昆蟲桿狀病毒載體ppt課件-展示頁
2025-01-17 04:46本頁面
【正文】 棉鈴蟲核型多角體病毒 ( HaNPV) ? 斜紋夜蛾核型多角體病毒 ( SpltMNPV) 桿狀病毒載體 ? AcMNPV 是昆蟲桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)中最常用的載體，基因表達(dá)分為 4 個階段 : 立即早期基因表達(dá) 、 早期基因表達(dá) 、 晚期基因表達(dá) 和 極晚期基因表達(dá) 。 DNA 復(fù)制后組裝在桿狀病毒的核衣內(nèi)，后者具有較大的柔韌性，可容納較大片段的外源 DNA 插入，因此是表達(dá)大片段 DNA 的理想載體。桿狀病毒只來源于 無脊椎動物 ，已發(fā)現(xiàn) 600多種 桿狀病毒，其中僅有不到 20 種 進(jìn)行了分子生物學(xué)研究。據(jù)文獻(xiàn)統(tǒng)計(jì)，已有 1000 余種外源基因在昆蟲桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)中得到了成功地表達(dá)，其中約有 95% 的外源重組蛋白能夠被正確的轉(zhuǎn)譯后加工修飾，具有與天然蛋白相同的生物活性。 ?具有 高效表達(dá) 、 基因克隆容量大 、 重組病毒易于篩選 、 安全性高 、且有完備的 翻譯后加工修飾 系統(tǒng)等特點(diǎn)，現(xiàn)已成為基因工程四大表達(dá)系統(tǒng)之一。昆蟲桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng) 高遄 生物化學(xué)與分子生物 2120422 原核細(xì)胞系統(tǒng) ?大腸桿菌細(xì)胞 ?操作簡便 ?周期短、收益大 ?表達(dá)產(chǎn)物穩(wěn)定 ?相對分子質(zhì)量有限 ?不能對表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行一些翻譯后加工 、修飾 體外基因 表達(dá)系統(tǒng) 真核細(xì)胞系統(tǒng) ?哺乳動物細(xì)胞 ?酵母細(xì)胞 ?昆蟲細(xì)胞（ 桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng) ） ?獨(dú)特特性 前言 高表達(dá) 低成本 安全性高 大規(guī)模生產(chǎn) 前言 ?昆蟲桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)是目前國內(nèi)外十分推崇的 真核表達(dá)系統(tǒng) 。利用桿狀病毒結(jié)構(gòu)基因中 多角體蛋白 的 強(qiáng)啟動子 構(gòu)建的表達(dá)載體，可使很多真核目的基因得到有效甚至高水平的表達(dá)。 ?利用該表達(dá)系統(tǒng)獲得重組蛋白可用于藥物開發(fā)、疫苗生產(chǎn)、生物殺蟲劑等多個領(lǐng)域。 昆蟲桿狀病毒 表達(dá)系統(tǒng) 4. 參考文獻(xiàn) 桿狀病毒載體 昆蟲細(xì)胞宿主 表達(dá)體系 表達(dá)過程 1. 將外源目的基因 插入 到啟動子下游 2. 與桿狀病毒 重組 ，獲得重組病毒 3. 將重組的病毒 純化 4. 感染 昆蟲細(xì)胞或蟲體 5. 外源基因隨著病毒的復(fù)制而獲得 表達(dá) 桿狀病毒載體 ? ?桿狀病毒是研究細(xì)胞分子生物學(xué)的重要工具，同時也是外源基因在昆蟲細(xì)胞中表達(dá)的載體。 ?桿狀病毒的基因組為單一 閉合環(huán)狀雙鏈 DNA 分子， 大小為80~ 160kb，其基因組可在昆蟲細(xì)胞核復(fù)制和轉(zhuǎn)錄。其中 , 用作外源基因表達(dá)載體的桿狀病毒，目前僅限于 核型多角體病毒 ( nuclear poly hedrosis virus, NPV) 。 早于 DNA 復(fù)制 病毒 DNA 合成 ? 多角體蛋白 是形成包含體的主要成分，感染后期在細(xì)胞中的積累可高達(dá)30% ~ 50%，是病毒復(fù)制 非必需成分 ，但對病毒粒子卻有 保
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