蛋白質(zhì)與dna的相互作用-文庫吧資料
2024-11-04 05:28本頁面
【正文】 能確定序列鹼基變化對(duì) 結(jié)合的影響 隨機(jī)PCR:結(jié)合序列鹼基變化對(duì)結(jié)合的影響,第二十九頁，共三十七頁。,隨機(jī)(su237。) 5.DNA序列是固定的,第二十七頁，共三十七頁。,1.DNAaseⅠ隨機(jī)水解核苷酸磷酸二酯鍵 每一個(gè)DNA分子最好只切一次 2.蛋白質(zhì)與DNA結(jié)合保護(hù)DNA不被切割 3.電泳用的是變性凝膠： 相差一個(gè)核苷酸DNA彼此分開 蛋白質(zhì)從DNA分子上脫落 4.可確定與蛋白質(zhì)結(jié)合的DNA序列(x249。j236。)分析,第二十五頁，共三十七頁。,DNA足跡(z 3.用競(jìng)爭(zhēng)性抑制檢測(cè)DNA與蛋白質(zhì)結(jié)合的特異性 4.加3ug Poly(dIdC)減少非特異性結(jié)合 5.超級(jí)(chāoj237。,1.蛋白質(zhì)和DNA結(jié)合復(fù)合物半衰期短 電泳緩沖液低離子強(qiáng)度 凝膠的籠效應(yīng) 2.探針以20200bp 為宜。 h242。n),用不含NP40的裂解液洗一次,100ul提取緩沖液,干冰異丙醇速凍，反復(fù)凍融3次,離心,沉淀 —800C保存,第二十二頁，共三十七頁。 jiě)液、冰浴5分鐘、離心,沉淀(ch233。,1X107細(xì)胞(x236。i s249。qīng)和培養(yǎng)基 裂解細(xì)胞：Triton X100 NP40 去胞漿成分 裂解細(xì)胞核：高濃度KCl :600mM 變更緩沖液濃度,第二十頁，共三十七頁。,第十九頁，共三十七頁。ngch233。g242。nɡ)氨基酸Agr和Lys,第十七頁，共三十七頁。,亮氨酸拉鏈(lāli224。nɡ yu225。,第十五頁，共三十七頁。diǎn)： 1.蛋白質(zhì)多形成二聚體,第十三頁，共三十七頁。ng) SP X X： Ser磷酸化 TPKK： Tyr磷酸化 磷酸化后和DNA結(jié)合能力下降 磷酸化失去氫鍵,第十二頁，共三十七頁。,3
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