昆蟲桿狀病毒載體ppt課件-閱讀頁
2025-01-23 04:46本頁面
【正文】 、酰基化、信號肽切除及肽段的切割和分解等，修飾的位點與天然蛋白在細胞內的情況完全一致。這種不一致對不同目的蛋白的活性影響不同，所以昆蟲表達系統(tǒng)還可作為一個研究糖基化對蛋白質結構與功能影響方面的理想模型。 雖然目前科研工作者大都是在細胞培養(yǎng)條件下進行表達外源基因，當條件成熟時需要大量制備某類外源蛋白時，最好采用昆蟲幼蟲或蛹。 利用 BmNPV 載體在家蠶幼蟲中成功表達出重組蜘蛛牽引絲蛋白，表達量高達每個昆蟲活體 6mg。因此，通過昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)可利用昆蟲活體大規(guī)模生產各種重組蛋白。 DNA 復制后組裝在桿狀病毒的毒粒內，由于毒粒具有較大的柔韌性，能包裝較大的基因片段，可表達非常大( 100kb) 的外源性基因。但目前尚無實驗得知桿狀病毒所能容納的外源基因長度的上限。根據(jù)設計需要既可采用不同的重組桿狀病毒同時感染細胞的形式，也可在同一桿狀病毒載體上同時克隆多個外源基因，其表達產物之間可有蛋白質的相互作用或加工形成具有活性的異源二聚體或多聚體。因此對細胞的生理影響較哺乳類病毒載體要小，同時實驗操作者的自身安全也比較有保障。最新研究發(fā)現(xiàn)， AcMNPV 病毒作為哺乳動物細胞基因轉移載體，也可以將外源基因導入哺乳動物的細胞，如人的肝細胞。 應用 產業(yè) 基礎研究 醫(yī)用疫苗和藥物 ? 昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)廣泛應用于藥物研發(fā)、疫苗生產、重組病毒殺蟲劑等眾多領域中。成功表達出具有藥用價值的蛋白質又可用于藥物研發(fā)和疫苗生產。 ?實現(xiàn)這一計劃的前提是要生產幾萬種蛋白質 ，這就要求蛋白質表達系統(tǒng)提供新的技術，諸如：通過簡單的操作，生產各種活性形式的蛋白質簡化操作過程，縮短從基因生產蛋白質的時間以簡便的操作，同時生產許多種蛋白質。 ? 日本片倉公司在這方面進行了卓有成效的探索導入 Invitrogen公司的 GATEWAY系統(tǒng) ，利用 BactoBac系統(tǒng)的載體，通過單一的 LR Clonase就能同時構建各種帶目的基因的 BEVS質粒轉移載體；用缺失增殖所必須的線型化病毒 DNA、含缺失增殖所必需基因的質粒轉移載體和外源基因同時感染蠶蛹，通過此法，不用篩選就能在短期內獲得正確的重組病毒和目的蛋白，由于使用的是蠶蛹，這種技術還可以自動化操作。 ?盡管如此，臨床試驗亦證明了昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)來源的重組蛋白對人是安全的。國內口服重組昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)多膚藥物已有開發(fā)，正進人藥物審批階段，相信昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)重組多膚生產醫(yī)用藥物會有較好的前景。 ?昆蟲桿狀病毒具有宿主專一、致病力強、傳播快、無殘留、無抗藥性、對脊椎動物和植物安全、不易引起廣泛規(guī)模的生態(tài)平衡的破壞等特點。實踐表明，生物殺蟲劑與化學殺蟲劑相比，具有殺蟲速度慢、殺蟲譜窄、成本高等缺點。為此，科研人員通過基因工程方法改造桿狀病毒，不僅可以克服野生型病毒的固有缺點，而且為擴大病毒殺蟲功能提供了潛在可能。 33 (1):146150 ? 郭廣君 ,呂素芳 ,王榮富 . 外源基因表達系統(tǒng)的研究進展 . 科學技術與工程 ,2022,6(5):582592
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