【正文】 點并不完全落在直線上，此時應求出面積比和重量比的比值與其平均位的標準偏差，在使用過程中應定期進行單點校正，若所得值與平均值的偏差小于2，曲線仍可使用，若大于2，則應重作曲線，如果曲線在鉸短時期內(nèi)即產(chǎn)生變動，則不宜使用內(nèi)標法定量。對積分裝置發(fā)生懷疑的最有力的證據(jù)是：面積比可變，而峰高比保持相對恒定，在用內(nèi)標法做色譜定量分析時，先配制一定重量比的被測組分和內(nèi)標樣品的混合物做色譜分析，測量峰面積，做重量比和面積比的關系曲線，此曲線即為標準曲線。進樣量應足夠小并保持不變，這樣才不致于造成檢測器和積分裝置飽和?；瘜W方面的因素包括：內(nèi)標物在樣品里混合不好；內(nèi)標物和樣品組分之間發(fā)生反應，內(nèi)標物純度可變等。影響內(nèi)標和被測組分峰高或峰面積比值的因素主要有化學方面的、色譜方面的和儀器方面的三類。首先你要了解何為內(nèi)標法內(nèi)標法是一種間接或相對的校準方法。具體就是配制不同濃度的標準溶液，記錄樣品和內(nèi)標峰面積，計算樣品/內(nèi)標峰面積比值R樣品/內(nèi)標，利用樣品濃度C對比值R樣品/內(nèi)標作直線回歸，得回歸方程，作為標準曲線。外標法簡便，但進樣量要求十分準確，要嚴格控制在與標準物相同的操作條件下進行，否則造成分析誤差，得不到準確的測量結果。內(nèi)標法的優(yōu)點是測定的結果較為準確，由于通過測量內(nèi)標物及被測組分的峰面積的相對值來進行計算的，因而在一定程度上消除了操作條件等的變化所引起的誤差。內(nèi)標法是將一定量的純物質(zhì)作內(nèi)標物，加入到準確稱量的試樣中，根據(jù)被測試樣和內(nèi)標物的質(zhì)量比及其相應的色譜峰面積之比，來計算被測組分的含量。再將內(nèi)標物加入欲測組分的樣品中，進樣后測得欲測組分和內(nèi)標物的定量參數(shù)。5次重復實驗的 RSD范圍為 % ~ %, 回收率范圍為 % ~ %, 可以滿足定量需要。以最低濃度標樣重復進樣 5次, 取其 3倍標準偏差為檢測限, 10倍標準偏差為定量限, 根據(jù)樣品處理過程將結果換算為ug /g , 得到該方法的檢測限和定量限方法的回收率和重復性采用標準加入法測定方法的回收率。方法的線性關系及檢測限準確稱取 7種目標物的標準品, 用甲醇稀釋配制成 7種目標物的標準溶液, 根據(jù)需要用甲醇分別稀釋配制成 5級標準工作溶液, 濃度范圍如表 3所示,在選定的色譜條件下,分別進樣分析。當這些重現(xiàn)性(RSD)都能滿足要求時。至于天與天之間的重現(xiàn)性也不應大于10%、當上述重復性滿足要求后，說明該方法在你的實驗室是可靠的。這一RSD值應不大于5％。如果樣品要經(jīng)過預處理，還應測定同一樣品多次處理的重復性。作為方法開發(fā)人員，首先應測定重復性，即在相同條件下連續(xù)進樣5—10次，統(tǒng)汁待測組分的保留時間和峰面積(或峰高)的RSD，一般要求保留時間的RSD不大于1％，峰面積的RSD不大于5%。重現(xiàn)性和重復性都用多次分析所得結果的相對標準偏差(RSD)來表示。但大多數(shù)歐洲學者會嚴格區(qū)分二者的不同。與此近似的另一個術語是重復性(repeatability)，常指同一個人在同一臺儀器上重復進樣所得結果的一致性。當樣品處理過程較復雜時，應分步測定回收率，最后針對回收率最低的步驟進行方法改進，以期提高整個方法的回收率。處理后測得的組分含量與處理前加入量的比率乘以100就得到了回收率。兩份樣品所得待測組分峰面積的比率乘以100即是該組分的回收率?；厥章士捎孟率龊唵畏椒y定：配置一定濃度的標準樣品，將其兩等分，其中一份按方法步驟進行預處理，然后用GC分析。如果樣品經(jīng)過了預處理，如萃取工藝，那就必須考慮整個方法的回收率。如果樣品未經(jīng)任何預處理，則回收率一般可不考慮。此外，仔細優(yōu)化分離條件、適當加大進樣量(如采用大體積進樣技術)也是降低檢測限的常用方法。作為分析方法，檢測限無疑是越低越好。設此時濃度為c、相應的峰高為h(信號強度單位)、基線噪聲為N(與h的單位相同)，則檢測限可按下面公式計算：c／h＝DL/3N；即DL＝3Nc／h 噪聲的大小與儀器的性能，特別是檢測器及其電子電路的穩(wěn)定性直接相關，也與載氣的純度、色譜柱的性能及操作條件有關。憶驗證定量方法時，還將10倍信噪比所對應的樣品濃度叫做最小定量限，當用于法規(guī)分析時，這一數(shù)據(jù)應等于或低于法規(guī)方法所要求的實際樣品中待測組分的最低允許濃度。2．方法的檢測限檢測限(DL)是指方法可檢測到的最小樣品量(濃度)。當相關系數(shù)大于0．99時，就可認為足線性的，小于0．99時，就超出了線性范圍。這一線性范圍應覆蓋樣品組分濃度整個變化范圍。1．方法的線性范圍即檢測器響應值與樣品量(濃度)成正比的線性范圍，它主要由檢測器的特性所決定?？煽啃詣t包括定量的線性范圍、檢測限、方法回收率、重復性、重現(xiàn)性和準確度等。通過后有動態(tài)批送檢，合格就送到國家局 等批件，這就要很久了 穩(wěn)定性考察還要繼續(xù)進行一般長期到36個月 上面是一個項目的主要流程、制劑還要進行處方篩選，一般在小試、中試是進行、方法學也在這個時候進行（主要含量、有關物質(zhì)）固體還有釋放度，原料有殘留溶劑、其他已知雜質(zhì)都要有方法學的支持 針劑也要有處方的篩選、臨床稀釋液相容性、管道相容性固體分速釋、緩釋、口崩、混懸等這些都不同、從工藝到方法學都不同實驗室的所有儀器都必須通過驗證、校準才能用、外教一般是華南計量所的每隔一年一次（液相兩年一次）這中間、每半年應該有一次內(nèi)部校準、每一年又一次驗證（做了驗證可不做內(nèi)角）紫外、紅外也一樣第三篇：色譜方法學驗證色譜方法學驗證所謂方法驗證(validation，又叫認證)就是要證明所開發(fā)方法的實用性和可靠性。第二篇：方法學驗證（精選）