激光共聚焦顯微鏡原理和操作-展示頁
2025-05-22 02:29本頁面
【正文】 的測量 ? 籠鎖解籠鎖的測量 ? 熒光能量共振轉(zhuǎn)移 （ FRET） 的測量 ? 其他應(yīng)用 激光掃描共焦顯微鏡應(yīng)用 一、定位、定量 ? 免疫熒光標(biāo)記（單標(biāo)、雙標(biāo)或三 標(biāo)）的定位、定量：如：細(xì)胞膜受體或抗原的分布， 微絲、微管的分布、 兩種或三種蛋 白的 共存 與 共定位 、蛋白與細(xì)胞器的 共定位、核轉(zhuǎn)錄因子轉(zhuǎn)位和干細(xì)胞的 增值、分化 ? 細(xì)胞凋亡 : AnnexinVfitc + PI 末端原位雜交 fitc + PI ? 熒光原位雜交： 染色體基因定位 激光掃描共焦顯微鏡應(yīng)用 ? 定位 、 定量研究中常用熒光探針 Probes 與抗體耦聯(lián) 、 與配體耦聯(lián) 、 與肽耦聯(lián) 、 與人工合成的寡聚核苷酸耦聯(lián)的探針 ， 可用于免疫組化 、 熒光原位雜交 、 受體標(biāo)記等 Green Red Furared FITC 494/518 TRITC 544/572 Cy5 650/690 (異硫氰基熒光素 ) (四甲基異硫氰基羅丹明 ) Alexa Fluor 488 488/530 PE 565/578 (藻紅蛋白 ) Texas Red 595/615 (德州紅 ) Cy3 558/568 BODIPY FL 503/512 BODIPY TMR 543/569 BODIPY TR 592/618 激光掃描共焦顯微鏡應(yīng)用 1)細(xì)胞表面抗原 、 胞內(nèi)某種蛋白 免役熒光標(biāo)記： 與抗體耦聯(lián) , 直標(biāo) : 一抗 +熒光探針 間標(biāo) : 二抗 +熒光探針 如 : 微管蛋白 tublin ( 抗 tublin抗體 +熒光探針 ) 肌動蛋白 actin ( Palloidine+熒光探針 ) 2)細(xì)胞膜表面受體 配體 +熒光探針 如 : nAchR、 mAchR、 多巴胺受體 (D1,D2) 標(biāo)記 Gm1: 霍亂毒素受體 霍亂毒素 +FITC 激光掃描共焦顯微鏡應(yīng)用 細(xì)胞器 熒光探針 1)線粒體 Mitochondria Rodamin 123 505/534 ，可染活細(xì)胞，陽離子 , 可檢 測線粒體膜電位 , 且在多數(shù)細(xì)胞中停留 時間短 JC1 線粒體膜電位低時為單體 490/527 發(fā)綠光 線粒體膜電位高時為多聚體 490/590 發(fā)紅光 可標(biāo)記活細(xì)胞線粒體，且為檢測線粒體膜電位最 佳探針 Mitotracker Green FM 490/516, 染活細(xì)胞或固定細(xì)胞 , 穩(wěn)定不漏出 Mitotracker Orange CMTMRos 551/576, (氧化型 ) Mitotracker Orange 還原型 , 只能染活細(xì)胞 激光掃描共焦顯微鏡應(yīng)用 2)溶酶體 Lysosome 中性紅 541/640: 微偏堿性 , 可標(biāo)記溶酶體等酸性器官 為非特異性 AO : LysoTracker Green DND
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