3蛋白質(zhì)濃度測(cè)定方法-文庫(kù)吧資料
2024-10-04 01:12本頁(yè)面
【正文】 加水補(bǔ)足 1毫升，平行做兩份。當(dāng)天使用。 試劑：一： 1， 4%碳酸鈉； 2， ；3， 1%硫酸銅； 4,2%酒石酸鉀鈉。該化合物在 750nm有最大吸收峰。 第二十頁(yè)，共三十五頁(yè)。在攪拌下參加 10% NaOH溶液 300ml，用蒸餾水稀釋到 1升，貯存在內(nèi)壁涂有石蠟的瓶中，可長(zhǎng)期保存。 5H2O〕和 g酒石酸鉀鈉〔 NaKC4H4O6 試劑 一 試劑 1．標(biāo)準(zhǔn)酪蛋白溶液〔 5mg/ml〕 用 ： 5g酪蛋白加 液至 1 000ml。 在一定的實(shí)驗(yàn)條件下，未知樣品溶液與標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)溶液同時(shí)反響，并于540~560nm測(cè)定，即可以通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)曲線求出未知樣品的蛋白質(zhì)濃度。因蛋白質(zhì)含有兩個(gè)以上的肽鍵，所以有雙縮脲反響。 雙縮脲反響 :堿性環(huán)境 H2O O=C C=O HN NH RCH CHR O=C Cu C=O HN NH RCH CHR H2O 紫色絡(luò)合物 第十八頁(yè)，共三十五頁(yè)。 雙縮脲法 N 端 C 端 第十六頁(yè)，共三十五頁(yè)。 假設(shè)測(cè)定的樣品含氮局部只是蛋白質(zhì)，那么樣品中蛋白質(zhì)含量〔 %〕 =總氮量 假設(shè)樣品中除有蛋白質(zhì)外，尚含有其他含氮物質(zhì)，那么需向樣品中參加三氯乙酸，然后測(cè)定未加三氯乙酸的樣品及參加三氯乙酸后樣品上清液中的含氮量，得出非蛋白氮及總氮量，從而計(jì)算出蛋白氮，再進(jìn)一步算出蛋白質(zhì)
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