiáng)某些致病菌對(duì)宿主細(xì)胞的粘連、避免被白細(xì)胞吞噬 革蘭氏陽性菌特異表面抗原的物質(zhì)基礎(chǔ) 噬菌體的特異性吸附受體 能調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)自溶素的活力，防止細(xì)胞因自溶而死亡。 肽聚糖：每一肽聚糖單體由 3 部分組成：雙糖單位 （ N乙酰胞壁酸、乙酰葡糖胺） 、四肽尾、肽橋 肽橋：起著連接前后連個(gè)四肽尾分子的橋梁作用。 4 賦予細(xì)菌具有特定的抗原性、致病性以及對(duì)抗生素和噬菌體的敏感性。 2 為細(xì)胞的生長(zhǎng)、分裂和鞭毛的運(yùn)動(dòng)所必需、失去了細(xì)胞壁的原生質(zhì)體，也就喪失 了這些重要的功能。主要功能： 1 固定細(xì)胞外形和提高機(jī)械強(qiáng)度。 細(xì)菌 細(xì)胞結(jié)構(gòu) 細(xì)胞壁 ：位于細(xì)胞最外的一層厚實(shí)、堅(jiān)韌的外被。 分辨率與所用波長(zhǎng)成反比 微生物類群與形態(tài)結(jié)構(gòu) 第一節(jié)、細(xì)菌 一般形態(tài)及細(xì)胞結(jié)構(gòu) 細(xì)菌基本形態(tài)：球狀、桿狀、螺旋狀 細(xì)菌大小：最大：肉眼可見（ ） 最?。号c無細(xì)胞結(jié)構(gòu)的病毒相仿。 第二節(jié) 顯微鏡和顯微技術(shù) 顯微鏡的種類： 普通光學(xué)顯微鏡（明視野顯微鏡） 暗視野顯微鏡 相差顯微鏡 熒光顯微鏡 透射電子顯微鏡 掃描電子顯微鏡 掃描隧道顯微鏡 分辨率：能辨別兩點(diǎn)之間最小距離的能力 反差：樣品區(qū)別于背景的程度 顯微技術(shù)：與顯微鏡的自身特點(diǎn)有關(guān)，但也取決于進(jìn)行顯微觀察 時(shí)對(duì)顯微鏡的正確使用計(jì)良好的標(biāo)本制作和觀察技術(shù)。營養(yǎng)和生理?xiàng)l件的幾乎無窮盡的組合形式可滿足各種從自然界選擇出特定微生物的需要。 微生物在自然條件下存在的特點(diǎn)： 同一生態(tài)環(huán)境中混雜存在著不同種類的細(xì)菌 不同細(xì)菌在數(shù)量上存在著差異 選擇培養(yǎng) 微生物群落中數(shù)量占少數(shù)的微生物的分離純化： 抑制大多數(shù)其他微生物的生長(zhǎng) 使待分離的微生物成長(zhǎng)的更快 使待分離的微生物生長(zhǎng)突出 1 利用選擇培養(yǎng)法進(jìn)行直接分離 待分離的微生物生長(zhǎng)，其他微生物的生長(zhǎng)被抑制。 操作難度與細(xì)胞大小成反比。 用液體培養(yǎng)基獲得純培養(yǎng) 采用液體培養(yǎng)基稀釋法，同一個(gè)稀釋度應(yīng)有較多的平行試管，而有可能獲得純培養(yǎng)的那個(gè)稀 釋度的大多數(shù)試管（一般不超過 95%）應(yīng)表現(xiàn)為沒有細(xì)菌生長(zhǎng)。 固體培養(yǎng)基獲得微生物純培養(yǎng)的幾種方法 1 涂布平板法 ：使用較多的常規(guī)方法，但有時(shí)涂布不均勻 2 稀釋到平板法 ：操作較麻煩，對(duì)厭氧菌、熱敏感菌效果不好。 不同微生物 在特定培養(yǎng)基上生長(zhǎng)形成的菌落 或菌苔一般都具有穩(wěn)定的特征，可以成為對(duì)該微生物進(jìn)行分類、鑒定的重要依據(jù)。 用固體培養(yǎng)基獲得純培養(yǎng) 培養(yǎng)基：液體培養(yǎng)基，半固體培養(yǎng)基，固體培養(yǎng)基（固化劑：瓊脂） 菌落 colony：?jiǎn)蝹€(gè)（或聚集在一起的一團(tuán)）微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長(zhǎng)、繁殖到一定程度可以形成肉眼可見的，有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞生長(zhǎng)群體，稱為菌落。 在轉(zhuǎn)接，培養(yǎng)微生物時(shí)防止其他微生物 的污染，其自身也不污染環(huán)境。 微生物個(gè)體微小的特點(diǎn)也決定了 顯微技術(shù) 是進(jìn)行微生物研究的另一項(xiàng)重要技術(shù)，以為絕大多數(shù)微生物的 個(gè)體形態(tài) 及其 內(nèi)部結(jié)構(gòu) 只能通過顯微鏡才能進(jìn)行觀察和 。 純培養(yǎng)物：只有一種微生物的培養(yǎng)物。 培養(yǎng)物：在一定條件下培養(yǎng)、繁殖得到的微生物群體。 微生物的物種（菌株）一般也是以群體的 形式進(jìn)行繁衍、保存。：小。 在絕大多數(shù)情況下都是利用 微生物的群體 來研究其屬性。 培養(yǎng)技術(shù)在微生物學(xué)中具有重要意義。 混合培養(yǎng)物：含有多種微生物的培養(yǎng)物。（通常情況下只有純培養(yǎng)物才能提供可以重復(fù)的結(jié)果） 純培養(yǎng)技術(shù)是進(jìn)行微生物學(xué)研究的基礎(chǔ)。 無菌技術(shù)： 用于分離、培養(yǎng)微生物的器具事先不含任何微生物。 微生物培養(yǎng)的常用器具及其滅菌 常用器具：試管、玻璃燒瓶、培養(yǎng)皿 常用的滅菌方法 ；高壓蒸汽滅菌、高溫干熱滅菌 接種操作要點(diǎn)：在火焰附近進(jìn)行熟練的無菌操作。 菌苔 lawn；在固體培養(yǎng)基表面眾多菌落連成一片時(shí)，便成為菌苔。 用固體培養(yǎng)基分離純培養(yǎng) 使微生物在固體培養(yǎng)基平板上形成單個(gè)菌落的基本方法： 稀釋 。 3 平板劃線法 4 稀釋搖管法 厭氧微生物的分離：厭氧罐，厭氧手套箱。 單細(xì)胞（孢子）分離 一般采用顯微操作儀，在顯微鏡下進(jìn)行。 通過機(jī)械、空氣或油壓傳動(dòng)裝置來減小手的動(dòng)作幅度，在顯微鏡下用毛細(xì)管或顯微針、鉤、環(huán)等挑取單個(gè)微生物細(xì)胞或孢子以獲得純培養(yǎng)。 高溫下培養(yǎng)：分離嗜熱細(xì)菌 培養(yǎng)基中不含 N：分離固氮菌 培養(yǎng)基加抗生素：分離抗性菌 2 利用選擇平板進(jìn)行直接分離 牛奶平板：分離蛋白酶產(chǎn)生菌 選擇培養(yǎng)分離 富集培養(yǎng) ：特定的環(huán)境調(diào)節(jié) →僅適于該條件的微生物旺盛生長(zhǎng)→待分離微生物在群落中的數(shù)量 大大增加→從自然界中分離到所需要的微生物 富集培養(yǎng)是微生物學(xué)最強(qiáng)有力的技術(shù)手段之一。根據(jù)微生物的特殊要求，從自然界分理 處特定已知微生物種類，分離培養(yǎng)在特定環(huán)境中能生長(zhǎng)的微生物。 用浸沒油取代空氣的作用：節(jié)制折射率提高，分辨率得到提高：改變光折射角度，增加照明亮度。 細(xì)菌大小的測(cè)量方法：顯微鏡測(cè)微尺；顯微照相后根據(jù)放大倍數(shù)進(jìn)行計(jì)算。主要由 肽聚糖構(gòu)成。從而使其免受滲透壓等外力的損傷。 3 阻攔酶蛋白和某些抗生素等大分子物質(zhì)（相對(duì)分子質(zhì)量大于 800）進(jìn)入細(xì)胞，保護(hù)細(xì)胞免受溶菌酶、消化酶和青霉素等有害物質(zhì)的損傷。 革蘭氏染色與細(xì)胞壁 革蘭氏陽性菌的細(xì)胞壁 特點(diǎn)：厚度大（ 20~80nm）、化學(xué)組分簡(jiǎn)單，一般只含 90%肽聚糖和 10%磷壁酸。 磷壁酸：結(jié)合在革蘭氏陽性菌細(xì)胞壁上的一種 酸性多糖，主要成分為甘油磷酸或核糖醇磷酸。 革蘭氏陰性菌的細(xì)胞壁 肽聚糖：埋葬在外層膜之內(nèi)，是僅由 1~2 層肽聚糖網(wǎng)狀分子組成的的薄層（ 2~3nm），含量約占細(xì)胞壁總重的 5%~10%,故對(duì)機(jī)械強(qiáng)度的抵抗力叫革蘭氏陽性菌 弱。 脂多糖：位于革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁最外層的一層較厚