20xx人教版高中生物選修一53血紅蛋白的提取和分離-文庫吧資料
2024-12-17 14:55本頁面
【正文】 洗脫。 色譜柱的制作過程：準(zhǔn)備材料→加工橡皮塞→安裝色譜柱 下面進(jìn)行第二步――凝膠色譜柱的裝填。 根據(jù)教材圖 5－ 19，說出制作色譜柱需要的材料。怎樣將雜蛋白與血紅蛋白分離開來呢？我們來研究蛋白質(zhì)提取和分離的第二個(gè)步驟――粗分離（凝膠色譜操作）。 總結(jié)：通過以上四個(gè)基本過程，紅細(xì)胞中的血紅蛋白就被提取 出來。 思考：為何使用 pH＝ 7的磷酸緩沖液？為什么緩沖液量遠(yuǎn)多于血紅蛋白溶液量？ 維持血紅蛋白的正常特性。半透膜的選擇透過性，大分子物質(zhì)不能通過半透膜，離子和小分子能夠通過半透膜。怎樣除去這些雜質(zhì)呢？由于它們的密度不同，科學(xué)家采取了離心分離的方法： 紅細(xì)胞破碎混合液→中速長時(shí)離心（ 2021c/min 10min）→濾紙過濾除去脂質(zhì)→分液漏斗分離出血紅蛋白 ？。加入甲苯的目的是溶解細(xì)胞膜，有利于血紅蛋白的釋放和分離。 思考：你有什么方法將紅細(xì)胞中的血紅蛋白釋放出來？ 加入蒸餾水，用玻璃棒快速攪拌一段時(shí)間。洗滌紅細(xì)胞的目的是什么？ 除去血漿蛋白的雜蛋白，有利于后續(xù)步驟的分離純化。 該化合物是由 和 構(gòu)成的，其中每個(gè)亞基中都含有一個(gè)能與 O2和 CO2結(jié)合的 基團(tuán)。并思考回答下列問題： 血液由 和 兩部分組成。因?yàn)樵摷?xì)胞中沒有細(xì)胞核，血紅蛋白含量高。因?yàn)榈鞍踪|(zhì)的來源和性質(zhì)不同，分離方法差別很大。 2．實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) ？ 樣品處理、粗分離、純化、純度鑒定。 ［思考］閱讀教材后，填寫下表： 決定運(yùn)動(dòng)方向 形成庫侖力 形成阻力 決定運(yùn)動(dòng)速率 電荷性質(zhì) √ 電荷量 √ √ 分子形狀 √ √ 分子大小 √ √ （ 2）分離方法： 瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯酰胺經(jīng)膠電泳等 。 （ 2）緩沖液作用： 抵制外界酸、堿對溶液 pH的干擾而保持 pH穩(wěn)定。 （ 3）分離過程：（圖 5－ 13b） 混合物上柱→洗脫→大分子流動(dòng)快、小分子流動(dòng)慢→收集大分子→收集小分子 ＊洗脫：從色譜柱上端不斷注入緩沖液，促使蛋白質(zhì)分子的差速流動(dòng)。 1． 1凝膠色譜法（分配色譜法）： （ 1）原理：（圖 5－ 13a）分子量大的分子通過多孔凝膠顆粒的間隙，路程短，流動(dòng)快；分子量小的分 子穿過多孔凝膠顆粒內(nèi)部，路程長，流動(dòng)慢。所以需要從細(xì)胞中提取蛋白質(zhì)進(jìn)行研究。 專題 5 DNA 與蛋白質(zhì)技術(shù) 課題 血紅蛋白的提取和分離 一、【 課題目標(biāo)】 （一）知識(shí)與技能 嘗試從血液中提取和分離血紅蛋白 了解色譜法、電泳法等分離生物大分子的基本原理
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