乙肝表面抗原的elisa法定量分析方法學(xué)驗證畢業(yè)論文-文庫吧資料
2025-06-25 00:52本頁面
【正文】 一參數(shù)表示相對標(biāo)準(zhǔn)偏差，也就是變異系數(shù)CV值，HBsAg 6ng/%，顯示孔間差異較大，精密度不高，但是也符合ng/ml級RSD水平的一般應(yīng)15%的要求，與其它孔比較差異較大，可能是由于操作引起例如加樣不準(zhǔn)。3177。%，顯示準(zhǔn)確性好。2. 結(jié)果 標(biāo)準(zhǔn)曲線與線性范圍標(biāo)準(zhǔn)品理論濃度對應(yīng)的實測OD值 表4 實測OD值HBsAg(ng/ml)8421OD 以HBsAg理論濃度為橫坐標(biāo)，所測OD值為縱坐標(biāo)作圖，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線觀察線性關(guān)系，結(jié)果顯示R2=，顯示具有良好的相關(guān)性 圖1 線性關(guān)系圖 準(zhǔn)確度（回收率）的驗證 質(zhì)控品理論稀釋濃度對應(yīng)實測濃度值 表5 實測濃度值HBsAg(ng/ml)測定值1234563質(zhì)控品做了3個濃度梯度，每個濃度做了5個復(fù)孔，下表是對每個濃度梯度進(jìn)行準(zhǔn)確度（回收率）的驗證。加入終止液，50 ul/ well。 表3 鋪板方案12345AS1C1C2C3PBSBS2C1C2C3PBSCS3C1C2C3DS4C1C2PBSES5C1C3PBSFS6C2C3PBS．加樣步驟加入酶標(biāo)抗體，50 ul/well，震蕩。 表2 質(zhì)控品的稀釋方案編號終濃度（ ng/ml）預(yù)加1PBS取剩余（ul）標(biāo)記（ul）C16150標(biāo)準(zhǔn)品450C23300C1300300C3300C2300300．鋪板方案 取出試劑盒中已包被酶標(biāo)板，取出板條，按照下表鋪板方案進(jìn)行鋪板在相應(yīng)孔中依次加入系列標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品及空白對照，每孔50ul。50ul/well, 共1孔需50ul，每孔配置60ul備用，按照下表稀釋方案進(jìn)行稀釋。標(biāo)準(zhǔn)品的配置：原始標(biāo)準(zhǔn)品濃度為8 ng/ml。 儀器酶標(biāo)儀：BioRad 680 ；洗板機：BioRad 1575；超純水系統(tǒng)：Millipore Elix ；電熱恒溫培養(yǎng)箱(DNP9052)上海精宏實驗設(shè)備有限公司；振蕩器（蘇州管械，KJ201A）；移液器；Tip頭；EP管。目前臨床上多傾向于做定量分析，若想知道檢驗結(jié)果是否可靠，實驗室則必須對所用試劑盒進(jìn)行方法學(xué)驗證，本實驗對福州藍(lán)圖生物工程有限公司生產(chǎn)的HBsAg的ELISA法定量分析試劑盒進(jìn)行準(zhǔn)確度，精密度和檢測限等方法學(xué)驗證，現(xiàn)報告如下。隨著免疫學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，抗原抗體檢測靈敏度明顯提高，使低水平乙肝病毒得以檢出，對臨床診斷及流行病學(xué)有重要意義[1]。結(jié)論：該HBsAg的ELISA法定量分析試劑盒不能用于臨床標(biāo)本的分析。方法：ELISA法定量分析，應(yīng)用試劑盒HBsAg標(biāo)準(zhǔn)品從濃度為8ng/ml做2倍稀釋的6個濃度梯度做標(biāo)準(zhǔn)曲線，以6，3，精密度和檢測限等方法學(xué)驗證。 畢 業(yè) 論 文題 目：乙肝表面抗原的ELISA法定量分析方法學(xué)驗證 姓 名： 學(xué) 號： 專 業(yè)： 指導(dǎo)教師： 教師職稱： 研究起止日期： 研究提交日期： 二 ○一 三 年 十一 月 目 錄畢業(yè)論文 乙肝表面抗原的ELISA法定量分析方法學(xué)驗證中文摘要................................................................................................1英文摘要................................................................................................1前言........................................................................................................2.........................................................................................3........................................................................................3........................
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