實時熒光定量pcr檢測的數(shù)據(jù)處理及結(jié)果報告-展示頁
2024-12-05 17:27本頁面
【正文】 ? 擴增效率 E（ amplification efficiency） 擴增效率指的是一個循環(huán)后的產(chǎn)物增加量與這個循環(huán)的模板量的比值，其值位于 0到 1之間。有實驗證明 Ct值與樣本中的原始拷貝數(shù)成正比關(guān)系。 基本概念 ? Ct值（ threshold cycle）或 CP值（ crossing point） Ct或 CP值指的是實時監(jiān)測擴增過程的熒光信號達到指數(shù)擴增時的循環(huán)周期數(shù)。 基本概念 ? 平臺期（ Plateau phase） 為 PCR擴增的四個主要階段之一（圖 51）。 基本概念 ? 指數(shù)期（ Exponential phase） 為 PCR擴增的四個主要階段之一（圖）。擴增達到閾值時的循環(huán)數(shù)可稱為 CT（ ABI Prism有關(guān)文獻）或 CP（ LightCycler有關(guān)文獻）。 基本概念 ? 指數(shù)期初期 （ The beginning of exponential phase） 為PCR擴增的四個主要階段之一（圖）。實時熒光定量 PCR檢測的數(shù)據(jù)處理及結(jié)果報告 衛(wèi)生部臨床檢驗中心 李金明 基本概念 ? 線性基線期 (Linear baseline phase) 為 PCR擴增的四個主要階段之一（圖）。線性基線期為擴增最初的 10~15個循環(huán)，此時， PCR反應(yīng)處于起始階段，擴增產(chǎn)物很少，所產(chǎn)生的熒光信號很低，因此，基線熒光信號可根據(jù)此階段產(chǎn)生的熒光信號來計算。進入擴增指數(shù)期初期，熒光強度達到一個閾值，該閾值通常為基線熒光信號均值標準差的 10倍。 CT或 CP與原始擴增模板數(shù)量正負相關(guān)，可通其與原始模板的函數(shù)關(guān)系，來計算原始模板的數(shù)量。PCR達到其最大的擴增階段，理想條件下，每一循環(huán)后， PCR產(chǎn)物倍比增加。擴增達到平臺期，此時，熒光信號不再隨擴增循環(huán)數(shù)的增加而增加 。主要的計算方式是以擴增過程前 3到 15個循環(huán)的熒光值的 10倍標準差為閾值，當熒光值超過閾值時的循環(huán)數(shù)則為閾值循環(huán)數(shù)（ Ct）
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